论舒筋颗粒对卒中后肌张力增高模型大鼠的影响

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1、论舒筋颗粒对卒中后肌张力增高模型大鼠的影响摘要：【目的】观察舒筋颗粒对卒中后肌张力增高模型大鼠的影响。【方法】选用SPF级SD大鼠，复制肌张力增高模型，将造模成功大鼠随机分为3组：模型组、巴氯酚组(剂量为135mg·kg-1·d-1)、舒筋颗粒组(剂量为675g·kg-1·d-1)，连续给药12d。比较各组治疗后不同时间点较治疗前肌张力改善的级数，并采用免疫细胞化学染色法检测各组大鼠脊髓组织γ氨基丁酸(GABA)表达情况。【结果】各组大鼠肌张力等级评分改善程度比较，治疗后3、6d差异无显著性意义(P>005),治疗后9、12d，舒筋颗粒组、巴氯酚组与模型组比较差异均有

2、显著性意义(P<005或P<001),而两治疗组间比较差异无显著性意义(P>005)。与模型组比较，舒筋颗粒组和巴氯酚组均能降低脊髓后角GABA表达(P<005),而两治疗组作用相仿(P>005)。【结论】舒筋颗粒治疗卒中后肌张力增高的作用可能与其能降低脊髓组织中GABA表达有关。关键词：舒筋颗粒/药理学;肌张力增高/中药疗法;脊髓/病理学;疾病模型，动物;大鼠肌张力增高是脑血管意外的常见并发症。由于该并发症限制了患者运动功能的恢复，很大程度上影响了患者日常活动能力和肢体康复效果，故这已成为康复治疗的难点之一。舒筋颗粒是中医脑病专家黄培新教授

3、治疗卒中后肌张力增高的经验方，对改善由脑血管意外所造成的肢体痉挛有肯定的疗效[1]。γ氨基丁酸(gammaaminobutyricacid,GABA)为中枢神经系统最重要的抑制性递质之一，也是药物降低肌张力的作用位点[2]。本实验通过观察舒筋颗粒对卒中后大鼠肌张力及大鼠脊髓后角GABA表达的影响，探讨舒筋颗粒降低肌张力的作用机理，现报道如下。　　1材料与方法　　11实验动物SPF级SD大鼠70只，体质量200~250g，雌雄各半，分笼饲养。由广州中医药大学动物实验中心提供(合格证编号：0000590)。　　12药物舒筋颗粒由江阴天江药业有限公司生产，由芍药、木瓜、甘草组成;巴

4、氯酚由卫达化学制药股份有限公司提供(批号:T0150D)，实验时大鼠用药量计算公式：m人用药/d×0018×5=m大鼠用药/kg。　　13主要试剂与仪器SP试剂盒为美国BDBiosciences公司产品;GABA试剂盒为美国SantaCruzBiotechnology,Inc.公司产品;Q500型病理图像分析仪(德国LEICA);CX21型生物摄影显微镜(日本OLYMPUS);HM550型冰冻切片机(德国美康)。　　14肌张力增高大鼠模型复制[3]将麻醉后的大鼠俯卧位固定于脑立体定位仪上，剃毛，常规消毒，沿正中线头皮下切开颅顶皮肤，暴露颅骨，于前囟后64mm向左旁开矢状缝1

5、0mm处颅骨表面用牙科钻钻孔，将固定在立体定向仪上的阳极针电极插入约95~96mm，阴极接鼠尾，以15mA直流电通电作用22s，拔出电极后缝合头皮，通过电流作用破坏内囊后肢的锥体束，复制肌张力增高模型。　　15模型成功评定标准　　151后肢运动评分采用改良的Tarlov分级评分法[4]。0级：完全瘫痪，不能做任何运动;1级：严重瘫痪，不能支撑身体，可以有轻微的运动，但不能做类似于爬行的动作;2级：瘫痪，不能支撑身体，但能够做爬行动作;3级：轻度瘫痪，能够支撑身体，但行走时不稳，有跛行;4级：无瘫痪，行走自如。　　152肌张力评分采用AshL，巴氯酚组按计算所得药量

6、以135mg·kg-1·d-1剂量灌服，舒筋颗粒组以675g·kg-1·d-1剂量灌服，均每天1次，连续给药12d。　　17观察指标及检测方法　　171肌张力改善情况按治疗前及治疗后3、6、9、12d比较各组不同时间点肌张力改善级数差值。　　172GABA检测方法采用光镜下观察和平均光密度分析(Mean)法。腹腔内注射10mg/L的水合氯醛麻醉后开胸，沿剑突下剪开皮肤肌肉，暴露心脏;经左心室通过升主动脉直达主动脉弓处，剪开左心耳，快速滴注生理盐水至大鼠手足尾巴变白，继而快速输入40g/L的多聚甲醛磷酸盐缓冲液(PBS)250mL(4℃)，直至动物肌肉震颤、全身呈完全僵

7、硬状态;原位静置1h后，剪开背部皮肤肌肉，暴露脊柱;用咬骨钳钳去脊椎骨，暴露脊髓，将颈膨大部位脊髓取出，放入40g/L的多聚甲醛磷酸缓冲液(含01mol/LPBS)中进行后固定4h，然后浸入300g/L蔗糖磷酸缓冲液(pH74，4℃)过夜，直至组织下沉，再放入PBS(pH74)液中，0℃~4℃冰箱中备用。按免疫细胞化学法染色，用PBS替代一抗作阴性对照;用已知的阳性片作为阳性对照。　　18统计学处理采用SPSS110统计软件建立数据库并进行数据录入和分析。