超声波提取鱼腥草总黄酮及鉴别

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1、超声波提取鱼腥草总黄酮及鉴别黄锁义，万承俊，邹永芳，李容【关键词】超声波提取；,,鱼腥草；,,总黄酮；,,鉴别　　摘要：目的为充分利用鱼腥草植物资源，探讨鱼腥草总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从鱼腥草中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用紫外分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量C=6.48%，回收率为102.4%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无任何污染，是提取鱼腥草黄酮类物质的有效途径。　　关键词：超声波提取；鱼腥草；总黄酮；鉴别　　TheE

2、xtractionandIdentificationofTotalFlavanonefromHouttuyniaCordataThunb.byUltrasonicakeuseoftheresourcesofHouttuyniacordataThunb.,theextractionidentificationoftotalflavanoneofHouttuyniacordataThunb.HouttuyniacordataThunb.etrytoextractandchecktheflavanoneo

3、fHouttuyniacordataThunb..ResultsThecontentofthetotalflavanoneofhouttuyniacordataThunb.ethodisapurelyphysicalprocess,andhasnotanypollution.Itisanideall95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，滤渣再加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，合并滤液，减压回收乙醇至仅剩5~7ml为止，放置250ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。　　2.2

4、测定方法依据以芦丁为对照品测定鱼腥草中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。　　2.3定量实验总黄酮的含量测定　　2.3.1波长的选择取样品液适量，在0.3ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420~700nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。　　2.3.2标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.1mg/ml）0.00，0.50，1.0

5、0，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，静置6min；再加10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白，于510nm处测吸光度。结果见表1。　　表1紫外可见分光光度计测定芦丁对照液吸光度（略）　　根据上表得回归方程：A=2.141×104+14.377C，r=0.9999。　　2.3.3提取物含量的测定精密吸取样品液0.50ml，置10m

6、l容量瓶，按标准曲线的制备操作测定吸光度,A=0.910，根据回归方程：A=2.141×104+14.377C，计算样品中总黄酮的含量C=6.48%。　　2.3.4回收实验精密量取样品液2ml，加入标准芦丁对照品2ml（0.1mg/ml），同前样品测定方法操作测定吸光度，求出回收率为102.4%。　　2.4定性实验总黄酮的鉴别　　2.4.1颜色反应紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在滤纸上，在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏0.5

7、min，立即在紫外光下观察，呈极明显的黄褐色荧光斑点。三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加１％三氯化铝乙醇溶液，吹干。在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈黄色荧光斑点。乙酸镁反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加1%乙酸镁甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黄色斑点。盐酸镁粉反应：取乙醇提取液1ml于试管中加镁粉，再加入浓盐酸数滴（1次加入），在泡沫处呈紫红色。　　2.4.2纸层析取样品溶液10μl点在滤纸上。用正丁醇:醋酸∶水=4∶1∶5为展开剂，上行展开5h，取出晾干。喷1%氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可

8、见荧光斑点。　　3讨论　　实验结果表明，本实验方法工艺简单，回收率为102.4%，利用本文所提供的超声波提取、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度较高。超声波可以强化乙醇浸提法，达到省时、高效、节能的目的，此方法采用全物理过程，无任何污染，是一条理想的提取黄酮类物质的途径，具有广阔的应用前景。黄酮类化合物是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类