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《益气化瘀中药对大鼠胃癌前病变蛋白激酶c及细胞周期》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、益气化瘀中药对大鼠胃癌前病变蛋白激酶C及细胞周期【摘要】：目的观察益气化瘀中药对大鼠胃癌前病变胃黏膜蛋白激酶C(PKC)、细胞周期素E(CyclinE)表达的影响。方法采用甲硝基亚硝基胍(MNNG)、乙醇、饥饱失常等多因素造模。造模成功后,将造模存活大鼠随机分为自然恢复组及中药高、中、低剂量组,各组大鼠做相应的处理后,免疫组化法检测各组大鼠胃黏膜组织PKC、CyclinE表达水平。结果各治疗组PKC表达及CyclinE蛋白阳性率较自然恢复组下降,有显著差异(P<0.05)。结论益气化瘀中药可能是通过下调PKC及CylinE的表达,
2、抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,而发挥对大鼠胃癌前病变的治疗作用。【关键词】胃癌前病变 蛋白激酶C 细胞周期素E 益气化瘀中药 大鼠 Abstract：ObjectiveToobservetheeffectofYiqiHuayuRecipeontheexpressionofproteinkinaseC(PKC)andCyclinEinratsodelofGPLainlythroughN-methyl-N-nitroN-nitrosoguanidine(MNNG)togetherulationandunduehungerandovereat
3、ing.Thesurvivedratsaftermodelinglydividedintospontaneousrecovery,andhigh-,moderate-andloent,theexpressionofPKCandCyclinEmunohistochemicalmethodineachgroup.ResultsTheexpressionofPKCandCyclinEintrementgroupentofratsL。 1.2造模及给药 选用SPF级6周龄SD雄性大鼠62只,体质量100～120g。造模参照严氏等[1-3]综
4、合造模方法并加以改进。大鼠自购进后适应性喂养1d。从62只大鼠中随机抽取13只作为正常组,其余49只用于造模。正常组大鼠不做任何处理；造模大鼠每日自由饮用100mg/LMNNG液(饮料瓶用油漆涂黑避光)、进食含0.3g/L雷尼替丁的纯鼠饲料、上午用56℃150g/L的氯化钠液按10mL/kg灌胃,进食2d,禁食ld,进食当天下午用8.5g/L脱氧胆酸钠溶液按l0mL/kg灌胃,禁食当天下午用400mL/L乙醇按l0mL/kg灌胃,连续24周。24周末时随机抽取正常组和造模大鼠各1只,杀检,观察组织病理学变化(以HE染色光学显微镜下观察的
5、结果为主),确认模型是否成功。 造模型成功后,将造模存活的48只大鼠随机分为自然恢复组l2只,中药高、中、低剂量组(简称高、中、低剂量组)各12只。高剂量组每日每只按20g/kg(相当于成人1d用量的2倍)灌胃,中剂量组按10g/kg(相当于成人1d用量)灌胃,低剂量组按5g/kg(相当于成人1d用量的一半)灌胃。治疗16周。自然恢复组同正常组大鼠常规饮食。40周末所有动物禁食1d,处死,剖腹取胃,沿胃大弯剪开,生理盐水冲洗,肉眼观察,平铺于硬纸板上,于胃窦部剪取组织1块,40g/L多聚甲醛固定,石蜡包埋,切片5mm,免疫组织化学染色
6、。 1.3检测方法及判断标准 免疫组织化学用SP法,按试剂说明书操作,DAB显色,PBS代替一抗作阴性对照,已知阳性切片作阳性对照。CyclinE定位于细胞核,免疫组化染色阳性信号为棕色和棕黄色；PKC主要存在于胞浆,免疫组化染色阳性信号为黄色。 CyclinE每张切片随机选取4个400高倍视野。“-”：无阳性细胞或阳性细胞数<5%；“+”：阳性细胞数5%～20%；“++”：阳性细胞数20%～60%；“+++”：阳性细胞数≥60%。PKC每张切片随机取染色区域4个高倍视野阳性细胞平均数,用半定量计分[4]。染色强度用0～3级
7、计分：0为无染色；1为轻度阳性染色；2为中度阳性染色；3为强阳性染色。染色范围根据细胞阳性染色的百分数分为0～4级：0为无染色；1为5%～10%细胞染色；2为10%～20%细胞染色；3为20%～50%细胞染色；4为>50%细胞染色。染色总评分为染色强度＋染色范围。 1.4统计学方法 计数资料用卡方检验,计量资料用t检验,数据用x±s表示,P<0.05认为有显著性意义。 2结果 (见表1、表2)表1各组大鼠PKC蛋白表达情况(略)注：与自然恢复组比较,*P<0.05；与正常组比较,#P<0.01；自然恢复组死
8、亡2只,不纳入统计(下同)表2各组大鼠CyclinE蛋白表达情况(略) 3讨论 PKC是1977年由日本学者Nishizuka等首次在鼠脑的胞质成分中发现的一种依赖磷脂和钙的蛋白激酶,其广泛分布于真核细
