[农业]丁酸梭菌对动物致病菌的拮抗作用研究

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1、丁酸梭菌对动物致病菌的拮抗作用研究谢树贵,戴青,赵述淼,徐国强,梁运祥(华中农业大学生命科学技术学院,武汉430070)摘要:探讨了丁酸梭菌(Clostridiumbutyricum)B1株对5种常见动物致病菌的体外拮抗作用。将丁酸梭菌分别与猪大肠杆菌(Escherichiacoli)K88、K99、O139株和猪肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteritidis)O4Hi株、金黄色葡萄菌(Staphylococcusaureus)混合接种于GAM培养基进行厌氧培养,并与致病菌单独培养相比较。结果发现,培

2、养48h后,致病菌菌数显著低于对照,说明丁酸梭菌B1株对猪大肠杆菌K88、K99、O139株和猪肠炎沙门氏菌O4Hi株、金黄色葡萄球菌均有显著抑制作用。关键词:丁酸梭菌;拮抗;动物致病菌中图分类号:Q939.11;Q935;S852.61文献标识码:BStudyontheAntagonismofClostridiumbutyricumAgainstAnimalPathogensXIEShu-gui,DAIQing,ZHAOShu-miao,XUGuo-qiang,LIANGYun-xiang(HuazhongA

3、griculturalUniversity,CollegeofLifeScience&Technology,Wuhan430070,China)Abstract:AntagonismeffectofClostridiumbutyricumB1strainagainstfiveanimalpathogensinvitrowerestudied.ThepureClostridiumbutyricumB1weremixedwithEscherichia.coliK88,E.coliK99,E.coliO139,Sal

4、monellaenteritidisO4HiandStaphylococcusaureusrespectivelyinGAMliquidmedium,andwereincubatedinanaerobicway,thedataobtainedfromthesingleandmixedculturewerecompared.After48hours,thedataofthepathogensinmixedweresmallerthanthesingle,whichindicatethatClostridiumbu

5、tyricumB1exertsgreatantagonismagainstthoseanimalpathogensinvitro.Keywords:Clostridiumbutiricum;antagonism;animalpathogens仔猪腹泻一直是养猪生产上的一大难题。并由此给养猪业带来了巨大的损失。由于初生仔猪肠道微生物菌群正处于形成阶段,若在饲料中添加微生物制剂,可以利用益生菌的占位效应和固本扶正的功效来调节菌群平衡,发挥生物的拮抗作用以防治仔猪腹泻,这种方法比使用抗生素和化学药物有更好的经济效益和

6、环保效益[1]。丁酸梭菌即酪酸菌,是一种革兰氏阳性厌氧芽孢杆菌,是人和动物体内正常的有益菌群。丁酸梭菌作为人用整肠药物在日本已经有几十年的使用历史,应用效果十分显著,而把它作为动物微生态制剂的研究才刚刚起步[2]。我们用实验室保存的丁酸梭菌B1株分别与5株猪常见致病菌共培养,通过菌落计数,证明了丁酸梭菌对这些致病菌的生物拮抗作用,为丁酸梭菌应用于猪饲料添加剂提供了一定的理论依据。1材料与方法1.1试验材料1.1.1菌种丁酸梭菌(Clostridiumbutyricum)B1株,猪大肠杆菌(Escherichia

7、coli)K88、K99、O139株,猪肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteritidis)O4Hi株,金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)。以上均由华中农业大学农业微生物国家重点实验室提供。1.1.2培养基梭菌增殖培养基(RCM培养基):酵母浸膏3g、牛肉浸膏10g、胰蛋白胨10g、葡萄糖5g、可溶性淀粉1g、氯化钠5g、三水合乙酸钠3g、半胱氨酸盐酸盐0.5g、0.5%美蓝0.2mL、蒸馏水1000mL;调节pH值为7.1±0.1,115℃、20min灭菌备用[3]。GAM液体培

8、养基(日本制药株式会社),LB固体培养基(本室自制)。1.2方法1.2.1菌种活化丁酸梭菌活化:冻干管保藏菌株接种于装有RCM培养基的PA瓶中,置825-A型厌氧菌培养罐(沈阳市第五人民医院)中37℃静止厌氧培养48h,置80℃水浴10min后取0.1mL转接9.9mLGAM液体培养基试管,厌氧静止培养16h。致病菌活化:将猪大肠杆菌K88株、K99株、O139株和猪肠炎沙门氏菌O4H