cathepsin b、upa和upar基因在肝

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1、CathepsinB、uPA和uPAR基因在肝【摘要】目的:探讨肝细胞肝癌（HCC）组织中组织蛋白酶B(CB)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体（uPAR）基因的表达、相互关系及作用，并分析其机制。方法:应用RT-PCR方法测定71例肝组织标本，包括对照组（C）12例，HCC组34例和癌旁组织（PTT）组25例的CBmRNA、uPAmRNA、uPARmRNA表达，分析其间的相关性。结果:HCC组CBmRNA、uPAmRNA、uPARmRNA表达均明显高于C组和PTT组，差异有显著性（P<0.01），PTT

2、组与C组间差异均无显著性（P>0.05）。CBmRNA与uPAmRNA（r＝0.805），CBmRNA与uPARmRNA（r＝0.786），uPAmRNA与uPARmRNA（r＝0.874）之间均存在显著的正相关关系（均P<0.01）。结论:肝癌组织CBmRNA、uPAmRNA、uPARmRNA均呈现高表达，它们之间可能相互诱导，协同促使肝癌的侵袭和转移。【关键词】癌肝细胞组织蛋白酶B尿纤溶酶原激活物尿纤溶酶原激活物受体Expression，relationshipandeffectofgeneofcath

3、epsinB，urokinase-typeplasminogenactivator（uPA）anditsreceptor（uPAR）inhepatocellularcarcinomaXUChang-long*，ZHENGJun-jie，XUEZhan-xiong，HUANGZhi-ming．*DepartmentofDigestiveMedicine，theSecondAffilatedHospitalofedicalCollege，ethods:TheexpressionofCBmRNA，uPAmRNAanduPAR

4、mRNAin71specimensofhumanhepatictissue，includingcontrol(C)12，hepatocellularcarcinoma(HCC)34andparatumortissueofhepatocellularcarcinoma(PTT)25erasechainraction(RT-PCR).TheexpressionofrelationshipamongCBmRNA,uPAmRNAanduPARmRNARNA,uPAmRNAanduPARmRNAinHCCRNAanduPAmRN

5、A（r＝0.805），CBmRNAanduPARmRNA（r＝0.786），uPAmRNAanduPARmRNA（r＝0.874）（allP<0.01）.Conclusion:TheCBmRNA，uPAmRNAanduPARmRNAshoayinduceeachother,promotecooperativelyinvasionandmetastasisofHCC.Keya；cathepsinB；uPA;uPAR；neoplasminvasiveness；neoplasmmetastasis基底膜和细胞外基质是肿

6、瘤细胞侵袭的第一道屏障。目前研究发现，组织蛋白酶B(CathepsinB，CB)对基底膜和细胞外基质的降解是恶性肿瘤侵袭转移的关键步骤之一[1,2]，尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-typeplasminogenactivator，uPA）与其受体（urokinase-typeplasminogenactivatorreceptor，uPAR）构成的uPA/uPAR系统介导的纤溶酶系统可能在其中发挥核心作用[3]，而它们在肝细胞肝癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）演进过程中的变化特

7、点、相互关系鲜见报道。本研究应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测肝细胞肝癌组织中CB、uPA和uPAR基因表达，分析其间的相关性，探讨它们在HCC侵袭转移中的作用和机制。1材料和方法1.1试剂与仪器CB、uPA、uPAR、β-action基因引物序列采用PrimerPremier5.0自行设计，由北京赛百盛基因技术有限公司代为合成，并用高效液相色谱法（HPLC）确认合成产物的纯度。Trizol总RNA提取试剂盒（LifeTechnologies公司生产）。PE2400PCR扩增仪（Perkin璄mer公司生

8、产）。1.2标本采集及分组取自2002-2004年温州医学院第一、第二附属医院手术切除的肝组织。所有标本离体30min内经0.1%DEPC清洗后装入冻存管，置-140oC液氮储存箱保存待用。分为：①对照组（control，C组）12例（肝外伤手术标本，病理证实为正常肝组织）。②肝细胞肝癌癌旁组织组（paratumortissueo