子痫前期外周血及胎盘组织中相关蛋白的研究(20180526001023)

《子痫前期外周血及胎盘组织中相关蛋白的研究(20180526001023)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、子痫前期外周血及胎盘组织中相关蛋白的研究目的应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术联合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术检测子痫前期及正常妊娠孕妇血浆中的差异蛋白，从而筛选出潜在的子痫前期血浆生物标志物，并初步探讨其在子痫前期屮的可能作用机制。方法临床收集2012年6刀〜2013年6刀在青岛大学附屌医院产科足月妊娠住院未临产术前子痫前期患者60例，其中子痫前期重度患者30例(重度组)，子痫前期轻度患荞30例(轻度组)，同期正常足月妊娠孕妇30例(对照组)。采血分离血浆提取总蛋白，随后对血浆总

2、蛋白进行变性、还原、酶解，iTRAQ标记后用质谱仪进行鉴定，得到差异表达蛋白。选取差异蛋白Gelsolin、S100A8应用Elisa、实吋荧光定量PCR技术进行进一步验证。结果①与正常妊娠相比，子痫前期患者血浆蛋白差异表达丰度相差1.5倍以上并经Student，st-test检验差异省统计学意义的蛋白质点育24个，其中15个点较对照组组表达上调，另9个点较之表达下调。②轻度组及電度组子痫前期患者血浆中Gelsolin水平分别为(0.288±0.013)ng/L、(0.363+0.152)ng/L,明显高于

3、对照组(0.204±0.101)ng/L,分别比较，差异均有统计学意(P<0.05);③轻度组及重度组子痫前期患者血浆屮S100A8水平分别为(0.687土0.064)ng/L、(0.928±0.101)ng/L，明显高于对照组(0.550±0.073)ng/L,分别比较，差异均宥统计学意(P<0.05)；④单因素方差分析显示子痫前期患者胎盘组织中GelsolinmRNA水平明显高于对照组(0.90±0.037),冉比较轻度组(2.44±0.614)及重度组(4.42±1.059),差异有统计学意义(P<0

4、.05)；⑤单因素方差分析敁示子痫前期患者胎盘组织中S100A8mRNA水平明显高于对照组(0.98±0.04)，再比较轻度组(3.83±0.879)及重度组(7.59±1.803),差异宥统计学意义(PC0.05);⑥子痫前期患者血浆中Gelsolin水平与胎盘组织中GelsolinmRNA的表达水平无相关性(r=0.163,P>0.05)；⑦+痫前期患者血浆中S100A8水平与胎盘组织屮S100A8mRNA的表达水平呈正相关(r=0.701,P<0.01)。结论TRAQ联合LC-MS/MS技术能够有效地

5、筛选出子痫前期差异蛋CJ。Gelsolin和S100A8的差异表达可能与子痫前期的发病存在一定关系，其或许可以作为早期诊断子痫前期的血清蛋G质标记物。子娴前期(pre-eclampsia,PE)是妊妮期特脊的疾病，为妊妮期高血压疾病屮最常见类型，基木病理变化是全身小血管痉挛、内皮损伤以及局部组织缺血缺氧，严重时可导致胎死宫内、肝肾功能衰竭、HELLP综合征、视网膜脱落等并发症的出现，在孕产妇死亡原因中排第二位Uj。既往糖尿病病史、子痫前期病史、慢性肾炎病史、高血压病史、抗磷脂抗体综合征等都是子痫前期口前已知

6、的高危因素［2］。但子痫前期的确切病因至今仍未阐明，关于其病因的学说+5］主要有：炎症免疫过度激活、子宫螺旋小动脉重铸不足、血管内皮细胞受损、营养缺乏、胰岛素抵抗等学说，但是没釘任何一个学说及其相关的早期标志物能很好的预测子痫前期的发生，往往宵至临床症状出现后才进行诊断干预，而此吋母婴已受到不同程度的损害。且口前的期待治疗措施如降压镇静、利尿、糖皮质激素的应用等处理疗效甚微，明显有效的治疗方法就是终止妊娠，但是这将会带来早产等一系列不良后果。因此，寻找早期特异性的生物标记物对子痫前期的诊断具有重要的临床意义

7、。随着分子生物学技术的飞速发展，特别是2000年人类基冈组计划草图的完成,人类生命现象的研究重心正在由“结构”內“功能”转移。基因只是遗传信息的携带者，生命活动的执行者是基冈的表达产物一蛋白质。基冈组学并不能回答蛋白质翻译后如何进行修饰、蛋白质分子之间如何相互作用等M题。丼且研究证实基因的初步表达与经过翻昂修饰后的蛋白质表达间的相关性极低［6］。这主要是因为基因组是相对固定的，而机体生理功能的执行者——蛋白质却是动态的、多样的，蛋白质的表达不仅取决于基因，还与机体木身的生理状态及外界环境紧密相关。因此要想对

8、机体生命活动有全面的、深入的认识，就必须在动态、整体、全面的水T上对蛋白质进行研究分析。蛋白质组乎(Proteomics)是蛋白质和基因组学的结合体，表示“一个基因组表达的全部蛋白质”，进一步可理解为一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。蛋白质组学木质上指的就是在大规模水Y•上对蛋白质的特征进行研究，包括蛋白质的表达，翻译后的修饰以及蛋白质分子间的相互作用。疾病蛋白质组学则是运用蛋白质组学研究的手段，通过比较正