资源描述：
《温肾化瘀利尿汤降低良性前列腺增生症所致残余尿量的》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、温肾化瘀利尿汤降低良性前列腺增生症所致残余尿量的【摘要】目的观察黄芪甘草水提物（AG）的抗诱变作用。方法观察黄芪甘草水提物对环磷酰胺诱变小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能、血清溶血素及溶血空斑形成的影响。结果黄芪甘草水提物可显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率,促进溶血素及溶血空斑形成,并显著对抗由环磷酰胺造成的诱变损伤。结论黄芪甘草水提物有显著的抗诱变作用。【关键词】黄芪（A甘草（G抗诱变；环磷酰胺黄芪自古以来就被《神农本草经》列为上品,具有补气升阳、益卫固表等功效。甘草有“国老”的尊号,中医处方离不开甘草,俗称“十方九草”,自古至今,广为药用,具有清热解毒、止渴祛痰
2、、补脾和胃、调和诸药等功效。两者对免疫系统、内分泌系统等均具有广泛的影响，因此配伍应用极具临床潜力，对AG抗诱变机制的探索将为开辟中药防治病毒感染、恶性肿瘤及其他疾病的新途径提供实验依据。 1材料与方法1.1试剂和仪器黄芪甘草水提物（AG）：黄芪（A）50g，甘草（G）25g，粉碎后加入500ml蒸馏水，浸泡30min，在烧杯中反复煎煮3次，收集药液，过滤去渣，沸腾水浴至100ml,药物浓度相当于50倍人常用剂量［1］，4℃冰箱保存待用。环磷酰胺（ＣＰ）由上海华联制药有限公司生产，腹腔注射40mg/（kg·bg/（kg·ba公司产品。二甲基亚砜（DMSO）为
3、北京化工厂产品。绵羊红细胞（SRBC）、鸡红细胞、豚鼠血清，无菌抽取动物血液制备,4℃冰箱保存备用。1.2实验动物封闭群昆明种小鼠,体重18～22g，由四川农业大学动物实验中心提供，清洁级。1.3检测指标及方法1.3.1溶血空斑形成细胞（PFC）的测定［4］小鼠60只，雌雄各半，按随机数字表法随机分成6组：阳性对照组、AG组、AG+CP组、VitC组、VitC+CP组、阴性对照组，每组10只。根据预实验确定AG最佳实验剂量为50倍人临床常用剂量。每天灌胃1次,每只0.5ml，共灌胃14天。阳性对照组、AG+CP组和VitC+CP组动物处死30h前腹腔注射CP1
4、次，给药容量1×10-3ml/（kg·bl（约含2×108SRBC）免疫动物，第14天取脾细胞经PBS洗涤（2000rpm,5min）2次后,以Gey’s调细胞为5×106ml,取此细胞悬液1ml,加0.2%SRBC1ml及1：30（用PBS稀释,v/v）豚鼠血清补体1ml,37℃水浴1h,离心3000rpm,5min,取上清于712分光光度计413nm处测OD值,设不加脾细胞的空白对照管;每一样品做两只复管。1.3.2巨噬细胞吞噬功能测定另取小鼠60只，实验分组及给药方法同上，灌胃第13天每只鼠腹腔注射10g/L淀粉溶液2ml,24h后,腹腔注射2%鸡红细胞
5、1ml,30min后,小鼠脱臼处死,腹腔内注射0.2ml肝素注射液,揉动腹部,毛细管吸取腹腔液,滴一滴于玻片上,将毛细管平放于液滴上展开液滴,自然干燥,瑞士-姬姆萨染液染色5min,pH7.2，PBS浸泡5～6min,自然干燥后,油镜观察。结果判定:观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,记数100个巨噬细胞,以及其中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数,计算吞噬百分率。吞噬百分率＝（吞噬鸡红细胞数/100个巨噬细胞）×100%鸡红细胞悬液的制备：于无菌条件下,自鸡翅下静脉采血,置100ml疫苗瓶中,加入相当于鸡血体积5倍的Alsever’s溶液（枸橼酸三钠2H2O8.0g,枸橼
6、酸0.5g,无水葡萄糖18.7g,氯化钠4.2g,蒸馏水1000ml,溶解,过滤,分装,高压消毒,4℃冰箱保存备用）混匀,4℃冰箱贮存。临用时,用生理盐水洗涤3次,前2次离心速度为1500r/min,离心5min,弃上清液和界面的白细胞层。最后应连续2次离心（2000r/min,5min），直至红细胞压积值恒定。按此值用生理盐水配成（2%和5%,v/v）红细胞悬液。1.3.3血清溶血素的测定另取小鼠60只，实验分组及给药方法同上，于第1日每鼠腹腔注射鸡红细胞悬液0.2ml,末次给受试药物1h后,摘除眼球取血,分离血清,用生理盐水将血清稀释100倍,取稀释血清1
7、ml,与5%鸡红细胞悬液0.5ml、10%豚鼠血清0.5ml混合,在37℃恒温箱中温育30min,置0℃冰箱中中止反应,离心,取上清液于721型分光光度计540nm处比色,测定吸光度。1.4统计学处理数据以x±s表示,使用SPSS统计分析软件处理，采用t检验和卡方检验进行统计分析。 2结果AG能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率，能显著促进溶血空斑和血清溶血素的生成。见表1。表1AG对小鼠PFC、巨噬细胞吞噬率、血清溶血素的影响注：与阴性对照组比较,aP<0.05;与VitC组比较,bP<0.05;与阳性对照组比较，cP<0.05;与Vit
8、C+CP组比较,dP<0.053
