兴地区汉族青少年维生素d受体基因bsmi、tru

《兴地区汉族青少年维生素d受体基因bsmi、tru》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、兴地区汉族青少年维生素D受体基因BsmI、Tru【摘要】目的:探讨维生素D受体（vitaminDreceptor，VDR）基因BsmI、Tru9I、ApaI位点多态性的分布情况。方法:随机抽取绍兴地区青少年212名作为研究对象，提取其外周血DNA，利用聚合酶链反应(PCR)、基因测序技术检测VDR基因BsmI、Tru9I、ApaI位点多态性。结果:BsmI位点基因型bb、Bb和BB的频率分布分别为89.62%、8.49%、1.89%；Tru9I位点基因型TT、Tt和tt的频率分布为61.79%、33.96%、4.25%；ApaI位点基因型aa、Aa和AA的频率分布分

2、别为60.38%、30.38%、8.96%。结论:绍兴地区汉族青少年VDR基因BsmI、Tru9I、ApaI位点具有多态性。【关键词】受体骨化三醇基因多态性青少年Abstract:Objective:ToinvestigatethedistributionofvitaminDreceptorgeneBsmI，Tru9I，ApaIsitegenepolymorphisminadolescent.Methods:Polymerasechainreaction(PCR)andDNAsequencingtechnologyedtoanalyzetheVDRgenotypei

3、n212adolescentsinShaoxingregion.Results:Thefrequencyofbb,BbandBBintheBsmIsiteorphisminthevitaminDreceptorBsmI，Tru9IandApaIsiteinadolescentofHannationalityinshaoxing.KeyinDreceptor;genepolymorphism;adolescents人类维生素D受体（VitaminDreceptor，VDR）基因位于12号染色体长臂1区3带上，全长约75kb，共有11个外显子和数个内含子[1]。VDR在

4、多种组织中均能表达，在细胞内VDR与1，25(OH)2D3激素信号分子结合成激素-受体复合物，该复合物与靶基因特定DNA序列上的激素反应元件结合，从而对结构基因的表达产生调节。因而VDR本质上是一个配体依赖的转录因子，它与1，25(OH)2D3一起在调节机体钙磷代谢、细胞增殖与分化以及免疫功能等方面起重要作用。本研究利用聚合酶链反应（PCR）和基因测序技术对绍兴地区汉族青春发育期少年VDR基因BsmI、Tru9I、ApaI位点的多态性进行分析，旨在探讨VDR基因型频率的分布，为进一步观察其与青少年的生长发育关系打下基础。1对象和方法1.1研究对象按分层抽样的方法随机

5、抽取212名绍兴地区在校正常学习和生活的青春发育期汉族少年，其中男生90名，女生122名，年龄17～18周岁，平均年龄（17.8±0.5）岁。征得老师与家长同意后，签署知情同意书，抽取全血2～3ml，采用EDTA-K2抗凝备用。1.2研究方法1.2.1基因组DNA提取：全血提取DNA试剂盒由杭州晓逸科技有限公司提供。1.2.2PCR扩增和DNA测序：根据研究需要通过美国NCBI(美国国家生物信息中心)的GeneBank获取VDR基因序列及其相应位点的单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）信息。利用Primer5.0软件设计

6、引物序列。引物由上海鼎安生物科技有限公司合成。含BsmI、Tru9I多态性位点PCR扩增的引物I序列为：P1：5'-ATAAGGAAATACCTACTTTGCTGGTTT-3'P2：5'-TAGGTGCTCAATAAATTGTTGCTAAG-3'扩增参数为95℃预变性5min；95℃变性60s，53℃复性60s，72℃延伸90s，重复35个循环；72℃延伸10min。含ApaI多态性位点PCR扩增的引物II序列为：P1：5'-ACCTAGGTCTGGATCCTAAATGCAC-3'P2：5'-GTTAGGTTGGACAGGAGAGAGAATG-3'PCR反应条件为9

7、5℃预变性5min；95℃变性45s，55℃复性45s，72℃延伸90s，重复35个循环；72℃延伸10min。PCR产物行1%琼脂糖凝胶电泳，用凝胶成像仪观察结果。PCR产物基因序列经纯化后送北京华大基因进行测序。1.3统计学处理方法各位点等位基因的频率采用直接计算法，并采用Hardy-I、Tru9I多态性位点，长约580bp；由引物II扩增的片段，包含ApaI多态性位点，长约630bp（见图1）。DNA测序结果显示VDR基因第8内含子的+283位点，即BsmI位点存在碱基C/T多态；第8内含子的+443位点，即Tru9I位点也存在碱基C/T多态；第9外显子的