大鼠脑挫伤后hif

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1、大鼠脑挫伤后HIF【摘要】目的探讨大鼠脑挫伤后hif—la蛋白表达的规律。方法参照feeney，s法建立大鼠脑挫伤模型，分别于伤后2h，6h，12h，24h，2d，3d，5d，7d，14d取脑，运用免疫组化sabc法观察hif—la蛋白的表达。结果对照组偶见阳性反应细胞。损伤后2h，即可观察到hif—la蛋白表达。6h后表达明显增强，24h达高峰，随后阳性反应细胞逐渐减少，7d后仍可见少量表达，14d后恢复。表达呈弥漫性，以大脑皮层、海马、脑干最为明显，不同部位的变化趋势一致。各实验组与对照组比较有统计学意义(p<0

2、．05)。结论hif一1a蛋白的表达规律可用于脑挫伤的鉴定及损伤经过时间的推断。【关键词】脑挫伤；法医学；hif—la；免疫组织化学；损伤经过时间【中图分类号】d919．1【文献标识码】a【】1007—9297(某某年)o1—0076—03studyontheexpressionofhif—laproteinaftercerebralcontusioninratsanditsforensicimpficafion．k伽gdengfeng,liuyanjun，edicaluniversity，taiyuan030001，ch

3、ina【abstract】objectivetoexploretheexpressionofhif—laproteinindiferenttimeaftercerebralcontusion(cc)．methodsbasedonfeeney’smodelofccandtookthesamplesat2h，6h，12h，24h，2d，3d，5d，7d，14dafterbraininjury．theexpressionofhif—laproteinmunohistochemicalsabcandimageanalysistec

4、hniques．resultstheexpressionofhif-laproteincouldbedetectedat2hafterinjury，increasedat6handpeakedat24h．positivecellsde—creasede．littleexpressionpusandbrainstem．thechangingtendencyofdiferentarease．conclusionexpressionofhif—laproteiniscorre—latedaticintervalsaftercci

5、nrats，suggestingthattheexpressionofhif-letmaybeservedasthemark—ersfortimingofccinforensicpractice．【keyedicine，hypoxiainduciblefactor-let，immunohistochemistry，brainin—jurytime低氧诱导因子(hypoxiainduciblefactor一1，hif一1)是一种随着细胞内氧浓度变化而调节基因表达的转录激活因子。缺氧时它能诱导多种缺氧应激蛋白基因的表达，从而介

6、导各种缺氧适应性反应。它被证实与神经细胞在缺氧状态下的生存及凋亡密切相关。尽管hif—ltx已被证实为缺血、缺氧性脑损伤中具有重要意义的信号转导途径之一，但对其在脑挫伤后的表达变化规律研究极少。本实验通过检测脑挫伤后不同时间hif—ltx的表达情况，分析其变化规律．旨为脑挫伤的法医学鉴定及损伤经过时间的推断提供参考。材料与方法一、实验动物分组健康成年entalanimals[简介]亢登峰(1976一)，男，山西宁武人，硕士研究生，法医师，主要从事法医病理学研究。e—mai1：kdnxykjail：g／kg)腹腔麻醉，大鼠脑

7、立体定位仪固定大鼠头部，正中切开顶部头皮，在人字缝前方3mm、颅骨中线旁3mm处，钻直径5bin的圆形骨窗。保持硬膜完整，采用自由落体打击装置，以40g重锤从20cm高处下落打击。术后动物常规进饮食。在伤后规定时间将大鼠麻醉后开胸，剪开右心耳，以细管经左心室穿刺至主动脉，依次灌注生理盐水、多聚甲醛pbs液和10％蔗糖pbs液约2h。对照组直接灌流处死。假手术组仅行颅骨钻孔，术后24h灌流处死。矢状位取材，固定。三、常规he和免疫组织化学染色法把固定好的标本梯度脱水后，制作10i．zm冰冻切片，行he和免疫组织化学染色法。操

8、作步骤参照试剂盒说明书进行，一抗稀释度为1：100，用pbs取代一抗作阴性对照，以细胞核或胞浆出现棕黄色产物为阳性结果。兔hif—lcdgg多克隆抗体购自武汉博士德公司，sabc免疫组化试剂盒、dab显色试剂盒购自北京莱博公司：其他试剂均为国产分析纯。四、图像分析及统计学处理各组切片运用bi一2000图