大鼠肺内降钙素基因相关肽和5

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1、大鼠肺内降钙素基因相关肽和5　　【Abstract】AIM:Thepaperistoexplorethedevelopmentofcalcitoningenerelatedpeptide(CGRP)andserotonin(5HT)immunoreactivecellsinlungandrevealthemechanismoftheendocrinesystem.METHODS:Thelungtissuemunohistochemitryandlaserscanningconfocalmicroscopy.Theresultsageanalysi

2、s.RESULTS:CellscontainingCGRPand5HTfirstlyappearedinthe16dayfetuses,andincreasedinnumberasgestationprogressedandreacheditspeakat20dayfetuses.ThenumberofCGRPand5HTpositivecellsdeclinedinpostnatalratlungs（NE/per10000BE:382±13vs94±17;387±47vs88±18;P<0.01,1moforexample;P<0.

3、01）.Adjacentsectionsimmunostainedicroscopyshoestrongentoffetusesandentofthelungandthisresultsuggestedthatthesecellsplayedanimportantroleinthedevelopment,differentiationandmaturityofthelung.TherapidchangesinnumberduringtheperiodofbirthmayrelateethodprovedthecoexistenceofCGRPan

4、d5HTinneuroendocrinecells.ThisfindingsuggeststhepossibilityoffunctionalinteractionofCGRPand5HT.　　【Keyonaryneroendocrinecells;calcitoningenerelatedpeptide;5hydroxytryptamine;immunohistochemistry;laserscanningconfocalmicroscopy　　【摘要】目的：探讨大鼠肺内降钙素基因相关肽(calcitoningenerelatedpeptio

5、le,CGRP)和5羟色胺(5hydroxytryptamine,5HT)免疫反应细胞的个体发生及分布，揭示肺神经内分泌细胞的功能及其内分泌机制的形态学基础.方法：应用免疫组织化学方法、激光扫描共聚焦技术及计算机图像分析.结果：CGRP和5HT阳性细胞最早见于胚16d肺组织中，随胎龄增大其数量增多且分布广泛，胚20d达高峰，生后阳性细胞数量减少［神经内分泌(NE)/1×103上皮细胞（BE）：382±13vs94±17;387±47vs88±18;P<0.01，以出生后1mo为例］.共聚焦显微镜结果也证实随胎龄增加，CGRP和5HT阳性细胞

6、数量增加且细胞荧光强度增强，而生后强度减弱（P<0.01）.相邻切片法观察可见多数表达CGRP的阳性细胞也含有5HT免疫反应物.结论：肺内CGRP和5HT阳性细胞的随龄变化显示其在肺的发育、分化、成熟的变化过程中具有重要作用，出生前后其数量变化明显的现象，可能与此阶段肺功能的急剧改变有关.CGRP和5HT的共存表明两者在功能上具有相关性.　　【关键词】肺神经内分泌细胞；降钙素基因相关肽；5羟色胺；免疫组织化学；激光扫描共聚焦显微镜　　0引言　　肺神经内分泌细胞（pulmonaryneuroendocrinecell,PNEC）在胚胎发育过程

7、中异常活跃，与其在正常成体肺组织存在很大的差异，对胚胎肺的发生、发育有着重要作用［1，2］.我们对出生前后大鼠肺内降钙素基因相关肽（calcitoningenerelatedpeptide,CGRP）、5羟色胺（5hydroxytryptamine,5HT)阳性细胞的随龄变化进行了观察，以期揭示肺内分泌机制的形成和演化过程的形态学基础.　　1材料和方法　　1.1材料兔抗大鼠CGRP抗血清工作液及兔抗大鼠5HT抗血清原液由博士德生物制品公司提供.生物素标记的兔抗鼠、羊抗兔IgG及辣根过氧化物标记酶卵白素由北京中山生物技术有限公司提供.FITC标记山

8、羊抗兔IgG由北京中山生物技术有限公司提供.选用健康成年SD大鼠（河北医科大学动物中心提供），雌雄2∶1同笼交配，次日08∶00时观察有