超声微波协同萃取法提取杜梨果实多糖

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1、超声微波协同萃取法提取杜梨果实多糖【关键词】杜梨果实多糖超声微波协同萃取含量测定　　Abstract：ObjectiveToextractthepolysaccharidefromthefruitsofPyrusbetulaefoliaBunge，andtodetermineitscontent.MethodsUltrasonic-microployedtoextractthepolysaccharideandanthrone-sulphuricacidcolorimetryineitscontent.Results

2、Thereexistedremarkablydifferencesbetethods;ultrasonic-microalmethod.Thepolysaccharidecontentsofthetethodsl-1forglucose.Theaveragerecoveryrates100.5%(RSD1.59%，n=5).ConclusionTheultrasonic-microaytakethefirstchoicemethod.Themethodofanthronesulphuricacidcolorimetr

3、yfordeterminationofthepolysaccharidecontentisstableandaccurate.　　Keyicroination　　杜梨PyrusbetulaefoliaBunge属蔷薇科Rosaceae梨属（PyrusL.）乔木，在微酸性和碱性土壤中生长良好，尤其能耐盐碱，在瘠薄和干燥土壤中也能生长。其种子发芽率高，能抗病虫害，是防护林及沙荒地造林的珍贵树种。杜梨药用称棠梨，主治功用为敛肺涩肠、止咳止痢。常用于治疗久咳、久泻、久痢等［1］。《本草纲目》记载棠梨（即杜梨）“味酸、甘、涩、寒

4、；无毒。烧熟食用，可治泄泻痢疾［2］”。根据文献检索，目前杜梨主要作为砧木、园林树种以及重要的木材广泛分布在我国的北部、东北部和中部各省（区），以黄河流域分布较多［1］。　　关于杜梨的研究主要集中在种子萌发与幼苗生长、幼苗根系生长状况、作为砧木嫁接梨树等方面的研究，对于杜梨果实多糖的提取及含量测定方面的研究未见相关报道。本实验采用超声-微波协同萃取和常规水浴提取杜梨果实多糖，并用蒽酮-硫酸比色法测定多糖的含量，为杜梨资源的进一步开发利用提供理论依据。　　1器材　　1.1实验材料实验用杜梨于200511采自新疆塔里木盆

5、地，经鉴定为蔷薇科植物杜梨PyrusbetulaefoliaBunge的果实，自然风干，去除种子及果柄，粉碎后过40目筛备用。　　1.2仪器与试药SartoriusBS210S电子天平（北京塞多利斯天平有限公司），T6紫外可见分光光度计（北京普析通用有限公司），DZF6021型真空干燥箱（上海精宏实验仪器设备有限公司），CHz，温度80℃。提取两次，所得提取液，一部分作为供试样品，用于含量测定，其余照2.1.1项下方法操作，得精制杜梨果实多糖。　　2.2多糖含量的测定　　2.2.1蒽酮-硫酸溶液的配制精密称取0.3

6、007g蒽酮，缓慢加入浓硫酸完全溶解后转移至100ml棕色容量瓶中定容，得3.007mg·ml-1蒽酮硫酸溶液，现配现用。　　2.2.2最大吸收波长的选择精密吸取一定浓度的样品溶液1ml加入具塞试管，加入4.00ml蒽酮硫酸溶液，摇匀后迅速浸于冰水浴中冷却，后浸于沸水浴中，盖上塞，自水浴重新煮沸起，准确煮沸7min后立即取出，用自来水冷却10min后于520～720nm波长范围内测定吸光度［3］，确定了其最大吸收波长为620nm。　　2.2.3标准曲线的制备精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品100.6mg，置

7、100ml容量瓶中，加蒸馏水溶解，定容，得1.006mg·ml-1葡萄糖标准溶液。分别移取2.50，5.00，7.50，10.00ml的标准溶液置于100ml容量瓶中定容。量取1ml系列标准溶液于具塞试管中，以1ml蒸馏水作空白，分别加入4ml蒽酮硫酸溶液，立即摇匀，置于冰水中，冷却后一起置于沸水，盖上塞，自再次沸腾加热7min，之后在流水放置10min冷至室温后，于620nm处测定吸光度值［4］，以葡萄糖浓度（C）对其吸光度（A）作回归处理，得回归方程：A=0.006C+0.0054，r=0.9996（n=4）。葡

8、萄糖浓度在25.15～100.6μg·ml-1范围内与吸光度呈良好的线性关系。　　2.2.4显色时间的考察取1.006mg·ml-1葡萄糖标准溶液及样品溶液按标准曲线制备项下的方法测定其吸光度，每隔20min测定1次，结果表明，标准溶液及样品溶液显色时间一致，且在2h内稳定。　　2.2.5换算因子的测定精密称取干燥恒重的杜梨果实多