从麦门冬汤对人血管内皮细胞因子的影响探讨硬皮病治疗中“肺主皮毛”的血管机制

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1、分类号:密级：作者姓名:导师姓名:学科专业:学位类型:所属院部:学校代号：10471学号：2012035从麦门冬汤对人血管内皮细胞因子的影响探讨硬皮病治疗中“肺主皮毛”的血管机制齐彦威王振亮中医临床基础医学科学学位基础医学院2013年4/]30日硕士学位论文原创性声明本人所呈交的硕士学位论文，是在导师王振亮教授（或主任医师、主任药师、研宂员等）的指导下，独立进行科学研宂工作所取得的成果。除文中已特别加以注明引用的内容外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研宂成果。对本文的研宂做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意

2、识到本声明的法律结果由本人承担。特此声明。论文作者（签名）硕士学位论文使用授权声明本人已完全了解河南中医学院有关保留、使用硕士学位论文的相关规定，同意学校保留或向国家有关部门、机构送交本学位论文的复印件和电子版，允许论文被査阅或借阅。本人授权河南中医学院可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编本论文（注：保密论文在解密后适用本授权声明）。特此声明。论文作者（签名）导师（签名）：4月日年月日目录+文觀-1-Abstract-2-mFs-4-材料和方法-6-结果与分析-9-理论与探讨-11-结i仑-17-雜

3、-17-輯文-17-师1-19-I咐#2-23-IW3-28-中文摘要S的：硬皮病即系统性硬化病(systemicsclerosis,SSc)属于中医“皮癖”范畴，中医学认为“肺主皮毛”，治肺代表方“麦门冬汤”在治疗硬皮病的过程中的机制值得探讨。现代医学认为SSc发病机制主要冇血管异常、胶原异常及自身免疫异常三种假说。其中血管异常是最常见和最容易引起关注的病理改变，小动脉和微血管的异常发生在系统性硬化的始动阶段。目前多项研究显示，血管张力的控制受神经肽、血管内皮和血小板三方而的因素调节，而系统性硬化患者血管早期损伤和血小板活化等因素，导致血管活性物质的异常

4、释放，引起神经-内皮等调控异常，造成血管痉挛。这也是雷诺现象发生的主要机制之一。Takhashi等认为，内皮细胞损伤常伴有内皮细胞的功能障碍。内皮细胞是人体一大分泌腺体，可分泌并释放多种血管活性物质，例如细胞粘附分子-1(VCAM-1)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、P选择素(P-selectin)、NO等。内皮损伤、功能障碍，势必导致内皮内分泌功能失调，常表现为缩血管物质如内皮素-1(ET-1)增加和舒血管物质如NO降低。其中VCAM-1、ICAM-1、P-selectin主要介导炎症与免疫应答，内皮素-1(ET-1)、NO则直接影响血管的收缩。所

5、以通过体外培养人脐静脉内皮细胞，观察用药前后VCAM-1、ICAM-1、内皮素、P选择素、NO等指标的变化，为麦门冬汤治疗硬皮病和中医“肺主皮毛”理论提供现代医学支持。方法：将60只清洁级SD大鼠随机分为实验组、对照组、空白对照组，每组20只。实验组分别用麦门冬汤灌冑(麦门冬汤4.24g/100g/d，每日1次灌胃，共一周)和当归四逆汤灌胃，(当归四逆汤2.44g/100g/d，每日1次灌胃，共一周)空白对照组按实验组剂量给予同体积生理盐水灌冑一周。3组大鼠末次给药6h后腹主动脉取血，离心取上清，经火活处理，无菌过滤器过滤、分装，-70°C保存备用。将提取

6、的含药血清用完全培养基分别稀释为5%、10%、20%含药血清的低、中、高组，另加入薄芝糖肽组作为西药组与屮药组进行对比。用MTT法检测含药血淸对皮细胞增殖的影响，用elisa法检测含药血清对内皮细胞分泌ET-1的影响，用硝酸根还原法检测含药血清对NO的影响，用流式细胞技术检测含药血清对内皮细胞分泌P-selectin、VCAM-1、ICAM-1的影响。结果：(1)20%的麦门冬汤作用人血管内皮细胞24h时抑制率最高。(2)麦门冬汤组的内皮素-1虽较生理盐水组有升高但却可以明显使NO升高，一定程度上桔抗了内皮素-1的收缩血管作用，减少对血管损伤。(3)麦门冬

7、汤组P-selectin和VCAM-1较生理盐水组明显降低，但ICAM-1却反而呈升高趋势。结论：麦门冬汤可以降低血管内皮细胞P-selectin和VCAM-1的表达，使NO表达升高，一定程度上拮抗了内皮素-1的血管收缩作用，减少血管损伤，从而发挥对SSc的防治作用。关键词：麦门冬汤；血管内皮细胞；P选择素；细胞粘附因子-hNOToinvestigatetheinfluenceofsclerodermatreatment"lungadvocatefur’’vascularmechanismfromOphiopogonDecoctiononhumanvasc

8、ularendothelialcellfactorQiyanwei