饲料分析与质检-实验指导-2011-lsm

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1、《饲料分析与质检》课程实验教学实验进度安排时间组别实验内容样品学时10-27实验一詞料中真蛋白质的测定鱼粉310-28实验二蛋白质溶解度的测定豆粕2实验三詞料中钙含量的测定鱼粉310-29实验四飼料中磷含量的测定豆粕2实验五詞料中植酸磷的测定豆粕2实验六油脂酸价的测定鱼油210-30实验七油脂过氧化值的测定鱼油3实验八饲料离体消化率的测定鱼粉210-31实验九动物蛋白质摻假的鉴别（显微镜检测技术》鱼粉4实验十颗粒飼料稳定性、悬浮性测定配合饲料211-1实验十一鱼粉质量的评判待测样品611-2实验十二鱼油品质的评判待测样品4实验十

2、三飼料分析与检测实验室的建制2实验地点：30教学楼102、215注意：1、该实验为幵放性实验（每天早中晚以及周末》;2、每个实验完成后需要及时上交实验原始记录。实验要求：搡作规范，仔细观察，认真记录，准确测定，认真分析实验数据。2014-10-26实验一、饲料中真蛋白质的测定一、实验目的饲料中蛋门质含量是判定饲料营养价值的一项重要指标，饲料中粗蛋门质包括真蛋白质和非蛋白质两部分含氮物质，后者主要包括游离氨基酸、硝酸盐、氨等，故不能反映出饲料蛋白质对动物的真正营养价值。通过对饲料真蛋白的测定，评价饲料原料如鱼粉等是否掺入非蛋白氮，

3、以保证原料的质量和配合饲料的营养质量。真蛋白质，也叫纯蛋白质，是指由氨基酸合成的一类高分子化合物。二、实验原理蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量可计算得样品之氮含景，再乘以一定的换算系数(6.25)，即粗蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量蛋白质在一定碱性条件下，能与重金属盐类发生盐析作用而析出沉淀，此沉淀物不溶于热水，而非蛋白氮则易溶于水。用热水洗沉淀，将水溶性含氮物洗去，剩下的沉

4、淀物再用凯氏定氮法测定，得出真蛋白质的含量。2CHCHNHC00H+13HSO(NH)SO+6C0+12S0+16H0消化3224424222(NH)SO+2NaOH->2NH+2HO+NaSO4243224HBO+NH—NHHB0蒸馏333423NHHB0+HC1NHCl+HBO滴定423433三、试剂及配制(1)100g/L硫酸铜溶液：10g硫酸铜(CuSO4.5H2O)溶于100mL水中。(2)25g/L氢氣化钠溶液：2.5g氢氣化钠溶于100mL水中。(3)1Og/L氯化钡溶液：lg氯化钡(BaCl2.H2O)溶于100

5、mL水中。(4)2nu)l/L盐酸溶液(5)硼酸吸收液：10g/L硼酸溶液1000ml,加入lg/L甲基红乙醇溶液7ml,与lg/L溴甲酚绿乙醇溶液10ml,40g/LNaOH溶液0.5ml,混合。（6）混合指示液：lg/L甲基红乙醇溶液与5g/L溴甲酚绿乙醇溶液，等体积混合。溴甲酚绿，0.5%乙醇溶液配罝：溴甲酚绿0.125g+25ml乙醇。甲基红，1%乙醇溶液配置：甲基红0.025g+25ml乙醇。（7）盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB/T601制备。0.02mol/L盐酸标准溶液：1.67ml盐酸，分析纯，注入1

6、000ml蒸馏水中。0.1mol/L盐酸标准溶液：8.3m】盐酸，分析纯，注入1000ml蒸溜水中。其他试剂同粗蛋白测定相同。四、测定步骤试样的处理：准确称取试样lg（精确到O.lmg），置于200ml烧杯屮，加蒸榴水50ml煮沸，加入100g/L硫酸铜溶液20ml和25g/L氢氧化钠溶液20ml，边加边搅拌，放置lh以上或静置过夜,沉淀物以中速定性滤纸过滤，用60-80°C热水反复洗涤沉淀5-6次,直至滤液无SO42'为止（取10g/L氯化钡溶液5滴和2mol/L盐酸1滴检查滤液，至不生成白色沉淀为止）。将沉淀与滤纸包好，放在

7、65°C烘箱干燥2h。试液的消化：将烘干的试样连同滤纸一起放入凯氏烧瓶中，加入硫酸铜0.4g,无水硫酸钾6g，与试样混匀，再加浓硫酸10ml和2粒玻璃珠，在电炉上消化直至溶液呈透明的蓝绿色。以下操作同粗蛋白质的测定。空白的测定：除不加试样外，其余操作同粗蛋白质的测定。五、结果计算真蛋白（%）=（V,-V2）XcX0.0140X6.25X100mXVz/V式中：乂,一滴定试样时所需标准溶液的体积，ml;V2—滴定空白时所需标准溶液的体积，ml;C一盐酸标准溶液的浓度，mol/L；V—试样分解液的总体积，ml;Vz一试样分解液蒸馏用

8、体积，ml;0.0140—每毫克当量氮的克数（IN硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数）;m：样品的质量（体积），g（ml）；6.25—氮换算成蛋白质的平均系数。蛋白质中氮的含量一般为15〜17.6%，按16%计算乘以6.25即为蛋白质，乳制品为6.38,面粉为