猪的呼吸病毒gp3蛋白结合肽的排查

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1、猪的呼吸病毒GP3蛋白结合肽的排查-->1引言1.1猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)简介猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS），是近年在全球范围内大范围转播的一种新型猪病，第一次被报道是在1986年的美国，当时称其为“神秘病”。从1990年德国爆发该疾病后，PRRSV迅速蔓延至整个欧洲。1991年首次由荷兰科学家从病料中分离出了该病毒，命名为莱利斯塔德病毒，此后美国和德国科学家也相继分离出了该病毒。世界动物卫生组织将该疾病定位法定报告疫病。该疾病于上世纪末传入我国，给我国养猪业造成了巨大损失，且疫情有愈演愈烈之势。1.1.1病原学特性该病毒对温度较敏感，零下70℃至零下2

2、0℃情况下存活时间大于4个月，4℃下可存活30天，21℃下7天，56℃情况下20分钟即可使其失去生物活性。pH值在6.5至7.5范围内都可保持活性，小于6.0或大于7.6时感染能力下降。有机化学药剂对其有破坏作用，如氯仿，乙醚等皆可破坏其囊膜使其无法复制。1.1.2流行病学PRRSV的易感动物为猪，以怀孕母猪和仔猪最为易感，带毒猪与患病猪为该疾病传染源，且无季节性，全年皆可发生。饲养不科学，管理不善，防疫措施不全，消毒不彻底为本病的诱因。由于PRRSV为RNA病毒，极易发生重组或突变，且不同毒株之间的基因组存在大规模变异的情况，在猪体内持续传染会产生亚群或亚种。通过进

3、行进化树分析，美洲型毒株之间变异大于欧洲型。该疾病经典毒株分别为欧洲型：LV，美洲型：VR2332。1.1.3临床表现PRRSV的爆发会引起猪繁殖障碍，以及呼吸系统症状：流产、早产、死胎、木乃伊胎等。且感染仔猪后，会引发肺炎，生产性能下降，死亡率上升。猪的机体免疫能力，感染毒株的毒力等情况的不同也会导致发病程度的不同，HalburPG等人用9中不同分离毒株对猪群进行感染试验，病理解剖结果显示猪的临床症状，体温，肺部病变的情况均有所不同。研究显示，感染弱毒株或LV株的猪只有短时间的发热，呼吸困难等现象；而感染了强毒株的猪症状更严重：嗜睡，食欲减退，呼吸困难，发热。进一步

4、研究显示，PRRSV对生殖系统功能的影响也因感染毒株的强弱而有所不同。发热，病毒血症等症状与组织器官和血液中含有的病毒的量，以及病毒在机体内复制能力的强弱有关。过去研究显示，猪感染强毒株PRRSV会导致机体产生长期病毒血症，临床症状也更严重，死亡率也更高。宿主年龄，其他病毒或细菌的协同作用也会影响病毒的复制能力。还有研究发现病毒血症在动物幼仔体内持续的时间比成年动物体内持续的时间更长，且巨噬细胞的复制率也更高。除此之外，猪肺炎支原体等也会增加PRRSV产生肺炎和其他症状的几率；反过来PRRSV也可以削弱宿主对猪链球菌和沙门氏菌的抵抗力。1.1.4传播途径1.直接传播与

5、病猪的直接接触或交配为主要传播途径。病猪的排泄物和体液均有感染性，如血液，精液，粪便，尿液等。ChristiansonD等研究发现病公猪的精液也可在交配过程中感染母猪。感染后43天和92天在病公猪精液内仍可检测出病毒RNA。但关于粪便中是否带有病毒仍有争议，不同研究结果分别证明粪便中检出或检不出病毒RNA。持续感染是PRRSV流行病学中的一个重要特征。病猪体内器官组织中的病毒粒子可以存活很长时间，且不断复制自身。最重要的是如果猪圈的管理较好，宿主营养水平良好，则诉诸虽然您、体内带毒，但没有任何临床症状，这给该疾病的防治带来了巨大困难。一旦某一条件突然变化，带毒猪则会因

6、其他呼吸道病原体而产生协同或继发感染，且死亡率极高。目前持续感染能够逃避宿主免疫系统监视的机制仍不清楚。2材料与方法.......112.1材料............112.2实验方法.......123结果..........253.1PGEX-6P-GP3重组质粒的建立与检测...........253.2重组蛋白的诱导表达...........263.3蛋白纯化与），并利用该细胞进行抗病毒试验。结果表明合成多肽在PRRSV易感细胞上也能有效地抑制病毒感染。-->株感染性分子克隆的建立及拯救病毒的鉴定[J].中国预防兽医学报.2011,7:497-502[4]童

7、光志，周艳君，郝晓芳等.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及其分子流行病学分析[J].中国预防兽医学报.2007，29(5)：323-326.[5]SangYM,ShiJH,SangL,etal..51lunevirusisolates,PeterL,etal.TheporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusrequirestraffickingthroughCD163-positiveearlyendosomes,butnotlateendosomes,forproductiveinfecti