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1、比较ELISA和TRUST梅毒检测方法的敏感性和特异性 梅毒(syphilis)是由苍白螺旋体(Treponemapallidum,TP)(又称梅毒螺旋体)引起的一种性传播疾病,可侵犯皮肤黏膜及神经、心血管、骨骼等组织器官,引起慢性病变.近年来,我国梅毒的患病率呈逐渐上升趋势,筛选一种高敏感性和特异性的血清学检测方法,对于梅毒的诊断和治疗具有重要的现实意义.同时,区县疾控中心每年开展哨点监测工作,包括艾滋病、梅毒以及丙型肝炎检测,从而监测本区县性病门诊、吸毒人群等特定人群的梅毒流行状况,哨点监测的梅毒检测通常采用酶联免疫试验(ELISA)和梅毒甲苯胺红不
2、加热血清试验(TRUST)的试剂组合来筛查梅毒.本文通过对2013年801份哨点监测梅毒检测数据的回顾性分析,来比较ELISA和TRUST这两种检测方法的敏感性和特异性. 1材料和方法 1.1研究对象 2012年闸北区哨点监测样本801份.用枸橼酸钠抗凝管采集性病门诊、吸毒人群全血2mL~3mL,采血后立即颠倒混匀8次,离心后取血浆1.2ml留存待检测. 1.2试剂与仪器 TRUST试剂盒由北京金豪制药股份有限公司提供,Anti-TP(ELISA)试剂盒由珠海丽珠试剂股份有限公司提供,梅毒螺旋体明胶凝集实验(TPPA)试剂盒由日本富士瑞必欧株式会
3、社提供.酶标仪用Anthos2010酶标仪,全自动洗板机用宝特ELX-50,梅毒振荡仪用TY2D-Ⅲ. 1.3方法 所有标本均采用TPPA、Anti-TP(ELISA)、TRUST法进行梅毒螺旋体抗体检测.具体操作方法严格按照试剂盒说明书进行操作,并在有效期内使用,结果判定依据试剂盒规定标准. 1.4统计学处理 应用SPSS10.0统计软件处理实验结果. 2结果 2.1两种方法检出情况 在801份标本中,经TPPA确认后检测出92份阳性标本,阳性率11.49%;Anti-TP(ELISA)检出90例阳性,阳性率为11.24%;TRUST检出5
4、3例阳性,阳性率为6.62%.两种检测方法比较,Anti-TP(ELISA)的阳性率高于TRUST,与TPPA接近.Anti-TP(ELISA)的假阳性率为0.12%,TRUST的假阳性率为0.25%.Anti-TP(ELISA)检测假阳性率低于TRUST法.见表1. 2.2两种检测方法比较的评价 TRUST检测特异度较高,为96.36%,灵敏度较差为57.61%,Youden指数为0.54;Anti-TP(ELISA)检测法的特异度更高,为98.90%,灵敏度较高为97.83%,Youden指数为0.97.综合来看,Anti-TP(ELISA)法
5、的灵敏度和特异性均高于TRUST法,与TPPA结果接近.见表2. 3讨论 梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性传染病,几乎可侵犯全身各器官,早期传染性强,主要侵犯皮肤粘膜,常表现为生殖器溃疡、淋巴结肿大及全身皮疹.晚期破坏性大,常引起心血管系统及神经系统损害.该病主要通过性接触传染,少数通过输血、污染的生活用具传染;患梅毒的孕妇还可传染胎儿,引起流产、早产、死产及娩出先天梅毒儿.目前,区县疾控中心每年开展哨点监测工作,包括对梅毒的检测.该项目主要监测区县性病门诊、吸毒人群以及孕产妇等特定人群的梅毒流行状况.哨点监测中的梅毒检测通常采用ELISA和TRUST
6、的试剂组合来筛查梅毒.因此,做好这两种梅毒检测方法在哨点检测中的运用效果分析,对于防控和治疗梅毒具有重要的意义. 梅毒螺旋体感染后机体可产生特异性的梅毒螺旋体抗体,TPPA可检测血清中梅毒特异性抗体,灵敏度高特异性好.同时,梅毒螺旋体感染后,此抗体可在体内持续存在,检测结果不随病情发展和治疗而变化[1],故TPPA作为梅毒的检测方法对各期梅毒的检测结果都有较好的稳定性,不易出现假阳性反应.因此,本次研究使用TPPA作为金标准来评价Anti-TP(ELISA)和TRUST的检测结果. TRUST采用(VDRL)纯化的心磷脂、卵磷脂,胆固醇配制的VDRL抗
7、原重悬于含甲苯胺红的特制溶液中制成,梅毒患者血清中存在能与VDRL抗原发生凝集反应的反应素,当待测样本中存在反应素时,即与其发生凝集反应,出现肉眼可见的粉红色凝块,反之则无凝块出现[2].TRUST试验检查的是人体内的反应素,是一种非特异性类脂质抗体.人体在某些生理状态,如怀孕时,TRUST可以出现假阳性;患有隐性传染病,如风疹、水痘、病毒性肝炎、上呼吸道感染、肺结核、肺炎、亚急性细菌性心内膜炎等疾病时,TRUST也可以呈假阳性;许多慢性病,如类风湿性关节炎、SLE、风湿性心脏病、肝硬化、干燥综合征、慢性胃炎和海洛因成瘾等,TRUST同样可以呈假阳性.该方
8、法操作简便,试剂价格便宜,反应快,不需要特殊仪器设备,方便测定梅毒
