中华倒刺同工酶组织特异性研究

中华倒刺同工酶组织特异性研究

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1、中华倒刺同工酶组织特异性研宄摘要:运用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,对中华倒刺?的6种组织(脑、眼睛、心脏、肝脏、肾脏、肌肉)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)进行了初步研宄,并对这3种酶在各组织中的同工酶位点及酶谱表型进行了分析。结果表明,中华倒刺?的3种同工酶系统具有组织特异性。LDH检测到经典的5条谱带,由3个基因位点编码,C位点仅在肝脏组织中表达;MDH在5种组织(除肌肉外)中检测到3条酶带,仅为细胞质型,肌肉组织中同时表达了细胞质型和线粒体型;EST至少由5个基因位

2、点编码,同工酶酶谱复杂,肝和肾的活性表达较强。关键词:中华倒刺?;同工酶;组织特异性中图分类号:S965.199文献标识码:A文章编号:0439-8114(2011)24—5206-05StudyontheIsozymicTissueSpecificityofSpinibarbussinensisZHANGJuanl,2,WANGHong—yel,2,CAIYan—zhi2,LUTao3,QINXiao—yan3(1.Co11egeofLifeScienee,HuazhongNormalUniversit

3、y,Wuhan430079,China;2.FisheriesResearchInstituteofHubeiProvinee,Wuhan430071,China;3.ZiguiGoverningStationforFisheryAdmistration,VesselCheckingandPortSupervision,Zigui443600,Hubei,China)Abstract:Byusingtheverticalpolyacrylamidegelelectrophoresis,Iactatedeh

4、ydrogenase(LDH),malatedehydrogenase(MDH)andesterase(EST)isozymesfromsixtissues(braineye,heart,liver,kidneyandmuscle)ofadultSpinibarbussinensiswerepreliminarilystudied.Thelociandphenotypesoftheisozymesineverytissuewerealsoanalyzed.Theresultsshowedthatallis

5、ozymespresentedtissuespecificity.FiveclassicalLDHbandswerefoundinthetissues,whichwereencodedbythreeloci,andthesiteCwasonlyfoundinliver.ThenumberofMDHisozymebandswasthreeinfivetissuesexceptmusc1e,whichwerealls—MDH.Boths—MDHandm—MDHwerefoundinmuscle.ESTisoz

6、ymewasencodedbyfivelociatleast.Theisozymepatternwascomplicated,andthestrongeractivitywaspigmentedintheliverandkidney.Keywords:Spinibarbussinensis;isozyme;tissuespecificity同工酶的概念最早是由Markert和Mo11er[1]在1959年提出,是指催化相同化学反应,但其性质不尽相同的一类酶,它是普遍存在的,在同一物种的不同个体或同一细胞的

7、不同部位,如细胞膜、细胞质和线粒体等细胞器,以及生物生长发育的不同时期和不同代谢条件下,都有同工酶的存在,这类酶对细胞的发育及代谢调节都很重要。同工酶是由染色体上不同的基因位点或同一位点的等位基因编码的,是基因型的生化表现型,反映了编码酶蛋白的DNA序列信息。同工酶能催化相同的反应,是因为其活性中心的结构有类同之处,而物理特性、催化性质以及免疫特性的区别,则是由于分子组成和结构上有一定差异,酶谱的变化反映了等位基因和位点的变化。Buth等[2]认为利用凝胶电泳技术,能够得到较好的同源性和可比性的同工酶谱,

8、通过对酶谱的进一步分析,可以较深入、直接地了解物种的遗传信息,包括群体遗传结构、个体发育过程同工酶的表达和组织特异性等内容,是分析生物的发育、遗传、系统进化和生理过程的有效探针。中华倒刺?[SpinibarbussinensisCBleeker)]俗称青波、乌鳞、青板,属脊椎动物门,硬骨鱼纲,鲤形目,鲤科,?亚科,倒刺?属,为淡水温水性鱼类,性活泼,喜成群栖息于底层多为乱石的流水中,主要分布于长江中上游的干、支流流域的水体中,

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