不同产地鱼腥草多糖含量测定

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1、不同产地鱼腥草多糖含量测定【摘要】　　目的测定不同产地鱼腥草多糖的含量。方法用苯酚－硫酸法测定鱼腥草中多糖的含量。结果不同产地的鱼腥草中多糖含量为：15.73%～20.29%。结论不同产地鱼腥草多糖的含量有一定的差异。【关键词】鱼腥草多糖含量测定不同产地　　Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentofpolysaccharidesinHouttuyniacordatafromvariouscultivationlocations.MethodsTheconten

2、tsofpolysaccharideeasuredbyphenol-H2SO4colorimetry.ResultsThecontentsofpolysaccharidesinHouttuyniacordatafromvariouscultivationlocationsvariedfrom15.73%～20.29%.ConclusionThereisgreatdifferenceinpolysaccharidecontentinHouttuyniacordatafromvariouscultiva

3、tionlocations.　　Keyination;VariousCultivationLocations　　鲜鱼腥草为三白草科Saururaceae蕺菜属植物蕺菜HouttuyniacordataThunb.的新鲜全草〔1〕，具有清热解毒、消肿排脓、利尿通淋的功效。主要用于肺脓疡、痰热咳嗽、热痢热淋、痈疮肿毒〔2〕等证。本课题组曾对鲜鱼腥草GC-MS、HPLC-MS指纹图谱、黄酮类、酚类化合物的化学研究方面进行报道〔3～6〕。药理研究发现鱼腥草水溶性多糖对羟自由基和超氧自由基有较明显的清除作用〔

4、7〕。本课题对不同产地鱼腥草进行多糖含量测定，为鱼腥草资源的开发提供理论依据。　　1器材　　1.1仪器　　UV-7501型紫外可见光光度计(无锡科达仪器厂)，电热恒温水浴锅(上海仪表集团供销公司)，医用离心机（LD5-10型，北京医用离心机厂），电子天平（BS210S，madebystartorius）　　1.2试药葡萄糖标准品Sigma公司产品；苯酚、硫酸、丙酮、乙醚、三氯乙酸、氢氧化钠试剂均为分析纯，医用乙醇（广州市新升华玻有限公司），苯酚试液参照文献〔8〕配制。　　鱼腥草购于广州清平市场，经广

5、东药学院中药学院生药教研室陈幼竹博士鉴定为三白草科蕺菜属植物HouttuyniacordataThunb.。　　2方法与结果　　2.1鱼腥草多糖的提取与精制　　取鱼腥草干品200g，以95%乙醇回流脱脂3次，药渣置通风处晾干，加水10倍量、8倍量、8倍量，于90～100℃依次提取3，2，1h，过滤，合并滤液，浓缩至约200ml，用95％乙醇调至含醇量为80%，静置过夜，离心，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，得粗多糖。取粗多糖加水溶解至100ml，加入等体积30%三氯乙酸溶液脱蛋白，4℃静置，离心

6、，上清液用0.01mol/L的氢氧化钠调pH＝7，溶液减压浓缩，将浓缩液装入透析袋置水中透析，透析液减压浓缩至100ml，加入95%乙醇调含醇量为80%，静置，离心，沉淀用无水乙醇、丙酮、无水乙醚依次洗涤，真空干燥，得除蛋白精制鱼腥草多糖。　　2.2标准品溶液与供试品溶液的制备　　2.2.1标准品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖0.0964g，加水溶解并定容至100ml，再取1ml，定容至10ml的容量瓶中，即制得浓度为0.0964mg/ml的葡萄糖对照品贮备液。　　2.2.2供试品溶液

7、的制备取60℃干燥1h的鱼腥草约10g，精密称定，用95%乙醇100，80，80ml依次回流脱脂3，2，2h，药渣用95%乙醇洗涤数次，药渣置通风处自然晾干后置烧瓶中，加水100ml，精密称定，水浴（90～100℃）温提4h。再精密称定，补足水至原重，振摇，趁热纱布过滤，离心除去沉淀，得上清液。精密量取上清液5ml，放入透析袋中流水透析24h，透析内液定容至25ml，再精密量取5ml，定容至50ml，得供试液，冰箱中放置备用。　　2.3标准曲线的制备　　精密量葡萄糖标准品溶液0.1，0.2，0.3，

8、0.4，0.5，0.6，0.7ml，分别置10ml具塞试管中，加蒸馏水补充至1.0ml，摇匀，加5%苯酚溶液1ml，浓硫酸5ml，室温放置40min。另取1ml蒸馏水，加同量苯酚和浓硫酸，同法操作，作为空白对照。置7501型分光光度计中，于490nm测定吸收度，以吸收度（Y）对葡萄糖含量（X）进行回归，得回归方程：Y=9.1073X+0.0102，相关系数r2=0.9998。结果表明葡萄糖在0.0193～0.0964mg/ml范围内呈良好的线性关系。　　2.4换算因素