武汉市水产品微生物污染安全研究

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1、武汉市水产品微生物污染安全研究食品质量与安全摘要水产品具有低脂肪、高蛋白、营养平衡性好等诸多优点，深受人们喜爱，是摄取动物性蛋白质的重耍来源之一，也是合理膳食结构中不可缺少的重要组成部分。人们在享用水产品丰富的营养和鲜美味道的同时，对它的安全卫生也愈来愈关注。但水产品极易在其生长水域或食用加工中受到病原、微生物的污染［1］，2003一2004年统计结果显示，我国食物中毒致病因素依次为微生物性、化学性、有毒动植物性病原，微生物性病原是导致食物中毒的主耍因素，中毒人数最多。由微生物污染引起的食源性疾病成为食品安全重要的公共卫生问题，越来越受

2、到公众关注［2］。在我W及世界各地由微生物致病菌引起的食物中毒事件频繁发生。为了了解水产品微生物污染情况，减少水产品中微生物污染，本文对水产品中微生物污染进行研宄。关键词：水产品微生物污染水产品安全1.水产品的致病微生物一般水产品的致病生物包含了以下几种，第一种是水产品本身就有的一些细菌，广泛分布在水屮，比较常见的如李斯特菌(Listeriamonocytosens)和冷源性细菌肉毒杆(ClostridiumBotulinum)。第二种是人为因素所造成的一®细菌，一般存在动物以及人的肠道，后因为人或者动物对水环境的污染而产生的一些细菌，

3、比较常见的有大肠杆菌(Escherichiacoli)和沙门氏菌(Salmorwllussp)。第三种以双壳软体动物作为载体的病毒，如诺伏克病毒(NorwalkVivus)和甲型肝炎病毒(HepatitistypeAHAV)o上述微生物一般是通过水产品来对人体造成影响，患者一般表现为呕吐以及胃肠炎和痢疾等症状。2.检测对象、项目及标准2.1研究对象抽取武汉市批发市场、超市和酒店供应的水产品。随机采集生鱼肉(包括金枪鱼、鲩鱼、鲈鱼和鲫鱼)、海虾、养殖虾、三文鱼、生蚝、扇贝、牡蛎、杂色蛤、玉螺等样本。采样时记录样品的产地和來源，样品采集均由

4、本单位专业人贝按照文件中的采样要求进行并及吋送检。2.2研究方法微牛.物污染的最常见指标是菌落总数、大肠菌群和致病性微牛.物［3］。对所采集的样品进行菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌和副溶血性弧菌等的检测。2.3数据处理统计学分析数资料采用X2检验，P<0.05为差异有统计学意义。2.4检测标准据食品安全国家标准GB4789.2-2010食品卫牛.微牛.物学检验测定菌落总数。根据食品安全国家标准GB4789.3-2010食品卫生微生物学检验检测大肠菌群。根据食品安全国家标准GB4789.10-2010食品卫生微生物

5、学检验检测金黄色葡萄球菌。根据食品安全国家标准GB4789.4-2010食品卫生微生物学检验检测沙门氏菌。根据食品安全国家标准GB4789.4-2010食品卫生微生物学检验检测志贺氏菌。根据食品安全国家标准GB/T4789.7-2008食品卫生微半.物学检验检测副溶血性弧菌。总体耍求为细菌总数5000cfu/g,大肠菌群30MPN/100g,致病菌(沙门菌、副溶血性弧菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌)不得检出。3.检测技术3.1聚合酶链式反应(PCR)技术聚合酶链式反h^ZPCR(PolymeraseChainReaction)是美国科学家M

6、ul1is于1983年发明的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法.故乂称为基因的体外扩增法。它可以在试管中建立反应.数小时后能将极微量的目的基因或某一特定的DNA片段扩增数十万乃至千百万倍.即可将皮克(pg)水平的DNA特异地扩增到能够检测的微克(仙g)水平，无须通过繁琐费时的基因克隆程序.便可以获得足够数量的精确的DNA拷災。0前PCR技术己广泛应用于微生物病原的检测、DNA多态性分析、基因克隆、基因分离、序列分析等领域.同时也频繁地被应用于水产品中致病微生物的快速检测。霍乱弧菌、副溶血弧菌及创伤弧菌是引起人类肠道急性传染疾病

7、的三大病原菌.也是国际检验、检疫的重要菌株。钟凯等利用副溶血性弧菌的tl基因为靶序列.设计1对引物。其PCR扩增产物具有极好的特异性.对人工污染的冷冻虾仁、沙丁鱼的检出低限达到10cfu/go吴彩云等以tl和tdh为靶基因.以单引物对的常规PCR技术为参照.对双重PCR(d—PCR)技术同时检测该两靶基因的可行性进行了研宄，建立了一种快速、有效地检测副熔血弧茵有毒菌株的分子生物学方法。许龙岩等根据霍乱弧菌T139、ctxA、UpA和副溶血性弧菌tdh基因.建立了利用多重一PCR(MPCT｛、从罗飞鱼和牡蛎中快速检测霍乱弧菌和副溶血性弧菌

8、的方法.探讨了运用该方法检测食品中霍乱弧菌和副溶血性弧菌的可能性。结果表明：MPCR用于污染的水产品检测.经过增菌培养.01群霍乱弧菌的检测低限为22cfu/g、0139群霍乱弧菌为50cfu］g.副溶血性