凋亡相关基因survivin、caspase-3、caspase-9 和cyclin b1在胃

凋亡相关基因survivin、caspase-3、caspase-9 和cyclin b1在胃

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1、凋亡相关基因Survivin、Caspase?3、Caspase?9和CyclinB1在胃【摘要】目的观察凋亡相关基因Survivin、Caspase?3、Caspase?9和CyclinB1在胃癌组织中的表达以及探讨Survivin与Caspase?3、Caspase?9和CyclinB1的关系。方法RT?PCR方法检测Survivin、Caspase?3、Caspase?9和CyclinB1在30例胃癌组织、10例正常胃组织标本中的表达。结果30例胃癌组织中20例SurvivinmRNA表达阳性,10例正常胃组织无SurvivinmRNA表达;

2、30例胃癌组织和10例正常胃组织均有Caspase?3和Caspase?9以及CyclinB1的mRNA表达,但胃癌组织Caspase?3和Caspase?9及CyclinB1的mRNA表达水平明显低于正常胃组织;在20例SurvivinmRNA表达阳性的胃癌组织中,Caspase?3和CyclinB1的mRNA表达水平明显低于10例SurvivinmRNA表达阴性的胃癌组织,而Caspase?9mRNA表达水平却与10例SurvivinmRNA表达阴性的胃癌组织相差不大。结论Survivin、Caspase?3、Caspase?9和CyclinB

3、1在胃癌组织中均存在表达,且Survivin的表达与Caspase?3和CyclinB1表达呈负相关,与Caspase?9表达不相关。【关键词】基因表达凋亡胃肿瘤【Abstract】ObjectiveToinvestigateexpressionsofapoptosis?associatedgenesincludingSurvivin,Caspase?3,Caspase?9andCyclin?B1ingastriccancertissuesanddiscusstherelationshipofSurvivinployedtodetecttheexp

4、ressionsofSurvivin,Caspase?3,Caspase?9andCyclinB1in30gastriccancertissuesand10normalgastrictissues.ResultsSurvivinmRNAalgastrictissues.AlthoughmRNAexpressionsofSurvivin,Caspase?3,Caspase?9andCyclinB1algastrictissues,yetthemRNAexpressionlevelingastriccancertissuesalgastrictissu

5、es.ThemRNAexpressionlevelsofCaspase?3andCyclinB1in20Survinvin?positivegastriccancertissuesRNAexpressionlevelofCaspase?9.ConclusionsSurvivin,Caspase?3,Caspase?9andCyclinB1expressingastriccancertissues,以上的正常胃组织标本;实验组:取30块来自不同患者的胃癌组织标本。1.1.3标本处理所有标本取出后作好标记,立即置入液氮中保存。文亚渊,等.凋亡相关基因S

6、urvivin、Caspase?3、Caspase?9和CyclinB1在胃癌组织中的表达1.2方法采用RT?PCR方法测定正常胃组织、胃癌组织Survivin、Caspase?3、Caspase?9和CyclinB1的mRNA表达。1.2.1酶和试剂Tripure试剂盒、Oligo(dT)15为美国Sigma公司产品;RNA酶抑制剂、M?Mulv逆转录酶为美国MBI公司产品;dNTP为加拿大Sagon公司产品;TaqDNA聚合酶为美国Promega公司产品;PCR?Markers由中国华美生物工程公司提供,其10条降解产物长度分别为1200、95

7、0、815、708、657、595、515、432、298、110bp。1.2.2PCR扩增引物Survivin、Caspase?3、Caspase?9和CyclinB1以及PCR内参照GAPDH引物均由上海生物工程公司合成。Survivin引物序列为:A:5'?ATGGCCGAGGCTGGCTTCATCCAC?3',B:5'?TTGTAGTTTGTGCTATTCTGTGAATTA?3',扩增片段长度为963bp。Caspase?3引物序列为:A:5'?ATGGACAACAACGAAACCTCCGTG?3',B:5'?CCACTCCCAGTCATT

8、CCTTTAGTG?3',扩增片段长度857bp。Caspase?9引物序列为:A:5'?GGCCCTTCCTCGCTTC

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