参麦注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后学习及记忆能力的改善作

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1、参麦注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后学习及记忆能力的改善作【摘要】目的：探讨中药参麦注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后学习和记忆能力的改善作用。方法：7日龄SD大鼠随机分为参麦注射液干预组、胞二磷胆碱干预组、生理盐水干预组、假手术组和正常对照组5组。前3组均在成模后当日开始每组每只分别给予参麦注射液、胞二磷胆碱和生理盐水腹腔注射干预，1次·d-1，连续14d。其余两组不做处理。应用Y?型电迷宫对各组第60及90日龄实验大鼠测试学习能力，并于24h后（第61、91日龄）复测，检测各实验大鼠24h记忆保持能力。结果：经过参麦注射

2、液和胞二磷胆碱分别干预后，其学习能力及24h记忆能力与生理盐水干预组比较有明显改善（P＜0.05），参麦注射液组与胞二磷胆碱组之间也有统计学差异（P＜0.05）。结论：参麦注射液和胞二磷胆碱均可改善大鼠HIBD后的学习和记忆能力，前者优于后者。【关键词】参麦注射液；新生大鼠；缺氧缺血性脑损伤；学习；记忆新生儿缺氧缺血性脑损伤（HIBD）是威胁新生儿生命以及导致患儿神经系统后遗症的严重疾病之一，目前临床的治疗主要是对症处理，但对中重症患儿的疗效并不尽如人意，常伴有以神经精神行为障碍为主的多种后遗症。临床研究已证实，参麦注射液(Shenmai

3、injection)能改善成人心脑血管血流量、降低心脑血管耗氧量、改善脑细胞功能，但在儿科尚缺乏可信资料。本实验按照Rice等[1]方法对新生SD大鼠缺氧2h以造成中重度HIBD模型，并通过胞二磷胆碱（CDPC）、参麦注射液等分别干预，应用Y?型电迷宫对各组第60及90日龄实验大鼠测试学习能力，并于24h后复测，检测各实验大鼠24h记忆保持能力，以探讨参麦注射液对HIBD的疗效，为中医药防治新生儿HIBD的应用提供理论依据。　　1材料与方法　　1.1实验动物出生7d同窝SD大鼠，雌雄不拘，体重（12.15±2?30）g，由东南大学医学院实

4、验动物中心提供。　　1.2主要药物与仪器CDPC钠注射液（张家港市制药厂），参麦注射液（深圳三九制药厂），液氮（南京大学冷冻厂）；Y?型电迷宫（张家港医疗仪器设备厂）。　　1.3实验方法1.3.1新生大鼠HIBD模型制作按照Rice等[1]方法选出生7d的SD大鼠，乙醚吸入麻醉。取颈正中切口，游离左侧颈总动脉，以4?0号线结扎，缝合切口后放回原饲养环境中恢复2～3h，然后置37℃恒温2000ml密闭容器中，以2L·min-1的速度输入8%O2和92%N2混合气体，持续2h（以建立中重度HIBD模型），取出后置于原饲养环境中。1.3.2动物

5、分组及给药方法共40只大鼠，采用分层随机方法将同一窝别大鼠随机分配到以下5组当中，每组8只，各组分别于生后第60、61天以及第90、91天进行Y?型迷宫测试：（1）正常对照组(Control组)。每只鼠仍回原饲养环境、由原母鼠喂养，幼鼠不做任何处理。（2）CDPC组。各鼠完成HIBD后仍回原饲养环境、原母鼠喂养，分别于即刻（0h）及之后每天的同一时刻腹腔注射CDPC0?015ml加生理盐水0.085ml（总容量为0.1ml），1次·d-1，共14d。（3）参麦注射液组(HIBD?1组)。各鼠完成HIBD后仍回原饲养环境、由原母鼠喂养，分别

6、于即刻（0h）及之后每天的同一时刻腹腔注射参麦注射液0?08ml加生理盐水0.02ml（总容量0.1ml），1次·d-1，共14d。（4）生理盐水组（HIBD?3组）。各鼠完成HIBD模型后仍回原饲养环境、由原母鼠喂养，每日给予生理盐水0.1ml腹腔注射，1次·d-1，共14d。（5）假手术组（Sham组）。幼鼠仅进行手术游离左侧颈总动脉，但不结扎、不缺氧、不进行其他处置，术后仍回原饲养环境、由原母鼠喂养。1.3.3Y?型迷宫实验学习测试按照实验设计，所有幼鼠均与母鼠一起饲养至21d断乳，然后于同一环境中由专人喂养，至第60、61天以及第

7、90、91天分别进行Y?型迷宫测试。Y?型等臂电迷宫臂长30cm，高15cm，宽15cm，每臂末端有15m。电流强度0.7mA，选用电压（50±5）V，电击延时5s。（1）学习训练及测试：实验开始时，将动物放入Y?型迷宫中的任一臂并将该臂设为起步区，让大鼠静置适应3～5min，注意观察第0～3min大鼠适应环境行为（开场行为），主要是寻觅活动度、后腿站立次数、排粪便粒数及理毛次数。然后将其它任一臂的信号灯打开作为条件信号，示安全区，指示动物应跑向该臂，经5s延时后，不亮灯两臂及连接区通电（50±5）V作为非条件刺激。当动物逃避电击至安全区

8、后切断电流，此时灯光仍持续约30s使动物产生记忆，然后熄灯休息45s即完成一次测试。凡通电时动物直接从起步区跑向安全区为“正确反应”，反之为“错误”。达到学会标准为连续10次训练中有9次正确，