不同产地金银花中绿原酸和木犀草苷含量的hplc法测定

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1、不同产地金银花中绿原酸和木犀草苷含量的HPLC法测定宋平顺，卫玉玲，陶耀武，丁永辉【摘要】目的通过HPLC法测定不同地区人工栽培金银花中绿原酸和木犀草苷的含量，考察甘肃金银花质量状况。方法绿原酸色谱柱：C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-0.4%磷酸（13∶87），流速为1.0mL/min，检测波长为327nm。木犀草苷色谱柱：苯基色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-0.5%冰醋酸（二元梯度洗脱），流速为1.0mL/min，检测波长为350nm。结果甘肃不同地方栽培的金银花中，绿原酸、木犀草苷含量分

2、别占2.16％～3.63%、0.0532%～0.1407%，均符合中国药典以及补充检验方法的规定。结论甘肃栽培品金银花的质量与山东、河南道地产区相当。【关键词】金银花；绿原酸；木犀草苷；HPLC金银花为常用中药材，具有清热解毒、凉散风寒的功效，《中国药典》收载为忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb的干燥花蕾或带初开的花[1]。金银花具有广泛的生态适应性，全国除西藏、青海、新疆、宁夏、内蒙古和海南以外，其他省（市、区）均有分布，野生资源比较丰富[2]。我国人工栽培金银花已有270多年的历史，近年来种植发展迅猛，山东、河南、湖南

3、、河北、山西、甘肃、四川、贵州、新疆等地都有栽培，以山东、河南为主产区，习惯认为山东产量大，而河南品质佳[2]。金银花除在药品、保健、轻工业等领域广泛应用外，同时也是一种生态环保型的经济林木，根系发达，具有蓄水保土和防风固沙的作用，茎叶还可以做牛羊饲料，还是美化环境的花卉，人工栽培金银花其社会经济效益十分显著。甘肃野生金银花分布于天水、陇南地区，仅有资源而无商品，2001年以来，金昌、白银、兰州和陇南等地人工栽培成功，其中金昌、陇南已经建立商品基地。目前，国内关于金银花的质量主要以绿原酸、异绿原酸、咖啡酸和挥发油等指标成分进行评价[3-5]，甘

4、肃人工栽培的金银花质量评价未见报道，本文采用HPLC法测定甘肃栽培金银花中绿原酸和木犀草苷含量，并与国内其他产区比较，为今后甘肃发展人工资源和选择GAP适宜的基地提供依据。1仪器、试药与样品1.1仪器美国m×250mm,5μm）；流动相为乙腈-0.4%磷酸（13∶87）；流速1.0mL/min；检测波长327nm；柱温为室温。理论塔板数按绿原酸计算应不低于1000。2.1.2对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品10.2mg，置50mL棕色量瓶中，用50%甲醇稀释制成每毫升含45μg的溶液。2.1.3供试品溶液的制备取样品（过3号筛）0.5g，精

5、密称定，置50mL容量瓶中，加50%甲醇50mL，称定重量，超声处理（功率250in，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密取续滤液5mL，置25mL棕色量瓶中，加50%甲醇定容至刻度即得。按以上色谱条件得到对照品、金银花色谱图。见图1、图2。图1对照品HPLC图图2样品HPLC图2.1.4样品的测定14批金银花样品按“供试品溶液制备”方法制备样品，精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，以干燥品计算含量，结果见表1。2.2木犀草苷含量测定及补充检验方法[1]2.2.1色谱条件苯基色谱柱（4.6mm×2

6、50mm,5μm）；流动相为乙腈-0.5%冰醋酸，二元梯度洗脱，0～15min，乙腈10％～20%，15～30min，乙腈20%，30～40min，乙腈20％～30%；流速1.0mL/min；检测波长350nm；柱温为室温。理论塔板数按木犀草苷计算应不低于20000。2.2.2对照品溶液的制备精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥12h的木犀草苷对照品9.40mg，置50mL量瓶中，用70%乙醇定容即得对照品储备溶液。2.2.3供试品溶液的制备取样品（过3号筛）2g，精密称定，置50mL容量瓶中，精密加70%乙醇50mL，称定重量，超声处理（功率

7、250].北京：化学工业出版社，2005:58.[2]徐炳声.金银花的原植物研究[J].药学学报，1979，14（1）：23.[3]黄西峰.金银花的研究概况及展望[J].中国中药杂志，1997，27（4）：247.[4]王天志.金银花的研究进展[J].华西药学杂志，2000，15（4）：292.[5]王桂英，田勤为.金银花的采收加工方法及其成品性状比较[J].中草药，1996，27（4）：233.[6]中国药材公司.中国中药区划[M].北京：科学出版社，1995：120.