不明原因早期自然流产蜕膜组织中肿瘤坏死因子受体1的表达

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1、不明原因早期自然流产蜕膜组织中肿瘤坏死因子受体1的表达闫春芳金辉李旭陈葳于学文张蕴王景【关键词】早期妊娠　　Expressionoftumornecrosisfactorreceptor1indeciduasfromunexplainedearlyspontaneousabortion　　【Abstract】AIM:Toinvestigatetheexpressionandhistologicallocalizationoftumornecrosisfactorreceptor1(TNFR1)indeciduasofunexplai

2、nedearlyspontaneousabortion.METHODS:Thirtyoneen,alpregnancyenplesfromtheteofabortion.ImmunohitochemistyinethelocationandintensityofTNFR1staininginallthedeciduas.RESULTS:TheratesofTNFR1expressedindecidualglandularepitheliacells,stromalcellsandbloodvesselendothelialcells

3、ofabortiongroupalcellsandbloodvesselendotheliacellsfromtheabortiongroupthecontrolgroup(P=0.0217,P=0.0008).TheexpressiveintensityofTNFR1theabortiongroupthanthatfromthecontrolgroup(P0.01),buttheexpressiveintensityofTNFR1inthedecidualstromalcellsfromabortiongroupcontrolgr

4、oup(P0.01);therealcellsandbloodvesselendothelialcells,andthedecreaseofTNFR1expressedinthedecidualglandualepithelialcellsmaycontributetotheunexplainedearlyspontaneousabortion.　　【Keyornecrosisfactorreceptor1,TNFR1）在蜕膜中的表达及其与不明原因自然流产的关系.方法：采用免疫组化方法，对31例妊娠6~10ornecrosisfac

5、torα,TNFα）的表达水平升高有关〔1-3〕.由于肿瘤坏死因子受体1（tumornecrosisfactorreceptor1,TNFR1）在介导TNFα生物效应的过程中起主要作用，TNFR1在位于母胎界面的蜕膜组织中的表达，可能是TNFα参与不明原因自然流产的分子免疫机制.我们通过对TNFR1在蜕膜组织中表达的定位和半定量研究.探讨蜕膜组织TNFR1的表达与不明原因早期自然流产的关系.　　1对象和方法　　1.1对象200003/200101门诊选择孕6~10o内无服用激素类药物史.　　1.2方法蜕膜组织取得后立即用pH7.4P

6、BS液漂洗后加冷冻介质OCT(cryoformimbeddingmedium)放入液氮冻存.鼠抗人TNFR1mAb(克隆号59H398，购自奥地利Bender公司).链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶免疫组化染色超敏试剂盒（购自福州迈新生物技术开发公司）.将用冷冻介质包埋的蜕膜，用恒温冷冻切片机作连续切片，切片厚度为5μm；每个标本切片4张，分别裱贴在涂有多聚赖氨酸的载玻片上；在30℃干燥箱中干燥30min，用900mL・L-1冷丙酮固定7min，室温干燥过夜；1张行苏木素伊红染色进行组织学观察，如细胞出现明显变性、坏死的病例，则予以剔除，

7、另3张切片行免疫组化染色.一抗为鼠抗人TNFR1mAb,工作液浓度为1∶500，用PBS代替一抗作空白对照，采用链霉素抗生素蛋白过氧化酶连结常规染色法.每份样品均在高倍光学显微镜下，分别随机选取腺体、间质和血管各10个视野，如出现棕褐色、棕黄色颗粒者为TNFR1阳性细胞.阳性分级参考(AmJPathol,1989;134:733)的半定量分级方法.淡黄色记数为1，棕黄色为记数2，深棕色记数为3；阳性着色细胞比例20%记数为1，20%-50%记数为2，>50%记数为3.以上两项相加等于2～3为弱阳性（+），3～4为阳性（），≥4

8、为强阳性（）.细胞结构清晰，无棕褐色或棕黄色颗粒出现者为阴性（-）.　　统计学处理：采用SPSS统计软件进行统计学处理，计数资料率间比较用Fisher精确概率法；等级资料用非参数Wilcoxon两样本法进行比较，以α=0.05为显著性