hplc法测定独子藤中雷公藤红素的含量

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1、HPLC法测定独子藤中雷公藤红素的含量：刘慧琼，李国成,卢绮雯,王定勇【摘要】目的建立高效液相色谱法测定独子藤中雷公藤红素的含量，为雷公藤红素的药用植物资源开发提供依据。方法采用SupelcoDiscoveryC18柱(25cm×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇-5%(体积分数)H3PO4水溶液(体积比80∶20)，流速为1.0mL·min-1，检测波长为426nm。结果雷公藤红素在40~200μg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9991)。独子藤中雷公藤红素的平均质量分数为0.0555%，雷公藤红素的平均回收率为97.6%，RSD=1.78%(n=6)。结论该

2、方法简便、准确、灵敏度高、重现性好，可用于独子藤中雷公藤红素的含量测定;独子藤中雷公藤红素含量较高，可作为雷公藤红素的资源植物加以开发利用。【关键词】独子藤;雷公藤红素;高效液相色谱法;成分分析　Abstract:ObjectiveTodeterminethecontentoftripterineinCelastrusmonospermusRoxbbyHPLCfordevelopingthemedicinalresourcesofcelastrol.MethodsAnexternalstandardmethodbyHPLCn(25cm×4.6mm,5μm)ployed.Themo

3、bilephaseethanol-5%(φ)phosphoricacidsolution(80︰20)(ξ)atthefloL·min-1.Thedetection.ResultsItshoL-1(r=0.9991).ThecontentoftripterineinCelastrusmonospermusRoxbethodissimpleandaccurate,sensitiveandreproducibleandcanbeusedinthequalitycontrolofCelastrusmonospermusRoxb.ThecontentoftripterineinCelas

4、trusmonospermusRoxbonospermusRoxb;tripterine;HPLC;assay　　独子藤(CelastrusmonospermusRoxb.)为卫矛科南蛇藤属植物，分布于我国福建、广东、云南、贵州、广西等省区及越南和印度等地，主要生长于海拔1000m以上的林带中[1]。研究表明独子藤的化学成分主要为生物碱和木栓烷型三萜类化合物，其中木栓烷型三萜类化学成分对风湿病、白血病和皮肤病均有较好疗效[2]。雷公藤红素为木栓烷型三萜类化合物，是雷公藤片、雷公藤多苷片等治疗类风湿病制剂的有效成分之一,主要于中药雷公藤的根皮，具有抗炎、免疫抑制及抗肿瘤等多种药理活

5、性[3]。中美科学家于2006年联合发现雷公藤红素的抗癌新机制[4]，引发了雷公藤红素抗癌活性研究的热潮。我们在独子藤的化学成分研究中发现该植物根中富含雷公藤红素，是一种潜在的雷公藤红素植物资源,具有重要开发价值。但至今尚未见有关独子藤中雷公藤红素含量测定的文献报道。本文建立了独子藤中雷公藤红素的含量测定方法，对合理开发独子藤植物资源、促进雷公藤红素的深入研究,均具有重要意义。　　1仪器与试药　　1.1仪器　　ShimadzuLC-10AT型高效液相色谱仪(日本岛津公司)，SPD-10AT型紫外-可见检测器(日本岛津公司)，Hillipore溶液过滤器;Millipore0.45

6、μm滤膜;AY120电子分析天平(Shimadzu公司);RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。　　1.2试药　　雷公藤红素对照品(自制，经HPLC法测定纯度≥98%);独子藤于2008年10月采自广东省阳春市，由广东药学院李书渊教授鉴定为独子藤CelastrusmonospermusRoxb.;硅胶(柱层析硅胶，青岛海洋化工有限公司);甲醇为色谱纯;水为超纯水;其余试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1色谱条件　　色谱柱：SupelcoDiscoveryC18柱(25cm×4.6mm，5μm);流动相：甲醇-体积分数5%H3PO4水溶液(体积比80∶20);流速：1

7、.0mL·min-1;检测波长：426nm;柱温：25℃;进样量：20μL。色谱图见图1。　　2.2对照品贮备液的制备　　精密称取雷公藤红素对照品5.0mg，置25mL容量瓶中，加适量甲醇溶解并定容，摇匀，得到质量浓度为0.20mg·mL-1的雷公藤红素对照品贮备液。　　2.4线性关系的考察　　分别精密吸取“2.2”项下对照品贮备液1、2、3、4、5mL置于5mL容量瓶中，分别用甲醇溶解并定容，摇匀，制得系列对照品溶液。依次取上述溶液各20μL进样，依法测定。以雷公藤红素的峰面积