犬股骨髁松质骨挤压后愈合过程中骨小梁组织的形态学观察

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时间:2018-10-28

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1、犬股骨髁松质骨挤压后愈合过程中骨小梁组织的形态学观察在种植体植入术中提高种植体周围的骨质密度是提高种植成功率的必要手段。骨挤压的原理是通过使用骨挤压器挤压备洞的方式,在挤压的同时提高了种植窝周围的骨密度,同时对于骨量不足的患者也最大限度的减少了骨的丧失。本实验通过建立松质骨挤压的动物模型,应用骨挤压技术植入种植体,通过组织形态学的观察,初步探索松质骨挤压后愈合过程的形态学变化。  1材料与方法  1.1实验材料植入体:圆柱状纯钛种植体(由四川大学生物医学材料研究中心加工处理),规格:3.0/8mm,4.0/8mm,4.2/8mm。经过严格消毒后使用。挤压器:自行设计加工的不锈钢合金敲击

2、型骨挤压器,挤压端规格:3.0/8mm,3.6/8mm,4.0/8mm,4.2/8mm,其中3.6/8mm挤压器作为过渡挤压使用。敲击端规格:10/80mm。经过严格消毒后使用。  1.2动物模型的建立实验动物:普通成年杂种犬12只(由四川大学华西校区实验动物供应站提供),体重10~15kg,适应性饲养1周后进行实验。术前准备:种植体、挤压器以及手术器械术前经过高压蒸汽消毒灭菌。麻醉及固定:静脉注射30g/L(3%)戊巴比妥钠溶液全身麻醉,麻醉剂量为1mL/kg。将麻醉后的成年犬以侧卧位固定于手术台上。手术过程:①备洞。每侧股骨髁表面预备两个种植体窝。根据不同的挤压组,备洞直径分别为2

3、.0mm,3.0mm。4个种植窝中3个为挤压组,1个为对照组。②挤压。敲击骨挤压器,顺种植窝向下直至所需深度,轻柔旋转后取出,更换下一级挤压器。挤压顺序为:3.0mm→3.6mm(挤压0.6mm),3.0mm→3.6mm→4.2mm(挤压1.2mm),2.0mm→3.0mm→3.6mm→4.0mm(挤压2.0mm)。③植入。按照种植窝挤压后的直径分别植入相对应种植体。其中对照组备洞直径3.0mm,植入种植体直径3.0mm(无挤压)。12只实验犬共植入种植体48枚。④术后3d肌注青霉素钠80万单位/d,维生素C注射液2.5mL/d。实验动物分组:根据观察时间不同将实验动物分为4个大组:1

4、周组,2周组,4周组,12周组;根据挤压程度不同,各组再分为4个亚组:0mm挤压组(对照组),0.6mm挤压组,1.2mm挤压组,2.0mm挤压组。  1.3组织切片的制作与观察在植入后1、2、4、12周各处死实验犬3只。方法为肌注氯胺酮或速眠新注射液,再静脉推注空气100mL。取出种植体所在骨段,生理盐水冲洗,浸泡于固定液(甲醛溶液稀释10倍制成)中。保留种植体周至少5mm的骨质,制作种植体周松质骨的不脱钙硬组织切片,切片方向垂直于种植体长轴,进行HE染色,光学显微镜下采集图片、观察。 2结果经济师论文发表  在HE切片中,骨小梁呈均质红染的条、X状排列。染色效果良好,小梁结构清晰。

5、每张HE染色切片中的圆弧型边缘为种植体与骨质的接触部分,也就是种植窝壁部分。主要观察范围为种植窝壁邻近的骨小梁,即直接受挤压部分的骨小梁(图1)。  在1周组切片中,对照组的骨小梁呈较为疏松的X状排列,骨小梁之间的间距较大。弧形边缘与种植体直接接触的骨缘不平整(图1A)。0.6mm挤压组的骨小梁在弧形边缘的附近排列较为致密,靠近弧形边缘的骨小梁呈紧密的交织状排列,大体方向同弧形边缘的方向,且骨质的弧形边缘比较清晰平整。过渡到内部疏松X状排列的骨小梁有一较为明显的"分界线"(图1B)。1.2mm挤压组中的骨小梁在弧形边缘区排列更为致密,骨小梁之间间距很小,骨小梁的排列方向趋于与弧形边缘一

6、致,且弧形边缘清晰平整。致密排列的骨小梁范围比前两组中的显著扩大,到内侧的骨小梁恢复正常的X状排列,其间有较为明显的分界。种植窝壁有少量炎症细胞浸润(图1C)。2.0mm挤压组中近弧形处的骨小梁排列非常致密,且近似板层状排列,内侧骨小梁排列较弧形边缘处疏松,且排列方向也有明显的变化。因此,二者之间也有比较明显的分界。整个视野范围内骨小梁的排列都较前三个挤压程度的切片致密。弧形边缘更加清晰平整。种植窝壁炎症细胞较多(图1D)。  在2周组切片中,随着挤压程度的增加,骨小梁排列致密程度逐渐增加,但挤压组近弧形处骨小梁的局部致密排列已经没有1周观察组那么明显。从弧形边缘至内部骨小梁排列由致密

7、到疏松逐渐过渡,没有明显的分界。种植窝壁的炎症细胞也明显较1周观察组减少(图1E~图1H)。  在4周组切片中,随着挤压程度的增加,骨小梁排列仍然呈逐渐致密的趋势,有所变化的是,对照组与挤压组切片中的骨小梁排列都比较均匀,近弧形边缘与内部的骨小梁排列致密程度相当,基本看不到由致密到疏松的过渡。其中L图(2.0mm挤压)还可以看到在弧形边缘处有一层近似板状骨的结构。种植窝壁已看不到炎症细胞的侵润(图1I~图1L)。  在12周组切片中,骨小梁排列

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