嗜麦芽寡养单胞菌临床株外排泵smedef诱导表达的研究.doc

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1、嗜麦芽寡养单胞菌临床株外排泵SmeDEF诱导表达的研究作者：孙二琳宋诗铎祁伟王玉宝【摘要】目的了解嗜麦芽寡养单胞菌的临床株H407和A26在抗菌药物诱导下耐药性和SmeDEF外排泵表迗的变化。方法比较有或无环丙沙星诱导时嗜麦芽寡养单胞菌H407和A26的MIC和EOP值，对在亚抑菌浓度环丙沙星中培育后的菌株smeD基因进行RT-PCR扩增，监测表达水平。结果对抗生素敏感的H407和A26泵抑制呈阳性或阴性反应。2株菌经环丙沙星过夜孵育后测得的对氯霉素和环丙沙星MIC值比正常非诱导时的MIC值高1〜3个稀释度;加泵抑制剂CCCP后，2个诱导株的MIC值均有明显

2、下降。H407和A26经环丙沙星诱导后氯霉素的EOP分别有和近4倍的增长。2株菌在抗菌药物过夜和指数期添加生长时smeD的mRNA明显高于无抗菌药物培养株。结论2株嗜麦芽寡养单胞菌临床株在环丙沙星诱导下对部分抗菌药物的耐药性提高，与SmeDEF栗的诱导表达增加有关。【关键词】嗜麦芽寡养单胞菌；外排泵；耐药性；诱ABSTRACTObjectiveToinvestigatechangesofantibioticnicalisolatesof,anresistanceoftheclidtherepressionlevelofeffluxpumpSmeDEntibi

3、otics.MethodstanceprofileofthegardilutionandtheeOP)toantimicrobes,opumpinhibitorCCCPhemRNAlevelofsmeDbnceornotofciprofloantibiotic-sensiti6werepositiveandnetorrespectively.MIndchloramphenicoliFbytheinductionofasToexaminetheresiclinicalstrainsbyafficiencyofplate(EandthEirreactionst,

4、andtoinvestigatetyRT-PCR,inthepresexacin.ResultsThevestrainsH407andA2gativetopumpinhibiCsofciprofloxacinanducedbyciprofloxacinwithsub-inhibitionlevelwerehigherbyl3dilutionsthanthosewithoutinduction.Theincre-aseswereinhibitedbyCCCP.Afterinductionbyciprofloxacin,theEOinH407andA26incr

5、eaesrespectively,andeDinthe2antimicrobseaswell.ConclusiseveralantimicrobefcouldbeinducedbycPtochloramphenicolsedbyandnearly4timthelevelofmRNAofsme-inducedstrainsroonTheresistancetosinthetwoisolatesoiprofloxacin.Thepossibleantibiotieresistancemechanismsseemedlikelybythemvolvementoft

6、heincreasedtranscriptionlevelofsmeDEF.KEYWORDSStenotrophomonasmaltophilia；Antibioticresistance；Effluxpump；Induction嗜麦芽寡养单胞菌是机会致病菌，近10年来该菌所致的感染不断上升，已成为医院内感染的重要的致病菌之一，可引起身体多个部位的炎症及败血症，其中在下呼吸道感染的分离率高。嗜麦芽寡养单胞菌耐药性强，对临床使用的多数抗生素都具有耐药性［1，2］，对部分抗生素甚至高度耐药。嗜麦芽寡养单胞菌内源性和获得性多重耐药机制可能与存在多重外排泵有关，已发

7、现的外排泵SmeDEF对多种毒性物质和包括氟喹诺酮类的多种抗生素有外排作用［3］。研究显示SmeDEF的表达水平与该菌多重耐药程度有关。了解药物外排泵及其调控机制对于该菌多重耐药本质的认识和药物作用靶位的研究均有重要意义。目前对嗜麦芽寡养单胞外排泵SmeDEF表达调控机制的研究较少，发现SmeT蛋白对SmeDEF转录有阻遏作用。已有研究发现多药外排泵如大肠埃希菌AcrAB泵的表达能被胆盐和某些抗菌药物所激发，可能与感染时大肠埃希菌耐药表型的诱导有关［4,5］。外排系统调控机制复杂，是否在嗜麦芽寡养单胞菌中也有这样的诱导机制？本研究对嗜麦芽寡养单胞菌临床株在抗

8、菌药物诱导下的表型和药物外排泵SmeDEF表迖进行分