三类不同人群肠道大肠杆菌耐药性的比较研究

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1、三类不同人群肠道大肠杆菌耐药性的比较研究作者:林鸿吴聪明蓝坚贞摘要:本文采用美国KCLS推荐的纸片扩散法,对分离自与动物有不同接触水平的三类人群肠道的大肠杆菌进行了9种抗菌药物敏感性试验。结果三类人群肠道大肠杆菌耐药存在明显差异,其中以饲养员分离菌对9种抗菌药物的耐药率最高,学生人群分离菌的耐药率最低,屠宰人员分离菌介于二者之间,三人群分离菌对四环素、复方新诺明以及氨苄西林的耐药率最大,耐对头孢氨苄以及多粘菌素B几乎没有耐药性。三类人群对9种抗菌药物的耐药率变化趋势相近。关键词:大肠杆菌;药物敏感性;耐药性抗生素使用•一个不可避免的副作用就是耐药细菌的出现及传播。许多

2、M顾性及前瞻性调杏研究表明在抗生素使用后,不仅病原菌的耐药性水〒,而且体内外的共生菌耐药性水〒•也会增加。共生菌是供应病原菌耐药基W的潜库,W此其耐药水平是监控抗生素选择压力及预测病原菌耐药性趋势的一个良好指示器[1]。食品动物的耐药性共生荫可通过污染食品进入人体肠道共生荫[2_8]。因此监测不同米源如环境、动物、娲人及健康人的指示菌(人肠杆谢及肠球谢)耐药性流行情况,可了解细菌耐药性的流行趋势,并检测耐药细菌或耐药基因在动物和人之间的转移。木文尝试对与动物接触程度不同的三类人群肠道分离大肠杆进行调查研究,以期丫解人群肠道菌耐药性发生发展与动物接触程度之间的相又性,从

3、而对动物源耐药菌经与人体直接接触传播进入人体的可能性。1材料与方法1.1试验材料1.1.1培养基伊红美兰琼脂,批号20011123;普通肉汤,批号20020524;营养琼脂,批号20011215;MH琼脂,批兮20020812。均购自杭州天和微生物试剂冇限公司。1.1.2肠杆菌科细菌生化编码微量鉴定管型号GYZ-lle,批号20020826,购A杭州天和微生物试剂有限公司。1.1.3标准菌株人肠埃希氏尚ATCC25922;金黄色葡萄球谢ATCC25923;铜绿色假单胞谢ATCC27853。均购A杭州天和微生物试剂有限公司。l.i.4药敏纸片药物纸八种类及含药a见下表1

4、,批兮略,购自杭州天和微生物试剂冇限公司。购买的每批药物纸片在使川前均按NCCLS要求川上述3种准荫株进行质控,符合要求者方可使川,毎周用标准荫株ATCC25922进行质控,符合要求者冰可继续使用。1.2试验方法1.2.1标本采集分别从19名猪场饲养员、11名居宰人员以及15名学生采样。均以灭菌棉签采集直肠拭子标本,在采样同时以表格形式询闷近期内(1年时间)抗萌药物服用情况。1.2.2菌株的分离直肠棉拭子直接在伊红美兰琼脂平板上涂布,37°C,24小吋培养后,从平板上随机挑取3-5个紫黑色带金属光泽的菌落进行纯培养及生化鉴定。1.2.3菌株的鉴定按杭州天和微生物试剂冇

5、限公司介绍的肠杆尚科细尚生化编码微fi鉴定管鉴定法进行。即将分离纯化的可疑人肠朴荫荫株接种到系列细苘生化编码微鉴定管内,37°C,24小时培养后,对蘭株的生化反应结果进行判断卯进行编码,按其编码检索肠杆谢科细尚牛化编码表即可获得结果,对不确定的菌株进一步补充特定生化反应项H予以判定。表1各种抗菌药物纸片含药量及判定标准抗菌药物名称纸片含药量(Ug/片)抑菌圈判断标准(nun)耐药(R)中介(M)敏感(S)氨卞西林10<1314-16^17头孢氨苄30^1415-17^18环内沙星5^1516-20>21链霉素10<1112-14>15四环素30^1415-18>19氯

6、霉素30<1213-17>18呋喃唑酮300^1415-16>17方新诺明23.75/1.25^1011-15>16多粘荫素B300P<89-11>121.2.4药敏试验整个药敏试验严格按照美国临床实验室标准化委记会(XCCLS1999)推荐的纸八扩散法操作程序进行。在营养琼脂平板上挑収单个菌落接种于2ml普通沟汤管内,37'C培养16-18小时川MH肉汤调制尚悬液,使艽达到0.5麦氏比浊管浊度。川火菌棉拭了蘸取己调制好的菌悬液,于管壁上挤上多余液体,迕已烘十的MH琼脂平板上均匀涂抹,平皿涂好后放置3-5分钟,待其培养基表而水份吸收T,即用无荫眼科镊将药敏纸片贴于平板

7、上,每种药物贴2个纸片。37°C培养16-18小时后观察结果。川游标卡尺量取每种药物2个抑尚圈的直径,计算平均值,参照NCCLS1999公布的标准以敏感、屮介或耐药3种形式对抑菌圈的人小作出解释,个别NCCLS1999没有列出但我国仍迕临床上使川的药物(如呋喃唑酮等),按杭州天和微生物试剂冇限公司捉供的标准进行解释。2结果2.1接受调查的所有人经答卷式询问,得到的结果他们至少在6个刀以内都没有服用过任何抗菌药物。三类人群井分出134株大肠杆菌,其中学生人群41株,居宰加丄人员33株,饲养员60株。三类人群分离荫对9种抗荫药物的耐药率归纳为表2。从表2

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