正常绒毛和葡萄胎中mel

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1、正常绒毛和葡萄胎中Mel：安瑞芳，谢丽，王姝，张晨【摘要】目的探讨葡萄胎中Mel-CAM与滋养细胞黏附、浸润之间的关系以及Mel-CAM标记中间型滋养细胞(IT)的增殖情况。方法采用双重免疫组化法，检测Mel-CAM标记IT的Ki-67表达情况。结果葡萄胎中Mel-CAM表达较正常绒毛明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)；葡萄胎绒毛表面有Mel-CAM标记IT出现，而正常绒毛表面则无；葡萄胎组织中IT的Ki-67指数较正常绒毛明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论葡萄胎绒毛表面有Mel

2、-CAM表达，表现出双重分化方向，这可能与葡萄胎的发病机制有关；检测葡萄胎组织中IT的Ki-67指数对于预测葡萄胎的转归有潜在的价值。【关键词】黑素瘤细胞黏附分子；中间型滋养细胞；Ki-67；葡萄胎　　ABSTRACT:ObjectiveToexploretherelationshipbetediatetrophoblast.MethodsDoubleimmunohistochemicalstainingtechniqueediatetrophoblastinhumanvilliduringthefirsttri

3、mesterandhydatidiformmole.ResultsInthisstudytheremolethanthatinfirst-trimestervilli(P<0.05).TheexpressionofMel-CAMinhydatidiformmoleanvilli.TheKi-67indexofhydatidiformmoleanvilliightplayanimportantroleintheinvasionoftrophoblasticcells.Thedifferentdifferent

4、iationtypeofvilloustrophoblastinhydatidiformmoleandthefirst-trimestervillimaybecorrelatedediatetrophoblasthasapotentialvalueinpredictingprognosisofhydatidiformmole.　　KEYel-CAM的发现，使得IT的研究跨入了一个新的阶段。因此，本研究中利用Mel-CAM标记IT，研究其在正常绒毛和葡萄胎中的增殖情况，以期对IT与疾病的关系有更进一步的了解。　　1

5、对象与方法　　1.1研究对象　　选择1995年1月至2000年12月间西安交通大学医学院第一附属医院的葡萄胎(hydatidiformmole,HM)组织标本30例作为研究组，患者年龄22-50岁，平均32岁。选择2000年门诊正常早期妊娠(6-12周)人流术后绒毛组织标本20例作为对照组。　　1.2主要试剂　　鼠抗人Mel-CAM及Ki-67单克隆抗体均为北京中山金桥生物技术有限公司产品。　　1.3标本的制备及免疫组化染色　　取上述葡萄胎患者首次清宫组织标本及正常早期妊娠绒毛组织标本，多聚甲醛固定，石蜡包埋，常

6、规切片，切片厚5μm。用双重免疫组化的方法先进行Ki-67的染色，DAB显色；然后做Mel-CAM染色，AEC显色。阴性对照：用相邻切片对照染色，以PBS代替第一抗体作为阴性对照。阳性对照：用已知阳性绒癌组织切片做Mel-CAM的阳性对照，乳腺癌组织切片做Ki-67的阳性对照。　　1.4结果判断　　①Mel-CAM标记IT的比例。每张切片观察10个高倍视野(×400)，每个高倍视野计数100个滋养细胞，计算其中Mel-CAM阳性染色细胞所占的比例。阳性细胞数<25%为阴性(-)，25%-50%为弱阳性(＋)

7、，50%-75%为阳性()，>75%为强阳性()。②Ki-67标记指数。每张切片观察10个高倍视野(×400)，每个高倍视野计数100个中间型滋养细胞，计算其中Ki-67阳性核的IT的百分比。　　1.5统计学方法　　所有资料采用SPSS13.0软件分析。资料为等级计数资料，采用Kruskal-el-CAM的表达　　Mel-CAM表达仅见于IT，表现为均匀一致的线性染色包绕于整个IT表面。ST和CT无表达，蜕膜、内膜腺体和基质炎症细胞对Mel-CAM均为阴性表达。IT的Mel-CAM染色不仅表达在单核IT

8、中，多核IT表面也可见表达，展示了一个IT变化的系列形态(图1、图2)。这可能显示了从CT向ST转变的一个中间阶段。无论在正常绒毛还是葡萄胎组织中，所有的Mel-CAM阳性细胞的染色强度无明显差异。　　在正常绒毛表面未见Mel-CAM表达，滋养细胞柱和浸润蜕膜的部分绒毛外IT中可见染色。这种染色模式在一定程度上反映了细胞滋养细胞在绒毛表面和绒毛外的不同分化途径，以及不同类