g 试验和 gm 试验的质量控制

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1、G试验和GM试验的质量控制首都医科大学附属北京安贞医院左大鹏 G实验和GM实验的质量控制。质量控制有四个基本要素：试剂，仪器，操作，标本。有三个阶段：分析前，分析中和分析后。关键是室内质控的实施和管理。所有这些均要通过规范化操作程序文件（SOP）来实现。对于G试验和GM试验都要根据厂家的说明书、结合实验室的具体情况，建立标准化程序，规范操作过程，叫做SOP文件。对g实验来讲，根据厂家的说明书，以说明书为原则，结合实验室的具体情况和自己的体会来制定。第一点包括实验原理和检测目的1.1实验原理。1.2检测目的。用于临床辅助诊断侵袭性真菌病。第二，标本种类也做出了要求。2.1标本种类。根据不

2、同试验、说明书的要求确定，认为这个实验需要哪些标本。例如G试验：血液、脑脊液、胸腹水、肺泡灌洗液。2.2收集要求。最关键的是采样过程要求无菌操作，用无热原真空采血管（肝素类抗凝）。2.3标本保存。样本采集后应2小时内操作。若不能及时检测，应将血浆、血清转移至无菌、无热原转移管内，在-20℃冰箱中冷冻保存，一周内检测。目前，G实验的标本是血浆，在国外是血清。一般来说，国内也建议改成血清。因为血清标本相对于血浆标本来说，浊度、测光度、显示色，都是血清优于血浆的，另外血清经过血液的自然凝固，能克服纤维蛋白丝和残留细胞的干扰。其他标本，如细胞培养液、肺泡灌洗液要离心后去除细胞取上清液检测。关于

3、真空采血管问题。由于G实验对试验用品要求极其严格，不能有任何污染（细菌和真菌），不能有致热源，因此厂家都配备了专用的试管和吸头。但是真空采血管无法控制，由临床使用单位来决定的，常因采血管含有致热源或没有达到灭菌要求而造成试验出现假阳性。我们举个例子：2012月6月15日某市某医院检验科微生物室共检测34例临床标本，其中25例阳性标本，阳性率高达73.5%，这是不对的，没有这么高的，其中10例检测值>1000pg/ml，当然和临床是不符合的，到底什么原因呢？这是34份标本G试验检测结果及所用采血管批号。编号1,2,3,4,5,6,7,8，一直到34。检测值>1000的，一共有10个。所以

4、考虑到管子是有问题的。11120指LOT号为某公司采血管的批号，一共用了17只，结果均为阳性，其中有9例结果均>1000pg/ml，故决定对LOT号某公司采血管进行检测。编号V9—V16为本公司工程师携带的BD的管子。编号V17—V24为某医院自有的BD的管子。结果，Lot的管子都是阳性，而bd的管子，不管是带去的还是医院自己的都是阴性。实际从v1到v8大于1000。从b1以后都小于10。本次检测的8支>1000的管子，都是11120的管子。说明这34个标本中出现假阳性，是由于采血管的不合格引起的。三、使用试剂及试剂保存。按说明书3.1使用试剂。3.2试剂保存4、使用仪器。不同厂商有自

5、己的检测系统，各系统之间可能存在差异。标准曲线制备。标准品来源。G实验室一个定量的实验，从待测样品当中（1-3）-β-D葡聚糖到底是多少。说道定量试验，应当为有证标准品。根据标准品做标准值。这样根据曝光率和吸光度就知道待测物体的含量。但在G试验里，中间有个时间的换算，没有直接用曝光率和标准品比对。但不管怎么做标准曲线，标准曲线都是定量实验的。标准品的来源必须有证。5.2标准品标量，例如MB-80微生物快速动态检测系统的1-3）-β-D葡聚糖标准品：200pg/vial。5.3标准品稀释成不同定值量。例如MB-80微生物快速动态检测系统的（1-3）-β-D葡聚糖标准品：200pg/via

6、l最终配成（1-3）-β-D葡聚糖浓度分别为100pg/ml、10pg/ml及1pg/ml。5.4标准品如何制备，如何无菌操作，如何稀释配制。5.6标准曲线制备.操作描述。肯定要无菌操作、标准品复溶解、设立空白对照、稀释倍数的计算。例如原品进行了10倍稀释，在绘制标准曲线时各浓度点乘以10，其浓度范围变成1000pg/mL、100pg/mL至10pg/mL。因此在填表时要注意分别输入标准品浓度为1000pg/mL，100pg/mL和10pg/mL。我们看这样一个曲线。绿线是空白，里面不含标准品的。蓝线是10pg/ml，紫线是100pg/ml，浅黑线是高含量，1000pg/ml。最后检测

7、要乘以10。都是以曝光率从100%降到90%的时候，算的时间点，此时1000pg/mL，100pg/mL和10pg/mL。曝光率和时间有关系，而最后将时间点和浓度作一个标准曲线。5.7标准曲线的性能要求，如灵敏度最高能查出多少。标准曲线要计算相关的系数如，反应结束后进行直线回归，其相关系数绝对值大于0.980，为曲线合格，否则应重复制备曲线。标准品反应曲线的存储。一批试剂弄好了储存到仪器当中，下次就不用再做标准曲线了。当然更换了试剂批号后，要重