g试验和gm试验厦门174张玲2015.8.3

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1、G试验和GM试验实验室检查中国人民解放军第一七四医院检验科张玲2001我国卫生部“医院感染诊断标准（试行）”的具体诊断标准：1.在原发病的诊治过程中出现呼吸系统症状和体征、发热、白细胞增加；2.х线胸片出现不能解释的片状或团块状阴影；3.影像学提示有肺部病变，应用抗生素治疗过程中病情恶化，用一般细菌感染不能解释；4.连续３次深部痰培养为同一种真菌；5.血、尿、便培养为同一种真菌。卫生部肺部真菌感染的诊断标准真菌感染诊断症状体征—特异性？影像学—特异性？真菌涂片、培养—敏感性？特异性？时间病理—特异！敏感性？侵入性早期、快速、敏感、特异、采样方便G试验、GM试

2、验生物标志物(G和GM试验)分别被列入真菌诊断和治疗的指南欧洲癌症治疗研究组织(EORTC)美国国家过敏症与传染病研究所霉菌病研究组(MSG)批准用于真菌诊断(JAntimicrobialChemotherapy2008,61:S1,i3)。中国血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断标准与治疗原则(第3次修改版本)G试验作为侵袭性真菌感染临床诊断的指标GM试验作为疗效判定的指标IFI诊断标准确诊:病人有感染的危险因素;有临床症状;;微生物培养阳性;组织检测阳性;临床诊断:病人有感染的危险因素;高分辨CT出现阳性的影象特征.1-3-β-D葡聚糖试验(G试验)阳性.

3、并值上升;广谱抗生素应用无效;疑似:病人有感染的危险因素;有临床症状或微生物检测+微生物学标准（1）痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌（包括曲霉菌属、镰刀霉属、接合菌或放线菌属）或新型隐球菌阳性；（2）鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查，或培养呈霉菌阳性；（3）痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发现霉菌或隐球菌；（4）支气管肺泡灌洗液、脑脊液或2份以上的血液样品呈曲霉菌抗原（半乳甘露聚糖检测、GM试验）阳性；（5）血液中(1,3)-β-D葡聚糖检测（G试验）阳性；（6）血中隐球菌抗原阳性；（7）无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌；（8）未留置尿管的情况下，连

4、续2份尿样培养均呈酵母菌阳性或尿检见念珠菌管型；（9）血培养呈酵母菌阳性；（10）肺部异常，与下呼吸道感染相关的标本中（血液、痰液和支气管肺泡灌洗液等）多次培养无任何致病细菌。获得有效治疗机会预防用药:在IFI的高危患者中,预先应用抗真菌药物以预防IFI的发生.经验治疗:患者有免疫缺陷,长期应用激素治疗后出现不明原因的发热,广谱抗生素治疗96h无效者,或起初有效3-7天后再出现发热,在积极寻找病因的同时,可经验性应用抗真菌治疗.抢先先治疗和确诊治疗抢先治疗:对已确立临床诊断和高度疑似的患者应用抗真菌药物.确诊治疗:对确诊为IFI的患者的治疗G试验原理G试验检测的是

5、真菌的细胞壁成分---1,3-β-D-葡聚糖（BG），人体的吞噬细胞吞噬真菌后，能持续释放该物质，使血液中含量增高。定植时BG很少释放入血，因此可有助于鉴别真菌侵袭与定植。-(1,3)-D-葡聚糖细胞核（1-3）-D-Glucan鲎变形细胞裂解物的G因子活化G因子凝固酶原凝固酶凝固蛋白原凝固蛋白（凝胶）G试验的临床价值1,3-β-D葡聚糖为真菌细胞壁成分,适用于除隐球菌和接合菌（毛霉菌）外的所有深部真菌感染的早期诊断，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能确定菌种。诊断侵袭性真菌感染（如侵袭性念珠菌病、侵袭性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等）的方法之一。不能检测：隐球菌和接合菌

6、敏感性、特异性：90％左右是早期真菌感染的敏感生物标志国产：MB-80（天津金山川）检测原理：动态浊度法Cut-off：阴性＜10pg/ml，中介10~20pg/ml，阳性＞20pg/ml，儿童阳性＞50pg/ml标本采集：静脉采血2ml（绿帽管，肝素抗凝）。检测标本：血液、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等。念珠菌、毛孢子菌、曲霉、镰刀霉、支顶孢霉、卡氏肺孢子菌不能检测隐球菌、接合菌（根霉、毛霉、根毛霉、犁头霉等）无热原采血管（BG-free），3h内送检48h内4~8℃，-20~-70℃冻存，-70℃保存2年，仅可反复冻融4次（尽可能不使用冻融标本）检测

7、环境要求高－－清洁！（安全柜）G试验：检测范围、要求高危人群监测监测人群高危人群：血液系统恶性肿瘤，中性粒细胞减少，同种异体干细胞移植不推荐在实体器官移植患者中常规监测监测频率建议至少每周两次连续动态监测试验结果判断连续两次检测I≥0.5，考虑阳性结合临床正确解读试验阳性和阴性G试验假阳性的情况使用纤维素膜进行血透，标本接触过纱布或其他含有葡聚糖的材料；静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；标本中存在脂多糖；操作者处理标本时存在污染；使用多糖类抗癌药物（如香菇多糖）；放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液；服用多粘菌素,厄他

8、培能,头孢