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时间:2018-10-22
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1、脂联素与成纤维生长因子孙竹林张眉花郑绘霞肖虹赵玉泽梁建芳【摘要】目的探讨脂联素(apM1)和成纤维生长因子2(FGF-2))在妊娠期糖尿病胎盘组织中的表达及意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测30例妊娠期糖尿病(GDM)产妇、20例非糖代谢异常产妇(NGT)胎盘组织中apM1mRNA和FGF-2mRNA的表达情况。结果(1)GDM组apM1mRNA表达水平(0.71±0.08)低于正常对照组(1.38±0.11)(p<0.05);GDM组FGF-2mRNA表达水平(2.16±0.09)高于
2、正常对照组(1.53±0.06)(p<0.05)。(2)GDM巨大儿组新生儿出生体重与apM1表达呈负相关性,与FGF-2呈正相关性,P<0.05。结论胎盘组织中存在apM1和FGF-2的基因表达,与妊娠期糖尿病巨大儿的发生有关;apM1的低表达可能是FGF-2表达上调的机制之一。【关键词】妊娠糖尿病胎盘脂联素成纤维生长因子-2妊娠期糖尿病(gestationaldiabtesmellitus,GDM)是妊娠后首次发生或发现的糖代谢异常,是影响孕产妇及围产儿健康的常见妊娠并发症之一。近年来研究发现,GDM孕妇
3、血清中脂联素与成纤维生因子-2的水平匀发生显著性改变,与GDM孕妇的病理变化及新生儿出生体重受到广泛关注。胎盘是妊娠时期特有的器官,分泌多种激素,易受妊娠环境变化的影响.freelRNA和成纤维生长因子-2mRNA的表达情况及意义。1材料与方法1.1材料来源及分组:选取2008年8月至2009年8月在太原市妇幼保健医院产科剖宫产分娩的胎盘组织作为研究资料。其中妊娠期糖尿病组30例(妊娠期糖尿病正常儿组10例、妊娠糖尿病巨大儿组20例),非糖代谢异常妊娠组即对照组20例。所有产妇孕前均无高血压、肝肾疾病、糖尿病
4、等内科合并症及产科并发症。妊娠期糖尿病诊断标准为:美国糖尿病资料小组(NDDG)诊断标准:空腹、服糖后1小时、2小时,3小时的血糖值5.8mmol/L,10.56mmol/L,9.2mmol/L,8.0mmol/L,四点血糖值大于或等于以上两项者诊断为妊娠期糖尿病。巨大儿诊断标准为:出生体重≥4000g[1]1.2方法:RT-PCR技术检测胎盘组织中脂联素mRNA和成纤维生长因子-2mRNA的表达:采用Trizol试剂抽提总RNA,脂联素和成纤维生长因子-2引物由上海生工生物工程技术有限公司合成。引物序列见表
5、1表1脂联素和FGF-2特异性扩增引物序列及扩增片段长度逆转录反应体系主要包括目的RNA6μl,Oligo(dT)1μl,总体积20μl置于25℃水浴锅中5min,42℃1h,75℃15min。PCR反应体系主要包括cDNA1.0μl,上下游引物各5μl或者6μl,总体积50μl。PCR反应条件:94℃预变性2min;94℃变性1min,60或者55℃退火1min,72℃延伸2min,25或者40个循环;72℃延伸5min。1.3结果判断:1.0%琼脂糖凝胶电泳,Tanon2500凝胶成像系统照相,计算机图像
6、分析系统测定电泳条带密度值,以GAPDH为内参照,以目的基因/GAPDH灰度值的比值作为目的基因mRNA的表达水平。1.4统计学方法:采用SPSS13.0软件进行统计学处理。数据以匀数±标准差(x-±s)表示,组间比较经方差齐性分析采用t检验;相关性分析采用Spearman相关性分析,p<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1GDM组和NGT组胎盘组织中脂联素、FGF-2mRNA的表达及比较GDM孕妇胎盘组织脂联素mRNA的表达明显低于NGT组,差异有统计学意义(P<0.05)(图1);FGF-2mRNA在
7、GDM组胎盘组织中的表达水平明显高于NGT组,差异有统计学意义(p<0.05)(图2)。数据分析见表2。表2脂联素、FGF-2在正常对照组和GDM组比较2.2GDM巨大儿组和GDM正常儿组胎盘组织中脂联素、FGF-2mRNA的表达及比较GDM巨大儿组脂联素mRNA的表达低于GDM正常儿组,差异有统计学意义(p<0.05);FGF-2mRNA在GDM巨大儿组的表达水平高于GDM正常儿组,差异有统计学意义(p<0.05)。数据分析见表3。(见图1、图2)表3脂联素、FGF-2在GDM正常儿组和GDM巨大儿组的比较
8、2.3GDM巨大儿组和GDM正常儿组出生体重与脂联素mRNA、FGF-2mRNA相关性分析GDM巨大儿组出生体重与胎盘脂联素mRNA表达水平呈负相关(r=-0.362p<0.05),与FGF-2mRNA呈正相关(r=0.475p<0.05);GDM正常儿组出生体重与脂联素mRNA(p>0.05)无明显相关性,与FGF-2mRNA(p>0.05)无明显相关性。2.4GDM巨大儿组中脂联素和FGF-2之
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