荷叶化学成分研究

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1、荷叶化学成分研究莲属隶属于被子植物门双子叶植物纲睡莲科Nymphaeaceae的莲亚科Sufam.Nelumboideae。该属植物有2种,分别为美洲黄莲NelumbopentapetalaFernald.,北部为中心分布在北美;中国莲N.nucferaGaertn.,以中国为中心分布在亚洲、大洋洲。我国仅有中国莲一种,为多年生水生草本植物,在湖南、湖北、浙江、江苏等地有广泛种植。传统医学中荷叶、荷花、藕和莲子都多有应用,在治疗咽病、胸痛、遗精、白癒风、天花、痢疾、咳嗽、呕血、略血、血尿、子宫出血、高脂血症、发热、霍乱、肝病、剧渴等病症上均有疗效。同时,莲生物体的不同部

2、位,如荷叶、莲藕、莲子等,又具有很高的食用价值。从莲的各个部位分离出的单体成分主要包括生物碱类、黄酮类、三萜类、类固醇、多酚类等E-]。荷叶是莲的干燥叶,具有清暑化湿,升发清阳,凉血止血等功效,荷叶中含丰富的生物碱类化合物,目前对荷叶的应用多集中于减肥功效的开发。为了更好的利用和开发该植物,选取荷叶为研究对象,对其所含的化学成分进行分离及活性筛选。从荷叶中共分离得到化合物27个,包括15个黄酮,2个生物碱,2个甾体,2个甾体苷,3个脂肪醇,1个苯酚和2个megastigmaneglucosides类化合物。其中,6个为首次从该植物中分离得到,4个为首次从荷叶中分离得到。

3、1材料Bruker-AVX型核磁共振仪,内标为TMS;JMS-T100CSmass型质谱仪,电离电压为70eV;RE-52型旋转蒸发仪(河南巩义市英峪仪器厂);Taike-X6显微熔点测定仪(温度计未校正);循环水真空泵DLSB40L(巩义市英峪仪器厂);KQ-300超声仪(昆山市超声仪器有限公司);柱色谱硅胶(160~200,200~300目,青岛海洋化工厂);D101大孔树脂SephadexLH-20(GE);GF254色谱硅胶板(Merck);所有化学试剂均为分析纯。实验材料于2009年10月购于北京市卫仁饮片厂,经中国中医科学院中药研究所王智民研究员鉴定为莲N.

4、nuce/era的干燥叶。2提取与分离荷叶干燥样品20kg经粉碎后,70%乙醇12倍体积中试化回流提取2次,每次2h,合并提取液,减压浓缩后得浓缩液30L。将浓缩液用乙酸乙酯萃取3次,正丁醇萃取2次,浓缩后得乙酸乙酯部分495g(A部分),正丁醇部分700g(B部分)。乙酸乙酯部分495g(A部分)硅胶柱色谱粗分,石油醚-丙酮梯度洗脱(1:0~10:1~3:1~0:1)得到4部分Ai~A4,其中A2部分硅胶柱色谱分离以石油醚-丙酮(1:0~30:1)梯度洗脱得到化合物1(28mg),2(230mg),3(20mg),4(22mg),23(28mg),24(48mg),A

5、3部分硅胶柱色谱分离以石油醚-丙酮(10:1~0:1)梯度洗脱得FrA3_FrA3_2,其中卩硅胶柱色谱分离以石油醚-丙酮(5:1)洗脱,得到21(56mg),22(17mg),FrA3_2硅胶柱色谱以石油醚-丙酮(3:1)洗脱,得到5(25mg),A4部分硅胶柱色谱分离以石油醚-丙酮(3:1~25:1)梯度洗脱,得到6(29mg),7(16mg),25(20mg)。正丁醇部分700g(B部分)经过D101大孔树脂粗分,分别用水,30%,50%乙醇梯度洗脱,得到3部分B1~B3,其中B1部分再硅胶柱色谱分离分别以氯仿-甲醇-水(40:8:1)洗脱,得到化合物14(10

6、mg),15(10mg);以氯仿~甲醇-水(30:8:1)洗脱得到化合物10(150mg),之后,此部分收集到的第13份(Fr.13),经过SephadexLH-20(甲醇洗脱)得到化合物8(12mg),第14份(Fr.14),经过Sephadex[只-20(甲醇洗脱)得到化合物9(14以8);最后,以氯仿-甲醇-水(20:8:1)洗脱,得到的第15份(Fr.15)经过SephadexLH-20(甲醇洗脱)得到化合物11(15mg),12(8mg),第16份(Fr.16),经过SephadexLH-20(甲醇洗脱)得到化合物13(6mg)。B2部分硅胶柱色谱分离以氯仿-

7、甲醇-水(40:8:1~0:0:1)洗脱得到化合物27(15mg)。B3部分以氯仿-甲醇-水(240:20:1)洗脱得到化合物16(28mg),20(85mg),洗脱收集到的第31份(Fr.31)再经过SephadexLH-20(甲醇洗脱)得到化合物17(14mg)。第34份经过SephadexLH-20(甲醇洗脱)得到化合物18(11mg),第35份以氯仿-甲醇-水(120:20:1)洗脱得到化合物19(120mg),26(13mg)。3结构鉴定化合物1白色粉末,易溶于氯仿,难溶于甲醇,mp85~90°C。EI-MSm/z297,157

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