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时间:2018-10-21
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1、增生性玻璃体视网膜病变组织中的单核细胞趋化因子 摘要:目的增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是多种细胞和细胞因子参与的一种眼内创伤修复反应.单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对巨噬细胞和淋巴细胞有特异趋化作用.本研究目的在于了解视网膜脱离后不同时期的组织中MCP-1的表达与巨噬细胞和淋巴细胞的关系.方法选用视网膜手术取材标本,包括孔源性视网膜脱离的视网膜下液中的细胞成份,B级PVR玻璃体手术集取物以及PVRC/D的视网膜增殖膜,免疫组化法检测其中MCP-1,CD68和CD3表达状态.结果视网膜下液中细胞成份MCP-1的表达均为阴性或弱
2、阳性,B级PVR手术集取物以及增殖膜中,MCP-1表达阳性程度随PVR等级的升高而逐渐增高.CD68阳性细胞(巨噬细胞)与CD3阳性细胞(T-淋巴细胞)的比例随PVR病变程度的增加而降低.结论MCP-1对视网膜脱离后的愈合过程和PVR增殖膜的形成有调节作用. Keyonocytechemoatlractantprotein-1;macrophages;t-lymphocytes;immunohistochemistry Abstract:AIMToinvestigatetherelationshipbetacrophagesand
3、T-lymphocytesinspecimensobtainedfromretinaldetachmentandPVReyes. METHODSSpecimensatogenousretinaldetachment(RD),fluidscollectionsduringvitrectomyforPVRgradeB,andepiretinalmem-branesfromPVRgradeCorD.Immunohistochemicaldetec-tionedtoexaminethedistributionofMCP-1,andthepr
4、esenceofCD68orCD3positivecellsinthesespeci┐mens.RESULTSTheexpressionofMCP-1RD.AsafunctionoftheincreaseofPVRgrade,MCP-1expressionbecamestrongeraymodulatetheentandtheformationofepiretinalmem-branesinPVR. 0引言 增生性玻璃体视网膜病变(proliferativevitreo-retinopathy,PVR)属于眼内组织创伤愈合的一种特
5、殊表现,与体内其它组织的损伤修复过程一样,可以分为炎症期、细胞增生期和瘢痕期三个阶段,研究表明在PVR的整个自然病程中,是一个以巨噬细胞和淋巴细胞等炎症细胞侵润为主的慢性炎症反应[1,2].以往PVR病理证实,在PVR的视网膜前膜中有视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞样细胞、巨噬细胞样细胞、巨噬细胞和淋巴细胞等多种细胞成分[3].同时在病变的组织中还发现各种细胞因子的存在,包括:TNF-α,IL-1α,血小板源性生长因子(PDGF)转化生长因子-α(TGF-α)[4
6、]等.单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是一种对巨噬细胞和淋巴细胞具有特异性趋化作用的趋化因子[5],眼内的RPE细胞和胶质细胞在某些炎性因子的刺激下可以合成MCP-1[6],而且在PVR的前膜组织中存在这种因子[7].我们观察MCP-1在不同时期PVR组织中的存在与巨噬细胞和淋巴细胞出现的关系,以进一步探讨PVR发病过程中MCP-1和炎症细胞的相互作用. 1材料和方法 1.1材料 标本于1997-09/2000-03在西京医院眼科住院的视网膜脱离患者56名.其中12例为无明显诱因的裂孔源性视网膜脱离行电凝环扎和放液术时所取的视
7、网膜下液,经离心(1500r・min-1,5min),取沉淀物制作细胞涂片,40g・L-1多聚甲醛固定30min,4℃,干燥后待用. 44例PVR患者在行玻璃体切割术时取材,PVR分级标准参照1983年美国视网膜学会分级方法.其中20例PVRB级取玻璃体切割液集取物,同样经离心沉淀后取沉淀物;24例PVRC级以上患眼行玻璃体切割术时取视网膜表面增殖膜标本,其中下膜14例,前膜10例.以上组织用40g・L-1多聚甲醛固定30min,4℃.经脱水、透明和浸蜡,制成腊块.最后制成5μm厚的切片,贴
8、附于用多聚赖氨酸涂片的玻片上.CD3为泛T淋巴细胞标记物,而CD68为巨噬细胞标记物,抗CD3和CD68抗体(小鼠,中国博士德公司),抗人MCP-1抗体(小鼠,美国PharMingen公司),免疫组化试剂盒(中国博士德公
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