增生性玻璃体视网膜病变组织中的t淋巴细胞与hla┐dr抗原

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1、增生性玻璃体视网膜病变组织中的T淋巴细胞与HLA┐DR抗原　　摘要:目的研究免疫介导过程在增生性玻璃体视网膜病变（PVR）发生中的作用.方法应用特异性单克隆抗体和免疫组织化学染色的方法对视网膜玻璃体手术取材标本，包括PVRB级玻璃体手术集取物以及PVRC，D级增生膜进行观察，检测其中CD3，CD4，CD8和HLA-DR的表达情况.结果7例PVRB级的标本中，6例（85.7%）有CD3阳性表达细胞，其中2例（28.5%）同时有CD4阳性细胞，未发现CD8阳性细胞，2例（28.5%）有HLA-DR阳性表达细胞存在.14例PVRC级以上的

2、增生膜标本中，CD3均为阳性表达，10例（71.4%）有CD4阳性表达细胞，5例（35.7%）有CD8阳性表达，9例（64.3%）有HLA-DR阳性表达.结论PVR病变组织及增生膜有T淋巴细胞的存在，提示有T细胞参与PVR的病变过程，及自身免疫反应的可能.　　Keyphocytes;HLA-DRantigens;immunohistochemicalstain-ings　　Abstract:AIMToinvestigateinflammatoryandimmune-mediatedprocessescontributingtothe

3、pathogenesisofprolif-erativevitreoretinopathy（PVR）.METHODSSpecimensy，includingfluidcollectionsofPVRgradeB，andperi-retinalmembranesfromPVRgradeCorD.ImmunohistochemicalstainingedtoexaminethepresenceofCD3，CD4，orCD8markersand（humanleukoiyteantigen，HLA）HLA-DRpositivecellsin

4、thesespecimens.RESULTSCD3positivecellsensofPVRBgrade，andCD4positivecellsens.CD8markersex-pressionens.PositivestainingforHLA-DRens.In14PVRC，Dmem-branes，lymphocytesexpressingCD3markersphocytesexpressingCD4andCD8markersembranes，respectively.Posi-tivestainingforHLA-DRembra

5、nes.CONCLUSIONFindingsindicatethatTlymphocytesarepresentinPVRmembranesandmaybeactivated.ThesecellsmayplayapotentialroleinthedevelopmentofPVR.　　0引言　　增生性玻璃体视网膜病变（proliferativevitreo-retinopathy，PVR）是裂孔源性视网膜脱离手术失败的主要原因.PVR属于眼内发生的过度损伤修复过程，经历炎症期、增生期和瘢痕期三个阶段，是一个以巨噬细胞和淋巴细胞等炎症

6、细胞浸润为主的慢性炎症反应［1，2］.巨噬细胞诱发的PVR模型对巨噬细胞在PVR中的作用进行了较好阐明［3］，但GabrilianK等证实了在PVR的病理过程中其它类型白细胞有不可替代的作用［4］.本实验利用免疫组化技术，观察不同时期PVR病变组织中T细胞表面标记物CD3，CD4，CD8以及人白细胞抗原HLA-DR的表达情况，以进一步探讨PVR的发病机制.　　1材料和方法　　1.1材料　　标本于1997-09/2000-03在西京医院眼科住院的孔源性视网膜脱离伴PVR患者21名.患者无先前存在的眼内炎症性疾病.PVR分级标准参照19

7、83年美国视网膜学会分级方法.其中7例PVRB级取玻璃体切割液集取物，离心沉淀后取沉淀物;14例PVRC级以上患眼行玻璃体切割术时取视网膜表面增生膜标本，其中下膜5例，前膜9例.以上组织用40g・L-1多聚甲醛固定30min，4℃.经脱水、透明和浸蜡，制成蜡块.最后制成5μm厚的切片，贴附于载玻片上.　　1.2方法　　①抗体和试剂:小鼠抗人CD3，CD4，CD8和HLA-DR单克隆抗体，ABC免疫组化试剂盒均购自中国博士德公司;②免疫组织化学染色:切片浸入7.5mL・L-1H2O2-PBS，37℃30mi

8、n，以阻断内源性过氧化物酶.羊血清（1∶200）封闭消除非特异性染色.滴加小鼠特异性抗体CD3（1∶100），CD4（1∶200）CD8（1∶100），HLA-DR（1∶100）.湿盒，37℃孵育30min.PBS振洗3次，滴加生物素