实验出凝血检查

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1、实验出凝血检查上海交通大学医学院余文红（一）血标本的采取应注意的问题1.PT、APTT凝血实验检查均使用静脉血。采血人员应技术熟练，以防止组织损伤，外源性凝血因子进入针管。2．一般血液采集，进入容器至进行实验所用的时间越短，所分析的凝血因子被保护得越好。从输液三通管取出血的做法不可取。3．取血时病人应松驰，环境温暖，防止静脉挛缩，止血带的压力要尽可能小，取血时，拉针栓的速度要慢而均匀，使血液平稳地进入注射器，防止气泡的产生。4．一旦取样完毕，立即与抗凝剂充分混合，一般提倡使用真空采血管。5．用硅化玻璃或塑料注射器采血。考虑结果的精确性，应将试管刻度的可能误差控制在

2、既定体积的10%以内。6.采血后标本在低温保存且在一定时间范围内。7.国际血液学标准化委员会（ICSH）、国际血栓与止血委员会（ICTH）推荐使用3.2g/dl（含2H2O）或0.109mol/L的枸橼酸钠作为凝血因子检查的抗凝剂。8.抗凝剂在血标本的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度，进而影响试验结果，因此应根据患者红细胞比例（Hct）状况随时调整抗凝剂用量。（二）应用试剂应注意的问题1.组织凝血活酶工作制剂的国际敏感指数（ISI），为了使不同敏感性的组织凝血活酶在检测PT中能得到同样的结果，必须要制定一个共同的敏感性指标。2.凝血活酶和部分活化凝血活酶的使用步骤必

3、须严格按照说明书进行。通常在使用前必须充分混匀试剂，以使微粒重新均匀悬浮于液体中。3.试剂准备过程中应该使用去离子水。4.正常对照血浆通常将多份健康人血标本混在一起，以弥补个体误差。（三）使用实验器材应注意的问题1.玻璃器皿的要求：贮存和测试时应选用干净、没有划痕的试管。2.温度的要求：人工测定终点法要求水浴箱的温度必须保持在（37±1）℃，并且周围照明设备要好，便于读取终点。（四）实验操作应注意的问题1.许多试验误差都来源于技术的错误。在实验技术、试剂、温度及pH值上很微小的变化都会导致试验结果明显的变化。2.手工法PT或试管法CT检查时，倾斜试管动作一定要轻，角

4、度要小，以减少血液与管壁的接触面积。3.血液凝固主要是酶催化的反应，所以实验过程中要严格控制理想的pH环境和溶液的离子强度。4.试验结果准确还取决于所用的反应物的量、加入顺序和不同反应物的孵育时间。5.APTT、PT需乏血小板血浆。6.试验前检查血浆是否有溶血、黄疸、脂血和出现凝块。7.报告方式：以PT的秒（s）数报告。以患者PT（s）/正常对照（s）的比（PTR）报告。在口服药物治疗监控时以INR报告。ICSH规定，不再用百分比（活动度）报告。APTT以秒报告。1987年WHO提出PT值用INR（internationalnormalizedratio国际标准化比

5、值）作为PT结果报告形式，并用以作为抗凝治疗监护的指标。INR=［病人PT（s）/正常人平均PT（s）］ISIPTR=受检者PT（s）/正常对照PT（s）INR=PTRISIISI：国际敏感指数（internationalsensitivityindex）1～1.9CT、PT、APTT、RT、Fg、TT凝血时间测定CT目的：掌握玻璃试管法凝血时间测定的方法原理：离体静脉血与玻璃表面接触后，血中XII因子活化并启动内源性凝血途径，最终生成纤维蛋白而使血液凝固所需的时间。器材：6mm直径玻璃试管3支静脉采血器材37℃恒温浴箱秒表步骤：3支试管各1ml血，每隔0.5min

6、倾斜，第一管计时后，立即观察第二、三管并计时，直至血液凝固。结果判断：从血液刚进入注射器至第3管凝固所需时间即为凝血时间。正常参考值：4～12分钟报告方式：CTX.Xmin（玻璃试管法）注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”且血液中不含泡沫。温度恒定为37℃，倾斜试管角度应在30°左右。评价：凝血时间曾用玻片法测定，但由于毛细血管采血，易混入组织液而使凝血时间正常，属于淘汰方法。延长：严重内源性凝血途径凝血因子有缺陷；血中抗凝物质增多；肝素治疗缩短：高凝状态（DIC早期）凝血酶原时间PT原理：在乏血小板血浆中加入组织因子和钙离子（钙凝血活酶）后，血浆发生凝固的

7、时间即为凝血酶原时间（PT）。步骤：取空腹静脉血1.8ml加入含有0.2ml109mmol/L枸橼酸钠的试管中混匀备用。抗凝血以3000r/min离心10min分离血浆将试剂、正常人混合血浆、待测血浆与37℃预热5min。血浆0.1ml加入混匀的试剂0.2ml，开动秒表计时。正常参考值：PT：11～13秒PTR：1±0.15INR：0.8～1.5报告方式：PT：X.Xs，正常人血浆X.XsPTR：X.XINR：X.X注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”，抗凝剂与血液比例（1：9）应准确。取血后4h内完成测定。钙凝血活酶必须标有国际敏感指数（ISI），IS