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时间:2018-10-20
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1、高效液相色谱法测定圣地红景天中红景天苷的的含量李娜赵斌余娅芳兰泽伦【关键词】高效液相色谱;,,圣地红景天;,,红景天苷 摘要:目的测定各地红景天药材中红景天苷的含量,建立各地红景天药材的含量测定方法。方法用HPLC法测定红景天苷的含量。结果测定了3批各地红景天药材中红景天苷的含量,建立了红景天苷的含量测定方法。结论该方法简便,重现性好,专属性强,可作为各地红景天药材的质量控制标准。 关键词:高效液相色谱;圣地红景天;红景天苷 圣地红景天,又名全瓣红景天,圣景天,藏名称扫罗玛尔布;为景天科植物圣地红景天Rhodiolasacra(PrainexHamet)S.H.
2、Fu的干燥根及根茎〔1〕。主产于西藏的拉萨、山南、林芝、日喀则及云南西北部、迪庆州。本品性寒、味甘、苦、涩。归肺、心经。具有活血,清肺,止咳解热止痛之功效。用于腊度(高山反应),恶心,呕吐,嘴唇和手心等发紫,全身无力,胸闷,难于透气,身体虚弱等症。红景天苷是圣地红景天的主要有效成分之一,本文建立了HPLC法测定红景天苷含量的方法,该方法简单可靠,准确度高,专属性强,重现性好,可用于圣地红景天药材及其制剂质量控制。 1仪器与试药 LC-10AT/SPD-10A高效液相色谱仪,N2000色谱工作站;KQ250B超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司);万分之一电子天平(
3、SartoriusBP121S);乙腈为色谱纯(Merck公司),水为重蒸水(西南物理研究所),其余试剂均为分析纯。红景天苷对照品为中国药品生物制品检定所提供(批号110738-200108,供含量测定用)。圣地红景天药材产地西藏,由成都中医药大学鉴定教研室严铸云副教授鉴别,为景天科植物圣地红景天Rhodiolasacra(PrainexHamet)S.H.Fu的干燥根及根茎。 2方法与结果 2.1测定波长的选择取上述对照品溶液,在200~400nm波长范围扫描。红景天苷对照品溶液在210nm和275nm处有最大吸收,但210nm靠近未端吸收,因此,选择275nm
4、作为含量测定的检测波长。 2.2色谱条件色谱柱:DiamonsilC18(5μm,250×0.46mm);流动相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(12∶88);检测波长:275nm;流速:1.0ml/min;柱温:30℃;理论板数按红景天苷峰计算,应不低于2000。在该色谱条件下,红景天苷的保留时间在分钟,对照品色谱图及药材色谱图见图1~2。 图1红景天苷对照品色谱(略) 图2圣地红景天药材色谱(略) 2.3线性关系的考察精密吸取对照品溶液(0.2202mg/ml)2,5,10,15,20μl注入液相色谱仪,测定。以进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐
5、标作图,绘制标准曲线,得回归方程为:Y=199582X-9362.1(r=0.9997)。在0.4404~4.4040μg范围内,红景天苷进样量与峰面积有良好的线性关系。 2.4精密度实验精密吸取红景天苷对照品溶液10μl,分别连续进样6次,测定峰面积,其RSD=0.78%,精密度良好。 2.5重复性试验取本品粉末(过三号筛)6份,每份约2g,精密称定,按下法“置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,称定重量,超声处理(功率250g/g,RSD%=1.54%。结果表明,本方法重现性良好。 2.6加样回收率实验取已知含量(4.21mg/g)的药材粉末(过三号筛)6份
6、,每份约1g,精密称定,分别置具塞锥形瓶中,各精密加入红景天苷对照品溶液(4.19mg/ml)各1.0ml,加甲醇至25ml,同2.5重复性试验项下制备加样回收供试品溶液,测定,计算回收率。结果见表1。 表1红景天苷加样回收率试验(略) 加样回收率结果表明,本方法准确性高。 2.7样品测定在试验中对3批药材进行了含量测定。结果见表2。 表2圣地红景天药材中红景天苷含量测定结果(略) 根据测定的结果,暂定圣地红景天药材含红景天苷含量不得低于0.2%。在以后的试验研究中继续积累含量测定数据,再确定其含量限度。 3讨论 3.1圣地红景天是最近几十年被重视的东方
7、民间草药。据《本草纲目》记载,红景天为草本上品,主要功能扶正固本、补气养血、清热润肺。全世界有90多种,我国就有70种,尤以生长西藏的圣地红景天为上品〔1〕。红景天是继人参,刺五加之后又发现的一种具有扶正固本、延年益寿的新兴环境适应药物。药理作用表明,红景浸膏和红景天苷有明显的中枢抑制作用、抗疲劳作用,强心作用、抗炎作用、降血糖作用和抗微波辐射作用〔2〕。目前尚未见圣地红景天中红景天苷含量测定的报道,本文采用HPLC法测定红景天苷含量,方法简单可靠,准确度高,专属性强,重现性好,可用于圣地红景天药材及其制剂质量控制。 3.2本实验对流动相进行了考察
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