银屑病皮损中tig1 mrna表达及其与异常分化的关系

《银屑病皮损中tig1 mrna表达及其与异常分化的关系》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、银屑病皮损中TIG1mRNA表达及其与异常分化的关系【关键词】银屑病tazarotene诱导基因1tazarotene　　ABSTRACT:ObjectiveTodetectalterationofantioncogeneTIG1mRNAinordertorevealthemechanismofTIG1inpsoriasisvulgaris.MethodsExpressionofTIG1mRNAinnormaltissues,uninvolvedskintissuesandpsoriaticlesionsRNAalepidermi

2、s.Inuninvolvedtissuesandthemarginalpartofpsoriaticlesions,TIG1expressioncouldbeobservedinthesuprabasallayersofepidermis,andtherearginalpartofpsoriasisanduninvolvedtissuesparedalskin(P<0.01).TIG1expressionalskinandtheuninvolvedtissues(P<0.01).ConclusionTIG1maymain

3、tainthenormaldifferentiationofepidermalkeratinocytesandmaybeassociatedaldifferentiationofpsoriatickeratinocytes.　　KEY)，正常组织仍用无菌包切开取皮肤组织，100mL/L福尔马林(DEPC配制)固定标本，石蜡包埋组织，切片脱蜡水化后用30mL/L双氧水(DEPC配制)孵育10min，DEPC水洗6min；蛋白酶K37℃消化30min，以去除阻碍探针结合的表面蛋白；PBS和DEPC各水洗6min；每片加预杂交液20μL，

4、42℃孵育2h；其后加入浓度为13pmol/L的寡核苷酸探针20μL，42℃杂交22h；2×SSC和1×SSC液各洗15min，羊血清封闭液37℃封闭30min，生物素化的鼠抗地高辛37℃孵育30min，辣根过氧化物酶标记的链霉素复合物37℃孵育30min，DAB染色，苏木素复染。阴性对照用预杂交液(寡核苷酸不加入探针)代替杂交液。阳性判断标准：角质形成细胞中有棕黄色颗粒沉着，阴性无此沉着。　　1.4统计学处理应用卡方检验和精确概率法进行统计学分析(SPSS13.0)，以P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1原位

5、杂交检测TIG1mRNA在各组织中的表达结果正常组中TIG1的棕黄染色位于正常表皮全层(图1A)；在银屑病组未受累皮肤组织中，其阳性主要表达于基底上层，部分区域基底层着色(图1B)，在边缘皮损中，TIG1表达于棘层上部，在棘层下部及基底层中无表达(图1C)，而在中间皮损中无表达(图1D)。　　图1原位杂交检测TIG1mRNA在各皮肤组织中的表达（略）　　Fig.1ExpressionofTIG1mRNAindifferentskintissuesbyinsituhybridization　　A:Normalskin:thereis(

6、×200);B:Uninvolvedskintissues:brois(×400);C:Themarginalpartofpsoriatictissues:TIG1expressioncouldbeobservedintheupperormiddlelayersofstratumspinosum(×200);D:Thecentralpartofpsoriatictissues:thereRNA在各组皮肤组织表皮基底层内的表达比较TIG1在正常组皮肤基底层中的表达高于其在银屑病组未受累组织和边缘皮损基底层中的表达：TIG1在正常组皮肤

7、基底层中的阳性率为12/18(66.7%)，而在银屑病组未受累组织和边缘皮损中表达分别为4/28(14.3%)，2/28(7.1%)，前者与后两者差异有统计学意义(χ2=13.3,χ2=18.3,P<0.01)。　　2.3TIG1mRNA在各组皮肤的表达比较TIG1在正常组皮肤和在银屑病组未受累皮肤中的表达高于其在银屑病中间皮损中的表达：TIG1在正常组皮肤和银屑病组未受累皮肤中的阳性率分别为12/18(66.7%)，而在银屑病组中间皮损中的表达为1/28(3.6%)，前者与后者差异有统计学意义(χ2=21.5,P<0.

8、01)。　　作为一种抑癌基因，TIG1的启动基因可以超甲基化，且TIG1基因表达与启动子超甲基化状态有关，当用5AzadCyd处理后，TIG1的表达可恢复[10]。这些均说明，启动子超甲基化状态抑制了TIG1的基因表达，而TIG1基