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《成纤维细胞生长因子10 mrna在寻常型银屑病皮损中的表达》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、成纤维细胞生长因子10mRNA在寻常型银屑病皮损中的表达【关键词】银屑病;,成纤维细胞生长因子10,;,原位杂交 ExpressionoffibroblastgroRNAinepidermallesionsofpsoriasisvulgaris 【Abstract】AIM:TostudythemRNAexpressionoffibroblastgroRNAinnormalepidermaltissuesfrom22normalvolunteersundergoingcosmeticsurgery,uninvolve
2、dandpsoriaticlesionsfrom22patientsbyinsituhybridization.RESULTS:TheexpressionofFGF10mRNAinepidermisspecimensalepidermisisis,anda(95%),alepidermisainlyatthebasalcelllayer(5%).Positivestaininginuninvolvedepidermisis(82%).paredalepidermis,thepositiverateandthemeane
3、xpressionlevelofFGF10mRNAinepidermisofpsoriasisvulgarisalepidermaltissues(P<0.05).CONCLUSION:ThehigherleverofFGF10mRNAintheepidermisofpatientsayplayanimportantroleintheearlypathogenesisofpsoriasisvulgaris. 【KeyRNA在寻常型银屑病皮损中的表达,探讨其在银屑病发病中的作用机制.方法:应用原位杂交法检测FGF
4、10mRNA在22例正常皮肤组织、银屑病皮损和未受累皮肤中的表达和分布.结果:原位杂交法检测发现,在22例正常皮肤组织、银屑病皮损和未受累皮肤表皮的全层或表皮中下层可见FGF10mRNA表达(95%);在正常皮肤表皮的基底层或少量细胞内可见FGF10mRNA的表达(5%);在寻常型银屑病非皮损表皮的中下层或个别细胞内可见FGF10mRNA的表达(82%).寻常型银屑病皮损表皮中FGF10mRNA的表达明显高于正常对照组(P<0.05).结论:FGF10mRNA在银屑病发病早期阶段的表达增高可能与银屑病的早期发病有
5、关. 【关键词】银屑病;成纤维细胞生长因子10;原位杂交 0引言 银屑病组织病理学的特征性表现为角质形成细胞异常增殖、真皮浅层淋巴细胞浸润、真皮乳头毛细血管迂曲扩张.研究表明,在一些生长因子的作用下,角质形成细胞可表现为异常增殖和分化异常,如表皮生长因子、转化生长因子α和成纤维细胞生长因子等,其中成纤维细胞生长因子10(FibroblastgroRNA在正常皮肤和银屑病皮损中的表达,以进一步探讨FGF10在银屑病发病机制中的可能作用. 1对象和方法 1.1对象选取我科门诊或者住院患者中临床皮疹典型并经病理证实
6、的寻常型进行期银屑病皮损22例为实验组,同时取距该皮损约1cm处非皮损区皮肤组织22例,其中男9例,年龄21~48(29.3±11.4)岁;女13例,年龄17~44(30.7±7.3)岁.病史1mon~33a.以上病例均在1mo内未接受系统和局部的药物治疗,无其他皮肤病及系统性疾病.取材部位为躯干及下肢的皮损区.另取22例在我院同期美容手术切除的正常皮肤作为对照组.两组间性别、年龄等比较,差异无显著性意义(P>0.05),具有可比性. 1.2方法 1.2.1FGF10原位杂交定位原位杂交试剂盒购自武汉博士得生
7、物公司.所有标本均经40g/L多聚甲醛固定,载、盖玻片均采用多聚赖氨酸处理.为防止RNA酶对mRNA的降解作用,试剂的配制均使用焦磷酸二乙酯(sodiumacidpyrophophate,DEPC).简要步骤:活检组织固定包埋,切片脱蜡水化后用3mL/L双氧水孵育10min,DEPC水洗6min,胃蛋白酶K消化30min,以去除阻碍探针结合的表面蛋白,PBS和DEPC各水洗6min;每片加预杂交液20μL,42℃孵育2h,0.1pmol/L寡核苷酸探针(探针序列:3′端地高辛标记,合成5OD,5′TTCTACTGATG
8、TTATCTCCAGGATGCTGTA3′),42℃杂交22h,2×SSC和1×SSC液各洗15min,羊血清封闭液37℃孵育30min,生物素化抗地高辛抗体37℃孵育1h,辣根过氧化物酶标记的链霉素复合物37℃孵育30min,二氨基联苯胺染色,核固红复染.阴性对照用PBS代替杂交液;替代对照用无探针杂交液代替杂交液;阳性对照为已