木黄酮对小鼠胰岛β细胞膜电位的影响

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1、木黄酮对小鼠胰岛β细胞膜电位的影响:赵玉峰,朱运龙,胡玉珍,周京军,钟延清【染料木黄酮  Effectofgenisteinonmembranepotentialsofmousepancreaticβcellsinvitro  【AbstractAIM:Todeterminetheeffectoflongterminactivationofproteintyrosinekinasesonpancreaticβcells.METHODS:Primarilyculturedmousepancreaticβcellsmol%26#

2、12539;L-1genisteinfor12hours.Themembranepotentialsofβcellsptechniquesode.RESULTS:Genisteintreatmentsignificantlydecreasedtherestingmembranepotentialsofβcellsundertheconditionofboth2mmol%26#12539;L-1glucoseand0.2mmol%26#12539;L-1diazoxide,theopenerofKATPchannels.Aft

3、erstimulatedby15mmol%26#12539;L-1glucose,normalβcellsdepolarizedouseβcellstreatedbygenisteinhadsignificantincreaseinlatentperiodsbeforedepolarization,significantattenuationofactionpotentials,andsignificantelevationinmembranepotentialsatintervalofactionpotentials.CO

4、NCLUSION:Longtermtreatmentpairstheresponsesofpancreaticβcellstoglucose,anditisindicatedthatdecreaseintyrosinekinasesactivitycausesthedysfunctionofpancreaticβcells.  【Keyembranepotentials  【目的:观察长期降低蛋白酪氨酸激酶活性对胰岛β细胞的影响.方法:原代培养的小鼠胰岛β细胞被0.1mmol%26#12539;L-1木黄酮(蛋白酪氨酸激酶抑

5、制剂)处理12h.采用穿孔式全细胞记录方法记录胰岛β细胞膜电位的变化.结果:在2mmol%26#12539;L-1葡萄糖条件下以及0.2mmol%26#12539;L-1二氮嗪(KATP通道开放剂)的功能下,木黄酮处理组细胞的静息电位均较对照组明显升高.在15mmol%26#12539;L-1葡萄糖的刺激下,小鼠正常胰岛β细胞经短暂的潜伏期后发生往极化,爆发动作电位,而木黄酮处理组细胞的往极化潜伏期明显延长,动作电位幅度明显减弱,动作电位间期的膜电位明显抬高.结论:木黄酮长期处理可损害小鼠胰岛β细胞对葡萄糖的反应,提示蛋白酪

6、氨酸激酶活性降低可能是胰岛β细胞功能障碍的重要原因.  【染料木黄酮;胰岛β细胞;膜电位  0引言  葡萄糖引发胰岛素分泌的过程是:在胰岛β细胞,葡萄糖代谢产生的ATP封闭ATP敏感性钾通道(KATP通道),引起细胞往极化,进而激活电压依靠性钙通道,引起Ca2+内流.胞内Ca2+浓度升高激发胰岛素分泌[1].目前已知蛋白酪氨酸激酶在维持胰岛β细胞正常功能中具有重要功能[2].蛋白酪氨酸激酶抑制剂木黄酮急性处理胰岛β细胞可引起细胞电活动和胰岛素分泌的改变[3].但是,长期降低胰岛β细胞中蛋白酪氨酸激酶活性对葡萄糖引起的胰岛β细

7、胞电活动的影响尚不清楚.我们用蛋白酪氨酸激酶抑制剂木黄酮预处理原代培养的小鼠胰岛β细胞12h后,记录了小鼠胰岛β细胞在静息状态下以及受葡萄糖刺激后其膜电位的变化.  1材料和方法  1.1材料雄性C57BL/6J小鼠10只,年龄10~12a公司.  1.2方法  1.2.1小鼠胰岛β细胞原代培养C57BL/6J小鼠被脱臼正法.沿胆总管注射Ⅴ型胶原酶液进胰腺.分离胰腺,37℃消化15min.振摇分散胰腺组织,用密度梯度离心法收集胰岛.胰岛用蛋白酶消化分散为单个细胞[4].胰岛细胞种植于35mm塑料培养皿中,培养在RPMI164

8、0培养液中.液中加进终浓度为100mL%26#12539;L-1的胎牛血清,1×105U%26#12539;L-1的青霉素和1×105U%26#12539;L-1的链霉素.细胞随机分为两大组,一组为处理组,用0.1mmol%26#12539;L-1木黄酮处理12h,一组为对照组.在实验记录

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