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1、发酵纳豆中加入中药后对纳豆激酶活力的影响纳豆芽孢杆菌(Bacillusnatto)是从日本的传统发酵食品纳豆中发现并分离出来的,属细菌科芽孢杆菌属,其原始菌株与枯草芽孢杆菌相同,是枯草芽孢杆菌的一个亚种[1]。纳豆激酶(Nattokinase,NK;也称SubtilisinNAT,SubtilisinBSP)是由纳豆菌(Bacillussubtilisvar.natto)产生的一种具有强烈溶栓功能的蛋白酶。该酶是由日本学者于1987年首次在日本传统食品纳豆中提取出来并命名的[2]。10余年来,研究者们对纳豆激酶的理化特性、作用机制及生产工艺等
2、方面进行了较为详尽的研究。实验研究证实该酶不仅易于提取纯化,成本低廉,溶栓效果好,作用迅速,药效时间长,而且安全性好,无任何毒副作用[3,4],较目前已开发研制的一些溶栓药物如尿激酶(Urokinase,UK)、链激酶(Streptokinase,SK)、组织型纤溶酶原激活剂(tissue-typeplasminogenactivator,t-PA)等具有独特的优越性,有望成为一种新型溶栓药物。目前,国内尚未见纳豆芽孢杆菌发酵中加入中药后对提高纳豆激酶活性影响的报道。1材料与方法1.1材料1.1.1菌株枯草芽孢杆菌由本院提供;大豆购自北大荒粮
3、油公司,为非转基因大豆(直径≤5mm)。1.1.2中药苦参、板蓝根、漏芦、红花均由本院中药房提供。1.1.3试剂尿激酶1000U/支(哈高科白天鹅药业集团公司产品)、纤维蛋白原100mg/支(Sigma,每毫克含75%可凝固蛋白)、琼脂糖(上海东海制药厂)、凝血酶(1000U/支)、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠。1.2方法1.2.1原材料的处理将中药切片,去除杂质,清水浸泡使含水量在55%~60%。将大豆浸泡8h,沥干水,备用。1.2.2液体菌种的制备将斜面种转接入灭菌后的PDA液体培养基内摇床培养(转速为140转/min)24h。1.2.
4、3发酵基质的制备将浸泡好的中药分别称取50g装入聚乙烯袋中,然后称取50g浸泡过的大豆分别装入中药袋内,摇匀。另设对照组100g大豆,高压121℃灭菌40min,备用。[摘要]目的:通过对纳豆发酵中加入中药苦参、板蓝根、漏芦、红花后纳豆激酶活力的改变进行研究,从而筛选出能够提高纳豆激酶活力的中药,同时也将中药之药性融入其中,以便更好地提高纳豆之医疗、保健功能。方法:本实验采用纤维蛋白-琼脂糖平板法测定发酵后产物中纳豆激酶的活力大小。结果:苦参、板蓝根可提高纳豆激酶活性,漏芦可降低纳豆激酶活性,红花可抑制枯草芽孢杆菌的生长使之没有活性。结论:发
5、酵纳豆中加入中药后对纳豆激酶的活力有不同程度的影响。[关键词]纳豆芽孢杆菌;纤维蛋白-琼脂糖平板法;纳豆激酶;中药[中图分类号]R932[文献标识码]A[文章编号]1673-7210(2008)03(c)-036-02TheexperimentalstudyoftheinfluenceofthefermentednattoaddedintotraditionalChinesemedicineontheactivityofnattokinase(NK)JIAOXiao-li,SUNYan-ping*(HeilongjiangAcademyofT
6、raditionalChineseMedicine,Harbin150036,China)[Abstract]Objective:TostudytheinfluenceofthefermentednattoaddedintotraditionalChinesemedicine-Radixsophoraeflavescentis,Radixisatidisseubaphicacanthi,RadixrhaponticiseuRadixechinopsisandFlosCarthamiontheactivityofnattokinase(NK),
7、thenthetraditionalChinesemedicinethatcanimprovetheactivityofnattokinase(NK)isscreenedanditspropertyisincorporatedinnattokinase(NK),sothefunctionofthemedicaltreatmentandhealthcareofthenattoareimprovedbetter.Methods:TheactivityofNattokinase(NK)wasdetectedthroughfibrin-agarose
8、plateprocessintheexperiment.Results:TheresultsshowedthattheactivityofNattokinase(N
