急性单核细胞性白血病时 白血病性原始单核细胞呈阴性反应课件

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1、细胞化学染色概念细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门科学,它以细胞形态学为基础,结合运用化学反应原理对细胞内的各种化学物质(包括酯类、酶、糖、蛋白质、核酸)做定位、定量、半定量分析的方法。临床应用1辅助判断急性白血病类型:不同细胞系列含化学成分、分布、含量不同,且随细胞成熟化学成分和含量等发生相应的变化,据细胞化学染色结果不同可推断细胞系列2辅助血液病的诊断及鉴别诊断:血细胞在病理情况下其化学成分及含量会发生改变,可以辅助疾病诊断细胞化学染色一、过氧化物酶染色二、糖原染色三、碱性磷酸酶染色四、铁染色

2、五、非特异性脂酶染色概述一、过氧化物酶染色一、原理血细胞内的过氧化物酶(Peroxidase,Pox)分解H2O2,释出初生态氧,使无色联苯胺氧化成蓝色联苯胺后者进一步变成棕黑色化合物,沉着于胞质内。POXH2O2(过氧化氢)H2O+[O]-2H无色联苯胺蓝色联苯胺棕黑色联苯胺二、染色反应一、粒细胞系统原始粒细胞大多呈阴性反应,有的可出现少量蓝黑色颗粒,自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均呈阳性反应,随细胞的成熟,阳性反应的程度逐渐增强。中性分叶核粒细胞均呈阳性反应。嗜酸性粒细胞阳性反应的程度最强,其阳性颗粒比中

3、性粒细胞粗大,有折光性,嗜硷性粒细胞呈阴性反应。二、单核细胞系统原始单核细胞呈阴性反应,幼单及单核细胞呈弱阳性反应,阳性颗粒少而细小呈弥散分布,有的可呈阴性反应三、其他细胞淋巴细胞、巨核细胞、血小板、幼红细胞、浆细胞、组织细胞均呈阴性反应。过氧化物酶三、临床意义(1)、帮助鉴别急性白血病的类型急性粒细胞性白血病时,白血病性原始粒细胞可呈阳性反应,阳性颗粒一般较多粗大常是局限分布;急性淋巴细胞性白血病时,原始和幼稚淋巴细胞均呈阴性反应,急性单核细胞性白血病时,白血病性原始单核细胞呈阴性反应,有时虽少数呈阳性反

4、应,但阳性颗粒少而细小,常弥散分布小型原始粒细胞和原始淋巴细胞不易区别,如果小型原始细胞呈过氧化物酶阳性反应,可确定为小型原始粒细胞白血病。(2)急性早幼粒细胞白血病与急性单核细胞白血病鉴别,如果白血病细胞呈过氧化物酶强阳性。可确定为早幼粒细胞白血病。(3)急性单核细胞白血病有时须与组织细胞白血病鉴别,前者为弱阴性,后者阴性反应。二、成熟中性粒细胞过氧化物酶活性的变化1、活性增高:可见于再生障碍性贫血、感染、急淋、慢淋。2、活性减低:可见于急粒、慢粒、急单、MDS,及退化中性粒细胞二、糖原染色一、染色原理过

5、碘酸是氧化剂,使含乙二醇(CHOH-CHOH)的多糖类物质氧化,形成双醛基,醛基与雪夫试剂中的无色品红结合,形成紫红色化合物,附着于含有多糖类的胞浆内。红色的深浅与细胞内能反应的乙二醇基的量成正比。反应分两步进行一、醛基的生成CH2OHCH2OHHCOO-HCCO-COHHC+HIO4CHHC-OCCH-OCCHHOHOO二、二分子醛基与一分子无色品红(雪夫试剂)结合形成新的紫红色化合物。盐酸SO3HH2NC==H2N+偏重亚H2NCNH2硫酸钠NH2NH2-SO2H(红色品红)(无色品红)2分子醛基与1分

6、子无色品红结合,形成新的紫红色化合物:HRCSO2NHC==NH2HOR(紫红色化合物)NH–SO2–CHOH过碘酸-雪夫反应的原理二、正常血细胞染色反应1、粒细胞系统原始粒细胞为阴性反应;自早幼至中性分叶粒细胞均呈阳性反应;随细胞成熟反应逐渐增强。嗜酸性粒细胞颗粒之间的胞浆呈红色,嗜碱性粒细胞为阳性反应2、红细胞系统一般幼红细胞与成红细胞均呈阴性反应3、单核细胞系统原单(—)幼单(+)单核(+~++)4、淋巴细胞多数淋巴细胞(—)少数呈(+)5、巨核细胞、血小板(+)6、其他细胞浆细胞一般为阴性反应,少数

7、呈阳性反应,巨噬细胞(+)反应分级-胞浆中无颗粒+浆淡红色极少颗粒++浆深红色较少颗粒+++浆深红色颗粒紧密++++深红色颗粒紧密无空隙糖原2临床意义1、红血病、红白血病时,幼红细胞呈阳性反应,阳性反应百分比增高,程度也很强,有时个别红细胞也呈阳性反应2、缺铁性贫血,珠蛋白生成障碍(地中海贫血)以及MDS时幼红细胞可呈阳性反应3、巨幼贫、溶贫,再障和白血病等疾病有时为阴性反应,有时个别幼红细胞呈阳性反应临床意义4、鉴别白细胞系统疾病急性淋巴细胞白血病时,白血病性原始淋巴细胞的阳性反应物质为红色颗粒状或红色块

8、状,底色不红。急性粒细胞白血病时,白血病性原始粒细胞的阳性反应物质呈均匀分布的红色颗粒状或均匀红色,急单时,原始单核细胞的阳性反应物质呈红色颗粒状,弥散分布。碱性磷酸酶染色染色原理1钙钴法(传统法)血细胞的碱性磷酸酶在PH9.6左右的碱性条件下,将基质液中β-甘油磷酸钠水解产生磷酸钠。磷酸钠与硝酸钙发生反应,形成不溶性磷酸钙。磷酸钙与硝酸钴发生反应,形成磷酸钴,与硫化胺发生反应,形成不溶性棕黑色的硫化钴沉淀。定位

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