夹脊电针调控脊髓损伤模型大鼠微环境NLRP3炎症小体活化作用及机制研究

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1、黑龙江中医药火学博上学位论文中文摘要目的：通过实验研究明确夹脊电针对脊髓损伤大鼠ＮＬＲＰ３炎症小体活化及运动功能的影响，阐明夹脊电针通过调控Ｐ２Ｘ７Ｒ抑制ＮＬＲＰ３炎症小体活化，降低脊髓损伤后炎症反应的作用机制，为夹脊电针临床应用提供实验依据。方法：实验研究分为四部分。？实验：观察夹脊电针对ＳＣＩ大鼠运动功能及ｆｆ髓组织病现形态学的影响。采川随机数字表法将３６只雌性ＳＤ人鼠分成假于术组（Ｓｈａｍ）、模型组（Ｍｏｄｅｌ）和夹脊电针组（ＥＡ）３组，毎组根掂术Ｃ３ｄ

2、、７ｄ时间点分为２个亚组，每个亚组６只大鼠，分别给予相应的处贾或治疗。运用ＢＢＢ评分法观察各组大鼠运动功能；ＨＥ染色观察各组大鼠脊髓纟Ｈ织病理形态学变化。明确夹脊电针对ＳＣＩ大鼠行为学和形态学的影响。－－实验二ＳＣＩ１ＩＬｉ：观察夹脊电针对大鼠脊髓组织促炎性因子ＩＬ８和ｐ表达的影响。采用随机数字表法将３６只雌性ＳＤ大鼠分成假手术组（Ｓｈａｍ）、模型组（Ｍｏｄｅｌ）和夹脊电针组（ＥＡ）３组，每组根据术后３ｄ、７ｄ时间点２个亚组，每个亚组６只大鼠，分别给予相应的处

3、置或治疗分为。ＥＬＩＳＡ－－法检测大鼠脊髓组织ＩＬ１８和ＩＬｉ表达ＳＣＩ太ｐ。明确夹脊屯针对鼠脊髓组织促炎性因子表达的影响。实验三ＩＰ３：观察夹脊电针对ＳＣ大鼠脊髓组织ＮＬＲ炎症小体活化的影响３６只雌性ＳＤ大鼠分成假（Ｓｈａｍ）、模。采用随机数字表法将手术组型组ｏｄｅｌ）和夹脊电针组（ＥＡ）３组，每组根据术后３ｄ、７ｄ时间点分（Ｍ为２个亚组，每个亚组６只大鼠，分别给予相应的处置或治疗ＩＨＣ法检。３－测大鼠脊髓组织ＮＬＲＰ、ＡＳＣ、ｃｌｅａｖｅｄｃａｓｐａｓｅ１表达。明确

4、夹脊电针抑制ＳＣＩ大鼠脊髓组织ＮＬＲＰ３炎症小体活化的作用。实验四：观察夹脊电针对ＳＣＩ大鼠脊髓组织Ｐ２Ｘ７受体表达及ＮＬＲＰ３炎症小体活化的影响。采用随机数字表法将４８只大鼠分成假手术组）（Ｓｈａｍ）（Ｍｏｄｅｌ）、（）Ｃｉ（ＢＢＧ、模型组夹脊电针组ＥＡ和ＢＢ注射组３黑龙江中医药大学博士学位论文共４组，每组根据术后３ｄ、７ｄ时间点分为２个亚组，每个亚组６只火鼠，分别给予相应的处置或治疗ＩＨＣ法检测火鼠脊髓组织Ｐ２Ｘ７Ｒ表达。；Ｗｅｓｔｅｒｎｂ－ｌｏｔ法检

5、测大鼠脊髓组织Ｐ２Ｘ７Ｒ、ＮＬＲＰ３、ＡＳＣ、ｃｌｅａｖｅｄｃａｓｐａｓｅ１蛋白表达。从Ｐ２Ｘ７受体介导ＮＬＲＰ３炎症小体活化角度揭示夹脊电针改善ＳＣＩ大鼠炎症反应的作用机制。结果：一实验：（１）ＢＢＢ评分法观察各组大鼠运动功能：Ｓｈａｍ组大鼠术后未见明显运动功能障碍，术后３ｄ、７ｄＢＢＢ评分均为２１分。Ｍｏｄｅｌ组人鼠术后出现严重的后肢运动功能障碍，术后３ｄ、７ｄＢＢＢ评分均明Ｖ降低，句Ｓｈａｍ组比较，差异具有统计学意义（尸＜０．０５）。ＥＡ＾人鼠术ｆ３ｄ、

6、７ｄＢＢＢ评分＜有所升高，与Ｍｏｄｅｌ组比较，差异具有统计学意义（Ｐ０．０５）。（２）ＨＥ染色观察各组大鼠脊髓组织病理形态学变化：Ｓｈａｍ组大鼠脊髓组织结构完整，灰质和白质界限清晰，细胞核形态正常，核仁大而清晰。ｏｄｅ，未见炎性细胞浸润、出血坏死、组织水肿等Ｍ丨组３ｄ时人鼠脊髓组织可见明显斑片状出血，组织疏松，有空泡形成，仅见残存的祌经细胞，细胞形态改变明显，胞体变小，胞核固缩，可见大量炎性细胞浸润，可见一，ＥＡ部分浆细胞呈核固缩、核染色加深偏于细胞侧，胶质细胞增多。

7、组３ｄ时大鼠脊髓组织病理改变与Ｍｏｄｅ１组类似，可见点片状小出血灶，组织疏松，神经细胞数量较Ｍｏｄｅｌ组增名，炎性细胞浸润及胶桢细胞增多情况较Ｍｏｄｅｌ组减轻。Ｍｏｄｅｌ组７ｄ时脊髓组织疏松严重，人景空泡形成，？白质呈空泡退变样变化，残存神经细胞进步减少，人Ｍ炎性细胞浸润及＿Ａ组７？？胶质细胞增生ｄ时］，。Ｅ可见组织结构趋完整灰质和丨１质界限隐约可见，组织空泡少见，炎性细胞及胶质细胞减少，取而代之以大量形状不规则的神经细胞，胞体及胞核正常。二实验：－ＥＵＳ－Ａ法检测

8、各组大鼠脊髓组织ＩＬ１８和ＩＬ１３表达情况ａｍ组：Ｓｈ大（－－ＩＬ１鼠脊髓组织可见少量１８和ＩＬＰ表达，且术后３ｄ、７ｄ维持在稳定水平。＿－－ｆ术后３（１、７〇１时间点，模型组大鼠脊髓组织ＩＬ１８和ＩＬ１３表达，Ｓｈａｍ｜高与（＜组比较．）ＥＡ组，差异具有统计学意义（Ｐ〇０５。给予夹脊电针治疗后，大４黑龙江中医药大学博士学位论文ＩＬ－１Ｉ－１７ｄＭｏ鼠脊髓组织８和ＬＰ表达下降，术／ｎ时间点，与ｄｅｌ组比较，差异