人源化单克隆抗体研究进展

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1、20103302生物工程2班郭婉然人源化单克隆抗体的研究进展一，人源化单克隆抗体的定义人源化的单抗则是制作出鼠的单抗后，利用基因操作手段，置换或者切除单抗基因中鼠源性的蛋白片断，弱化其在人体内的抗原性，达到疗效。（取得抗体效价高的小鼠外周血B细胞，细胞融合杂交后筛出阳性克隆，培养后提取mRNA，反转装入载体测序，基因操作剪切替换，在装入其它载体在合适体系中表达，然后纯化抗体。二，人源化单克隆抗体的研究发展通过免疫的.天然的以及合成的抗体库展示技术或者利用转基因小鼠，虽然可以获得人源单克隆抗体，但是进一

2、步改造传统的杂交瘤技术所制备的大量源单克隆抗体。仍然是目前开发用于人类疾病治疗的一种可能途径和源头，如若将这些特异性和亲和力较强的非人源单抗进行人源化改造后，仍然比从头开始以新的靶点来开发治疗性单抗剂更有前景。早期的临床试验证明鼠源性单抗为异种蛋白应用于人体后，可引起机体免疫系统对该异种蛋白质的免疫排斥反应，产生人抗鼠抗体应答，重复使用时甚至可导致病人严重的过敏性休克，其次鼠单抗通常不能有效激活机体的生物效应功能，如补体依赖的细胞毒及抗体依赖的细胞毒作用。此外，由于HAMA反应的存在，鼠单抗在人体内往

3、往被快速消除，其半衰期也较短。随着对各类抗体结构和氨基酸序列，及其变异的种属和功能之间的深入了解，而能够利用抗体工程和功能之间关系的深入了解，而能够利用抗体工程技术对抗体结构进行改造，抗体的应用经历了非人源抗体，人+鼠嵌合抗体，人源化抗体，Primatization，最终可到制备全人源单抗的转基因小鼠和噬菌体展示文库等不同的阶段，其中将动物来源的单克隆抗体人源化，以降低这些单抗的免疫原姓使之可成为用于人类疾病的治疗，仍然是目前研究的一个热点，本文就要人源化单克隆抗体的研究进展作一综诉，至今人源化单抗通

4、常使用的方法主要有嵌合，重构和表面重塑。三，人源化单克隆抗体的研究方法1,嵌合抗体用人源抗体恒定区取代鼠单抗体恒定区而构建的人-鼠嵌合抗体，已被证实保留了其亲本鼠单抗的特异性抗原结合能力并能够降低免疫原性，目前美国正式批准上市的4个人—鼠嵌合抗体产品在临床应用中取得良好效果。2，抗体改型技术每一抗体分子Fab段的轻，重链可变区有6个抗原互补决定区（CDR）CDR2和CDR3之间有一个结构稳定作用的框架区，即以FR分隔而起支架作用，共同形成CDR平面可直接接触抗原，决定抗体的特异性，FR只是作为支持CD

5、R的支架，而且其立体构象极为保守，改型抗体就是移植非人源抗体的CDR到人抗体骨架区，同时维持与亲本非人源抗体相似的CDR构象构建而成的人源化抗体。相对于亲本非人源抗体和嵌合抗体，改型抗体仅有9%来源于亲本非人源的单抗，经临床试验证明，其改型抗体的免疫原性得到显著降低。3，抗体表面重塑技术1991年Padlamt提出了利用表面重塑的方法来改造非人源抗体，此方法的原则是将非人源单抗可变区表面非人源的基酸残基替换为人源性的氨基酸残基，使非人源抗体Fv区的表面人源化，降低其免疫原性，同时不影响Fv区的整体空的

6、表面重塑，通过对抗原——抗体相互作用的模拟，对抗体分子微观构象与一级序列之间关系的推测，减少了抗体人源化过程中的盲目性。4.利用计算机模拟技术，对鼠源抗体的人源化改造计算机与生物技术的发展日渐成熟，使其应用于抗体人源化改造成为可能，指导抗体改型和抗体的表面重塑，取得了很好的效果，通过对抗原—抗体相互作用的模拟，对抗体分子微观构象与一级序列之间关系的推测，减少了抗体人源化过程中的盲目性。5.通过抗体库技术对非人源抗体进行人源化(1)用噬菌体展示抗体组合文库技术优化人源改型抗体(2)噬菌体展示组合文库对抗

7、原表位定向选择四，人源化单克隆抗体在医学上的应用近年来美国FDA批准的新药中，工程抗体占很大比例，目前已有100多种人源化单抗进行了临床试验，其中数十种抗体相关新药得到了应用，人源化方法还在不断发展，综合，合理应用上诉各种方法，提高抗体亲和力，减低抗体异源性，同时兼顾抗体的免疫学火化作用，针对不同的异源抗体选择合适的人源化途径，构建更适于临床应用的人源化抗体，将为新药的开发和一些顽固疾病的治疗开辟蹊径。