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1、濒危兰科药用植物DNA条形码鉴定［摘要］兰科药用植物形态分类困难，此研究采用DNA条形码分子鉴定法从分子水平验证兰科药用植物的传统形态分类。以matK,psbA-trnH和ITS2序列作为DNA条形码对已进行了形态鉴定的49属135种163份兰科药用植物样品进行分子鉴定，经DNA提取，PCR扩增、双向测序及校对拼接后，将得到的序列在GenBank中进行BLAST比对，然后运用MEGA7.0软件中的Neighbor-joining(NJ)法构建物种系统进化树。结果表明，163份样品均能成功提取DNA;matK,psbA-trnH和IT
2、S2序列的PCR扩增效率分别为100%,100%,98.77%；共获得487条序列，其中345条序列在GenBank数据库中比对到了相应物种的序列，142条为新增序列；运用NJ法构建的兰科药用植物系统进化树中，基于matK序列所构建的物种系统进化树要优于基于psbA-trnH和ITS2序列所构建的系统进化树。matK,psbA-trnH和ITS2序列在鉴定兰科药用植物过程中互为补充，DNA条形码分子鉴定法可用于辅助兰科药用植物的分类鉴定。本文采集自网络，本站发布的论文均是优质论文，供学和研宄使用，文中立场与本网站无关，版权和著作权归
3、原作者所有，如有不愿意被转载的情况，请通知我们删除匕转载的信息，如果需要分享，请保留本段说明。［关键词］兰科；DNA条形码；药用植物；分子鉴定[Abstract]Inthisstudy,DNAbarcodingwasusedtovalidatethetraditionalmorphologicalclassificationofmedicinalplantsofOrchidaceae.The163samplesof135speciesbelongto49generawhichhavebeenconfirmedbymorphologi
4、calidentificationwerecollected.Candidatesequences,includingmatK,psbA-trnHandITS2sequences,wereamplified，bidirectionallysequenced,andassembled.AllthesequenceswereblastedtoGenBankdatabaseatNCBI,thenanalyzedusingNeighbor-joiningtreemethodbyMEGA7.0.TheresultsshowedthattheD
5、NAsof163samplesweresuccessfullyextracted.TheamplificationefficiencyofmatK,psbA-trnHandITS2sequenceswere100%,100%and98.77%，respectively.The487sequenceswereobtained,345sequencesofwhichhavematchedcorrespondingsequencesintheGenBankdatabaseand142sequenceswerenewsequences.Th
6、etopologyofNJtreewhichwereconstructedwiththematKsequenceswasbetterthanthetreesofpsbA—trnHandITS2sequences.Inconclusion,thematK,psbA-trnHandITS2sequenceswerecomplementaryandsuitableforidentificationofmedicinalplantsofOrchidaceae.DNAbarcodingcanbeusedasanauxiliarymeansfo
7、ridentificationofmedicinalplantsofOrchidaceae.[Keywords]Orchidaceae；DNAbarcoding；medicinalplants；molecularidentification兰科Orchidaccac是世界性大科之一，包括地生、附生、菌类寄生等生活方式［1］，在全世界约有800属20000〜35000种［2-4］,FloraofChina中记载中国境内的野生兰科植物共有194属（中国特有属11个）1388种（中国特右种491个）［4］。兰科植物中的许多物种因其形态高度
8、进化，物种之间仅有极细微的差异，从形态上对其进行鉴定较困难。自双名法确立以来的250多年里，人类共鉴定和描述了约170万种生物［5］，但这仅仅占到分类学家预计物种数量的15%［6］。DNA条形码（DNAbarcoding）是一种基于D
