兔骨折愈合过程中骨折端血流量变化与病理变化的关系

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1、兔骨折愈合过程中骨折端血流量变化与病理变化的关系　　摘要:目的研究骨折愈合过程中病理改变与血流量变化规律，并探讨其间的关系.方法在兔左侧桡骨中段制作骨折动物模型，应用单光子放射计算机断层成像术（SPECT）测定骨折端不同时相点血流量变化，并取骨折端标本脱钙进行光镜和电镜观察.结果伤后24h内骨折端病理改变以组织坏死和炎症反应为主要变化，72h～3alfracturemod-elsadeintheleftradiusofrabbits，thenthebloodfloeasuredbySPECT（singleph

2、otonemissionputerizedtomography），andspecimensicroscopeobservationafterdecalcificationatintervalsofdifferenttime.RESULTSThechiefpathologicalchangesmationreactionalosseoustissueedafter8allevelat8thaybesomekindoffactorpro-ducedbyactiverepairingcellsg・kg

3、-1），常规脱毛，无菌条件下做左前肢中段外侧纵行切口约1.5cm，暴露桡骨，环行剥离骨膜显露桡骨，在小骨膜剥离器保护下用牙科磨钻于桡骨中段横行锯断（牙科钻头直径0.5mm），清洗创面，逐层缝合伤口.由于兔上下尺桡关节无活动性，故离断桡骨后稳定性好，不需要固定［1］.术后3d使用青霉素，im40万U，1次・d-1.　　1.2方法　　1.2.1骨折端血流量的测定在模型制备完毕后8，24和72h，1，3，5和8-亚甲基二磷酸盐（MED37MBq・kg-1），同时开始采样，速度1帧/2s，

4、采样时间为1min，得出时间放射性记数曲线，计算伤部及健侧对应部位峰值的放射性计数，以×103cpm表示.为减小由于药物推注速度及推注药物量引起的误差，骨折端血流量以患肢峰值放射性计数与健侧肢体相应部位峰值放射性计数之比表示.对照组利用相同方法测定和实验组骨折端对应部位与对侧相应部位峰值放射性计数之比.实验中选定骨折端及健侧分析相素数为4×4，约占骨折端1.5cm的范围.血流量测定所用仪器为东芝710A/DTSPECT仪;MDP标记率>95%.　　1.2.2骨折端病理观察　　将实验组动物在不同时相点测定

5、血流量后处死，取骨折端标本分别用40g・L-1甲醛和30mL・L-1戊二醛固定12h，按Kaneko等［2］方法脱钙，常规处理进行光镜和电镜观察.　　统计学处理:所得数据用X±Δt表示，并利用第三军医大学数学教研室研制的PDA-2程序进行统计学分析.　　2结果　　2.1病理变化　　该组动物在8h和24h骨折端光镜下主要病理变化表现为骨折端出血、炎细胞浸润及近骨折端的骨细胞变性坏死，遗留空虚的骨陷窝;电镜下可见骨细胞有核固缩、异染色只边集现象，偶见溢出的红细胞及坏死组织碎片.72h光

6、镜下除见轻度出血和中性粒细胞浸润外，可见骨折端纤维母细胞自骨膜下大量增生入骨折间隙，夹杂有少量的成骨细胞（Fig1），电镜下发现骨折端有胶原原纤维生成.骨折后1wk光镜下见骨折端成骨细胞数目明显增多，有纤维性骨痂生成，并初步形成骨岛，电镜下见纤维母细胞、成骨细胞异常活跃，粗面内质网极其发达，呈层状排列，并扩张成池，成骨细胞呈线形排列（Fig2）.伤后3wk骨折端软骨骨痂与骨性骨痂混杂在一起，新生血管明显增多，纤维母细胞数目减少，核变得扁平;电镜下可见新生的骨细胞，周围陷窝不明显，尚有较多的粗面内质网，部分成骨

7、细胞出现空泡样变.第5周时骨折端成骨细胞、纤维母细胞数量明显减少，纤维骨痂消失，软骨骨痂减少，呈局灶性，骨基质和成熟骨小梁增加，电镜下仍发现有成骨细胞和软骨细胞.至第8周时骨折部位骨组织结构趋于完善，髓腔基本形成，并可见破骨细胞在髓腔侧聚集（Fig3），电镜下主要见正常的骨基质及骨细胞.　　本实验兔桡骨骨折愈合过程中的病理改变与经典的骨折愈合病理变化过程一致，24h内骨折端以典型的炎症反应、组织细胞坏死为主，72h出现纤维母细胞大量增生进入骨折端，伤后3-亚甲基二磷酸盐（MDP）和骨组织具有较强的亲和力，注入

8、体内后通过血液循环迅速进入骨组织的特性，以在特定时间骨折端含有MDP的量来衡量骨折端血流量情况，并应用SPECT探讨性的对骨折端血流量进行了相对定量.实验时在经静脉注入一定量MDP同时，SPECT的探头开始采集一定时间内动物体内放射性记数，并将全身单光子放射信号存入储存器，根据需要可任意选定某一骨性部位进行放射粒子数分析，经过计算机统计和处理，可得出任意一部位的放射性粒子数.该实验选定骨折端部位和健