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时间:2018-10-12
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1、大鼠CAG证病结合模型的宏观症征观察【摘要】目的:观察大鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)证病结合模型宏观症征的改变。方法:Wistar雌性大鼠,随机分为对照组、CAG组、脾虚CAG组、肝郁CAG组和肾虚CAG组。CAG造模采用脱氧胆酸钠和阿斯匹林水溶液交替饮用加免疫损伤法,脾虚造模采用耗气破气加饥饱失常法,肝郁造模采用钳夹激怒加肾上腺素注射法,肾虚造模采用MTU饮用法。总造模时间35〜51周。结果:各CAG证病结合模型在症状、舌象、体重、身长、尾长、Lees指数、腹膜后脂肪湿重和指数、体温、食量和饮水量、口腔pH值、胃液pH值等方面
2、出现与衰老、虚证、肝郁、发育、代谢、胃粘膜萎缩等相关的变化。结论:本实验重视慢性造模的证病结合模型宏观症征的观察,具有一定意义。【关键词】大鼠;CAG;证病结合模型;宏观症征宏观症征是反映人体病理的重要指征,也是中医学的临床辨证的主要依据。我们在大鼠CAG证病结合模型的实验研究中重视宏观症征的观察。1材料和方法动物及分组普通级Wistar雌性大鼠,320只,体重(士)g,北京医科大学实验动物科学部提供。按体重配对随机分为5组,对照组60只,CAG组65只,脾虚CAG组65只,肝郁CAG组65只,肾虚CAG组65只。药品及试剂脱
3、氧胆酸钠(北京市海淀区微生物培养基制品厂,批号930901)%水溶液;阿斯匹林(湖南洞庭制药厂,批号940722)%水溶液;川厚朴:枳实:大黄(购自北京北新中药店,经鉴定生大黄为Rheumpalmatum,川厚朴为Magnoliaofficinalis,板实为Citrusaurantium)为3:3:2的100%水煎剂;%肾上腺素注射液(北京制药厂,批号92041710);甲基硫氧嘧啶(MTU,北京化工厂,批号750820)%水溶液。造模方法CAG造模取上述浓度的脱氧胆酸钠和阿斯匹林水溶液隔周交替代饮水至实验结束。并取同批大鼠
4、胃粘膜组织生理盐水溶液(30%),与等量完全弗氏佐剂混合,充分乳化后,足跖部皮内注射,在实验第10、24和48d作免疫注射(末次注射浓度为60%,不加弗氏佐剂),/只;造模时间35〜51周。脾虚造模实验第6周开始,用耗气破气加饥饱失常法,取上述比例和浓度的川厚朴、枳实、大黄煎剂隔日灌胃,3ml/只,同时隔日喂饲,喂饲日不限量;造模时间30〜46周。肝郁造模实验第8周开始,用钳子夹大鼠尾部,使之保持激怒、争斗状态,每天30min,同时每3周%肾上腺素腹侧皮下注射2次,/只•次(含肾上腺素);造模时间28〜44周。肾虚造模实验第6
5、周开始,MTU以%浓度加入脱氧胆酸钠溶液或阿斯匹林溶液中自饮;造模时间30〜46周。各组处置动物购回预养2周后造模。对照组:正常饲养;CAG组:CAG造模;脾虚CAG组:CAG造模加脾虚造模;肝郁CAG组:CAG造模加肝郁造模;肾虚CAG组:CAG造模加肾虚造模。各组分别于实验35、45、51周分3批处死动物检测各指标。观察指标实验前,实验过程和实验第35、45、51周分批观察动物症状及活体舌象,体重,身长,尾长,计算Lees指数,腹膜后脂肪湿重和指数,体温,食量,饮水量,拉尾排便阳性率,氧耗量,口腔pH值,胃液pH值。腹膜后
6、脂肪指数为脂肪重量与体重之比。体温为腋温,采用半导体温度计检测。食量和饮水量采用组内群测方法,连续测量1周。氧耗量检测参考徐敏方法[1]。口腔pH值用何庆年法[2]:精密试纸(〜)从口侧放入口腔,让动物用舌头搅拌数下,取出比色。测量前30min实验组将药液换成自来水。胃液pH值按唐旭东法:动物禁食不禁水24h,乙醚吸入麻醉,剖腹后结扎贲门和幽门,摘出全胃,沿胃大弯剖开胃腔,以生理盐水冲洗胃腔并收集,用精密试纸测pH值。统计学处理组间比较采用t检验。2结果症状实验前各组动物毛色光润,耳尾色粉红,神态活泼,大便正常,不扎堆。对照组
7、:实验27周后,毛色稍差,1只见白内障,动物性格转为温顺;实验34周毛色开始变黄。各实验组实验4周后,均见毛色光泽开始变差,眼稍眯。CAG组:实验13周后,开始见尾色黄,部分动物见稀便;实验27周后,见瘦弱,毛色、尾色明显差。脾虚CAG组:实验8周,见毛脏,稀便,神态萎靡,耳尾色白,扎堆拱背;实验13周后,开始见背毛稀,尾色黄;实验27周后,下门齿相对于对照组、CAG组、肝郁CAG组较黄,1只动物见白内障。肝郁CAG组:实验8周后,开始见易怒,尾巴发热;实验34周后,见激怒明显,无故撕咬。肾虚CAG组:实验8周见毛枯,嗜睡,眼
8、睁不大,温顺,个别有颤抖,耳尾色白,部分溏便;实验27周后,开始见全身脱毛,行动迟缓,形态虚弱,3只动物见白内障,下门齿变黄最明显。实验34周后,见身上发冷。死亡率高。舌象实验8周后,对照组舌淡红,苔薄白;CAG组舌淡红,苔略少;脾虚CAG组舌淡红,苔少;肝郁CAG组舌淡红,
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