脂多糖刺激肺血管内巨噬细胞环氧合酶-2表达意义

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1、脂多糖刺激肺血管内巨噬细胞环氧合酶-2表达的意义脂多糖刺激肺血管内巨噬细胞环氧合酶-2表达的意义更新日期:2011-01-18伍伟玲 陈正堂 蔡恩齐 罗显荣 李胜亮摘 要:目的 探讨脂多糖(LPS)对肺血管内巨噬细胞(PIM)环氧合酶-2(COX-2)的作用及意义。 方法 改良法分离、培养猪PIM,以LPS(10μg/ml)刺激,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2mRNA的变化;免疫组化染色法观察COX-2酶蛋白的改变;放射免疫分析法(RIA)测定前列腺素E2(PGE2)变化,以间接显示COX活性的改变。 结果 LPS刺激后,P

2、IMCOX-2mRNA和酶蛋白表达及PGE2浓度急剧增加,显著高于对照组(P<0.01);COX-2酶蛋白表达与细胞上清PGE2含量呈正相关(r=0.94,P<0.01)。 结论 LPS刺激后,PIMCOX-2诱导性表达,导致前列腺素(PGs)大量合成和释放,可能在急性肺损伤(ALI)的发病中起重要作用。关键词:脂多糖类; 巨噬细胞,肺血管内; 前列腺素; 肺损伤,急性Changesofcyclooxygenase-2inpulmonaryintravascularmacrophagesstimulatedbylipopolysacchari

3、desWUWeiling CHENZhengtang CAIEnqi,etal.(CancerCenterofPLA,XingqiaoHospital,TheThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400037,China)Abstract:Objective Tostudythechangesofcyclooxygenase-2(COX-2)inpulmonaryintravascularmacrophages(PIMs)stimulatedbylipopolysaccharides(LPS). Me

4、thods Withmodification,porcinePIMswereisolated,culturedandstimulatedbyLPS(10μg/ml).ThechangesofCOX-2mRNAwasdetectedbyreversetranscription-polymerasechainreaction(RT-PCR).ThechangesofenzymeproteinofCOX-2wereobservedwithamethodofimmunohistochemistrystain.Thecontentofprostagla

5、ndinE2(PGE2)inthesupernatantofPIMswasmeasuredbyradio-immunoassay(RIA)soastoindirectlyshowactivitychangeofCOX. Results WithLPSstimulation,theexpressionofPIMs,COX-2mRNA,enzymeproteinandthelevelsofPGE2wereincreasedmorerapidlythanthoseinthecontrolgroup(P<0.01).Positivecorrelati

6、onwasfoundbetweentheexpressionofCOX-2enzymeproteinandthecontentofPGE2(r=0.94,P<0.01). Conclusions AfterstimulationofLPS,thesynthesisandreleaseofPGscausedbyinducibleexpressionofCOX-2inPIMsmightplayanimportantroleindevelopmentofacutelunginjury(ALI).Keywords:Lipopolysaccharide

7、s; Macrophages,pulmonaryintravascular; Prostaglandins; Lunginjuries,acute▲  肺血管内巨噬细胞(pulmonaryintravascularmacrophage,PIM)为位于肺泡壁毛细血管腔内的肺内单核/巨噬细胞成员之一[1],吞噬、分泌功能非常活跃。Bertram等[2]曾发现,PIM可经环氧合酶(cyclooxygenase,COX)代谢花生四烯酸(arcachidonicacid,AA),释放AA代谢产物(AAM)等炎症介质。Wilbom等[3]报告COX有两型

8、,其中COX-1起生理调节作用;COX-2为诱导型,在脂多糖(LPS)等的刺激下,可大量释放AAM,在机体的炎症反应中起重要作用;并发现肺泡巨噬细胞有COX-2表达

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