联苯类化合物及其制备方法和应用，涉及一种新联苯

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1、doi:10.6043/j.issn.0438-0479.201603105不同植物中柯里拉京含量的高效液相色谱法测定及其抑制胃癌细胞增殖活性研究林志灿1,2，郑溢1,2，李旎1,2，林靖怡2，林河通1*，明艳林1,2*(1.福建农林大学食品科学学院，福建福州350002；2.厦门华侨亚热带植物引种园，厦门市植物引种检疫与植物源产物重点实验室，福建厦门361002)摘要：建立高效液相色谱(HPLC)测定柯里拉京含量的方法，比较不同植物的柯里拉京含量，筛选出柯里拉京含量高的植物.并初步研究其抑制胃癌细

2、胞增殖的活性.HPLC结果显示：龙眼核、叶下珠、龙眼壳、榄仁树和纤梗叶下珠的柯里拉京含量较高，依次为643,619,569,271和159μg/g.通过体外实验初步研究柯里拉京抑制胃癌细胞生长的活性，噻唑蓝(MTT)法测得柯里拉京对胃癌细胞SGC7901的半抑制浓度(IC50)值为(42.46±3.31)μmol/L；吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)和Hoechst33258染色结果表明柯里拉京能诱导胃癌细胞SGC7901凋亡.摸索的HPLC条件能较快速、准确地检测出不同植物的柯里拉京含量,所测的12

3、种材料中龙眼核的柯里拉京含量最高；柯里拉京具有抑制胃癌细胞SGC7901增殖的活性，并且能够诱导其凋亡.关键词:柯里拉京；HPLC；含量测定；抑制胃癌增殖中图分类号:R282.71文献标识码:A柯里拉京(Corilagin,b-1-O-galloyl-3,6-(R)-hexahydroxydiphenoyl-D-glucose)，又名鞣云实精，属可水解鞣质，分子量634.45，柯里拉京在叶下珠(PhyllanthusurinariaL.)[1]、龙眼(DimocarpuslonganLour.)[2

4、]、余甘子(PhyllanthusemblicaLinn.)和榄李(LumnitzeraracemosaWilld.)等多种植物中有分布，且是老鹳草(GeraniumwilfordiiMaxim.)、叶下珠等中草药及制剂的指标成分，但关于柯里拉京单体的研究近几年才逐渐深入.研究发现柯里拉京具有抗氧化、抗炎、保护肝脏等活性.特别是有良好的抗肿瘤[1]活性，在体外可显著抑制人肝癌[3]、卵巢癌[4]、喉癌[5]、胆管癌[6]等多种癌细胞株的生长，在体内也可以明显抑制卵巢癌和肝癌移植瘤的生长，且对正常卵巢

5、上皮细胞毒性非常低[4,7].目前，柯里拉京的主要来源还是植物提取.随着柯里拉京的需求量越来越大，急需寻找可大量提取柯里拉京的植物,但关于柯里拉京在植物中的分布、含量等的研究报道很少.近年来,本实验室对柯里拉京的提取制备及其抗肿瘤活性进行了较深入的研究，并已申请柯里拉京作为抗癌植物新药的国家发明专利[8].本研究在本实验室前期工作的基础上选择10种植物12个部位的材料，建立高效液相色谱（HPLC）测定方法对它们进行柯里拉京的含量测定，通过比较筛选出其中柯里拉京含量较高的植物，并在体外实验中检测柯里拉

6、京对胃癌细胞SGC7901的抑制效果.1材料与方法1.1材料6科8属的10种植物12个部位为供试植物样品：叶下珠(PhyllanthusurinariaL.)全草、纤梗叶下珠(P.tenellusRoxb.)全草、锐尖叶下珠(P.debilisKleinexWilld.)全草、铁苋菜(AcalyphaaustralisL.)全草、火炭母(PolygonumchinenseL.)带叶嫩枝、三白草(Saururuschinensis(Lour.)Bail.)、榄仁树(TerminaliacatappaL

7、.)叶、龙眼(DimocarpuslonganLour.)壳、龙眼核、荔枝（LitchichinensisSonn.）壳、荔枝核、石榴（PunicagranatumL.）籽.12种材料均由厦门华侨亚热带植物引种园专家鉴定；对照品柯里拉京购自成都瑞芬思生物科技有限公司(批号：K-004-150730)，纯度>98%；色谱纯乙腈、甲醇、吖啶橙（AO）购自Sigma公司；溴化乙锭（EB）购自生工生物工程（上海）股份有限公司；Hoechst33258购自碧云天生物技术研究所；新生胎牛血清（FBS）购自美国H

8、yclone公司；细胞培养基RPMI1640购自美国Gibco公司；其他试剂均为国产分析纯试剂；人胃癌细胞SGC7901购自中国科学院上海细胞所.1.2方法1.2.1高效液相色谱(HPLC)条件色谱柱，WatersXBridgeTMShieldRP18(4.6mm×250mm，5μm)；DAD检测器，检测波长280nm；柱温30℃；流动相流速1mL/min；进样量20μL；流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)；洗脱程序：0~10min，V(A):V(B)=15