射频消融诱导兔肺内vx2鳞状细胞癌模型细胞凋亡

《射频消融诱导兔肺内vx2鳞状细胞癌模型细胞凋亡》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、射频消融诱导兔肺内VX2鳞状细胞癌模型细胞凋亡关键词:导管消融术;VX2肿瘤;兔;肺肿瘤;脱噬作用摘要:目的探讨射频消融兔肺内VX2肿瘤诱导肿瘤细胞凋亡情况.方法采用VX2肿瘤组织块悬液肺内注入法在20只新西兰白兔体内建立兔VX2肿瘤肺内移植模型;实验组12只新西兰白兔给予射频治疗，计数毁损中心区肿瘤组织和边缘区肿瘤组织凋亡细胞指数;对照组8只新西兰白兔，予假性治疗，计数肿瘤组织凋亡细胞指数.结果治疗组肿瘤经射频治疗后发生凝固性坏死及细胞凋亡，毁损边缘区肿瘤组织凋亡细胞指数为（345±38），而毁损中心区肿瘤组织凋亡细胞指数为（84±12），两者差异非

2、常显著（P<0.01）;对照组肿瘤组织凋亡细胞指数为（2.0±0.4），与治疗组毁损区中心组织凋亡细胞指数及毁损区边缘组织凋亡细胞指数相比均相差非常显著（P<0.01）.结论射频消融诱导肿瘤细胞凋亡是射频治疗恶性肿瘤的一项重要机制.　　Keyor;rabbits;lungneo-plasms;apoptosis　　Abstract:AIMToobservestatusofcellapoptosisofVX2tumorinrabbitlungafterradiofrequencyablation.METH┐ODSByinjectingVX2t

3、umortissuesuspensioninthelung，thetransplantedlungcancermodeloraftertheablation.Apoptoticindexofthefringetissueoftheabla-tionportantmechanismofradiofre-quencyablationofmalignanttumor.　　0引言　　经皮穿刺射频消融是一种发展迅速的热损毁技术，在CT、超声、磁共振引导下经皮穿刺置入电极，确定电极位于目标区，启动射频机，射频波经电极尖导入周围组织，产生热量，使组织发生凝固性坏死.

4、该项技术已经应用于灭活骨肿瘤［1］，颅内肿瘤［2］，肝癌［3］，肝内转移癌［4，5］，近期程庆书等［6］报道应用射频消融技术治疗肺内肿瘤，赵正源等［7］报道射频消融治疗肺内转移瘤，取得良好效果.本实验探讨射频消融兔肺内VX2肿瘤诱导细胞凋亡情况.现介绍如下.　　1材料和方法　　1.1材料VX2肿瘤细胞是一种可移植的兔鳞状细胞癌株，该细胞株由第四军医大学病理学教研室提供.射频机及电极:RF2000型射频机及10尖锚状电极，美国Radiotherapeutic公司生产.CT机:EXEL2400elect型CT机，以色列ElscintLtd.公司生产.光学显

5、微镜:日本Olympus公司生产.透射电镜:JEM-2000EX型透射电镜，日本JEOL公司生产.荧光显微镜:日本Olympus公司生产.　　1.2方法　　1.2.1兔肺肿瘤模型的制作将冰冻VX2细胞悬液常规细胞培养法复苏后，取1mL（107・mL-1）接种于1兔后腿外侧肌肉内，制成荷瘤种兔，2m后即可用于射频治疗.本实验采用上述方法在20只新西兰白兔体内建立肺内VX2肿瘤移植模型，随机将这20只新西兰白兔分为治疗组12只用于射频消融，8只用作对照进行假性治疗，只置入电极，不予射频治疗.　　1.2.2射频治疗过程RF2000型射频机采用双

6、负极输入，可伸缩的10针锚状电极输出，电极展开最大直径为35mm，输出频率为450MHz，最大输出功率100L・kg-1im麻醉，仰卧固定于托板上，放置负极板于腹部和背部脱毛区，右胸壁常规消毒，铺无菌手术巾.CT扫描确定肿瘤部位及穿刺部位、方向、深度，置入电极，再CT扫描，确定电极位于肿瘤区，展开电极直径达18～20mm，开启射频机，起始输出功率为30，1・d-1.　　1.2.3标本采集治疗结束24h，空气栓塞法处死新西兰白兔，治疗组取消融区中心及消融区边缘组织为凋亡检测标本，对照组取肿瘤中心组织为凋亡检测标本，常规制片待检

7、.　　1.2.4凋亡细胞检测采用Clontech公司生产的ApoAlert○RDNAFragmentationAssayKit-TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒对上述标本进行检测，严格按照试剂盒说明进行操作，FITC荧光标记，PI复染，荧光显微镜检查，细胞核内出现黄绿色荧光为阳性细胞，随机计数10个高倍视野中凋亡细胞数目为凋亡细胞指数.　　统计学方法:t检验.　　2结果　　2.1射频治疗后肿瘤组织和周围肺组织的病理改变射频治疗后肿瘤组织呈灰白色、干燥的凝固性坏死，中间破溃，与周围肺组织界限清楚，周围肺组织呈红褐色凝固性坏死，在坏死灶周边为出血带，在出血带

8、外侧是大片的充血、水肿区;切面上见肿瘤坏死灶、肺组织坏死灶、出血带、水肿区呈年轮样分布.HE染