绿叶中色素提取和分离

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1、绿叶中色素的提取和分离一、学习目标1．理解叶绿中色素的提取和分离的原理2．掌握提取和分离叶绿体中色素的基本方法3．描述各种试剂的作用，并能分析实验中出现的各种现象（一）实验原理绿叶中的色素是有机物，能溶解在有机溶剂无水乙醇(或丙酮)中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。层析液也是有机溶剂，不同的色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢，因而可用层析液将不同色素进行分离。（二）主要实验材料：1.新鲜的绿叶（如菠菜的绿叶）2.干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布

2、，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10mL），天平。3．无水乙醇（如果没有无水乙醇，也可用体积分数为95%的乙醇，但要加入适量的无水碳酸钠，以除去乙醇中的水分），层析液（由20份在60～90℃下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1分苯混合而成。93号汽油也可代用），二氧化硅和碳酸钙。（三）方法与步骤：1.提取绿叶中的色素（1）称取5g的绿叶，剪碎，放入研钵中。（2）向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入10mL无水乙醇，进行迅速、充分的研磨。（二氧化硅有助于研磨的充分，碳酸钙可防止研磨中色素被破坏。）（3）将研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布）中进行

3、过滤。将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。2．制备滤纸条将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条横线。3．画滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细线。待滤液干后，再画一两次。4．分离绿叶中的色素将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）轻轻插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口。注意，不能让滤液细线触及层析液。（也可用小烧杯代替试管，用培养皿盖住小烧杯。）5．观察与记录观察试管内滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色。将观察结果记录下来。（四）

4、注意事项71．选材时要选取鲜嫩、颜色深绿的叶片，因为这样的叶片中色素的含量较高。2．研磨要迅速、充分：①无水乙醇容易挥发②为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素③叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。3．将干燥的滤纸一端剪去两角可以使滤纸两侧的色素与滤纸中间的的色扩散速度一致，得到的色素带整齐。4．重复画滤液细线2～3次可以使滤液细线含有较多的色素。5．滤液细线要得细而直可以使各种色素扩散的起点相同，扩散均匀。6．层析液不能触及滤液细线以防止滤液细线中的色素溶于层析液，从而使滤纸条上色素带过浅或没有色素带。7．层析时，用培养皿盖住小烧杯可以

5、防止层析液中有毒物质挥发。五、实验结论及分析预期实验现象实际观察到的现象误差分析提取色素分离色素六、例题分析1．提取光合色素，进行纸层析分离，对该实验中各种现象的解释，正确的是A．未见色素带，说明材料可能为黄化叶片B．色素始终在滤纸上，是因为色素不溶于层析液C．提取液呈绿色是由于含有叶绿素a和叶绿素bD．胡萝卜素处于滤纸前方，是因为其在滤液中的溶解度最高【解析】：题干要求对色素提取和分离实验现象的解释进行判断，那么首先要想到本实验都会出现哪些现象，每种现象出现的原因是什么，如果能准确掌握这些基础知识，解决本题就比较容易了。2．下图表示叶绿体色素的提取和分离

6、实验的部分材料和用具。据图回答：（1）图中步骤①加入研钵内的物质：A10mL，作用是；B少许，作用是使研磨更充分；C少许，作用是。（2）图中步骤②将浆糊状的研磨液倒入漏斗中，漏斗底部放有。（3）图中步骤③前去两角的作用是，画滤液细线的要求是。（4）图中步骤④中关键应注意：加盖的目的是；色素带最宽的是，扩散速度最快的是。7【解析】：通过本题的图示即可知道本题是考查叶绿体色素的提取和分离的相关知识。那么首先要联想到关于本实验的相关基础知识，然后按照每题的要求进行做答即可。七、知识反馈（一）同步练习1．下列关于“绿叶中色素的提取和分离”的实验目的叙述，错误的是A

7、．提取绿叶中的色素B．分离绿叶中的色素C．研究绿叶中的色素种类D．研究色素在叶片中的分布场所2．下列关于“绿叶中色素的提取和分离”的原理叙述，错误的是A．色素是有机物，易溶于有机溶剂B．可以用无水乙醇作溶剂提取色素C．叶绿素b在层析液中的溶解度最大D．在层析液中溶解度越小的色素，纸层析时扩散的速度越慢3．在提取绿叶中的色素时，选取的最佳叶片应是A．大而多汁的叶片B．革质叶片C．刚刚长出来的小嫩叶D．鲜嫩、色浓绿的叶片4．关于“绿叶中色素的提取和分离”实验的叙述，不正确的是A.在研磨叶片时应充分，以使色素能够充分溶解B.在层析时，将干燥的滤纸一端剪去两角，可

8、以使色素带均匀扩散C.在层析时，应使层析液没过滤液细线，以便使色素