高粱抽穗期基因ma1和ma3的分子进化及抽穗期的q

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1、高粱抽穗期基因Ma1和Ma3的分子进化及抽穗期的Q第一章文献综述1.1高粱基因组学研究进展在分子标记应用早期,RFLP标记在鉴别调控高粱重要农艺性状的相关基因区域,遗传多样性分析和比较基因组学作图等方面都起了非同凡响的作用。最早报道的高梁分子遗传连锁图谱就是由Hulbert等(1990)构建的图长度为283cM的含有36个RFLP标记和8个连锁群(LG)的遗传连锁图。随着高粱分子标记的逐步开发和应用,SSR标记越来越多地被应用到育种工作中。与其他种类的分子标记相比,SSR标记具有重复性好,多态性高,操作快速简单等特点。起初,高粱SSR标记的开发主要是通过构建高粱基因文库,用S

2、SR探针杂交和蹄选阳性克隆然后测序的方法(ConditandHubbell1991)<.但是这种方法既繁琐,花费又大。所以Broino等(1997)利用探针扫描高粱基因组文库和搜寻数据库的方法发现了13对SSR引物,其中的7对被整合到一张他们用同样的群体构建的高粱RFLP分子遗传谱图的5个连锁群中。在2000年,Kong等利用寡聚核苷酸探针扫描51个高粱基因组文库的方法检测到了38对SSR引物,并用它们鉴定了包括一个重组自交系的亲本(BTx623XIS3620C)在内的18个高粱品种的基因型,把其中31对在两亲本之间有差异的标记整合到他们已构建的RFLP分子遗传图谱中,

3、有效地填补了空白间隙。同年,Bhattramakki等(2000)也是利用搜寻BAC文库和数据库的方法开发了313对SSR标记,并发表了一张长度为1406cM的其中整合有147对SSR标记和323对RFLP标记的分子遗传图谱。在这张图谱的每个连锁群中,SSR标记的数量从8个到30个不等,有效覆盖了连锁图的75%,为以后的高粱分子肓种工作做出了巨大贡献。然后他们将其中136对SSR标记整合在Menz等(2002)利用亲本为BTx623XIS3620C的重组自交系群体构建的长为1713cM的高密度分子遗传图谱中。这张图谱至今也堪称经典,对高粱基因组学的深入研究有着重要的意义。..

4、1.2调控高粱抽穗期的基因的研究进展高粱是短日照作物,光周期对高粱的抽穗期有较大影响(卢庆善等,2005)。现认为至少有6个基因位点通过调节高粱对光周期的敏感度来调控高粱的抽穗期,分别是MaiM5份栽培品种和3份近缘野生品种)可以在北京抽穗的高粱品种种植于中国农业大学上庄实验站(上庄40°N,116°E),记录抽穗日期。同年冬季,我们将在北京套袋自交收种后得到的H)7份高粱品种(104份栽培品种和3份近缘野生品种)种植于中国农业大学海南实验站(三亚]8°N,109°E)并记录抽穗日期(附表1)。抽穗日期以在一行种植的10株单株中有5株开始抽穗时

5、的日期为准。..2.2结果与分析在本研宄中,我们将Mij基因组序列分为基因上游区域(起始密码子上游1856bp),基因编码区(从起始密码子至终止密码子共7320bp,包括4个外显子和3个内含子)和基因下游区域(终止密码子下游889bp)进行分析。如表2-1所示,在242份栽培高粱品种的基因组序列中,我们共发现了221个单核昔酸多态位点(SNP)和117个插入缺失多态位点(In-Del)。几乎近一半的SNP存在于基因上游区域,内含子和外显子次之,基因下游区域最少。而In-Dd则大部分存在于内含子,外显子和基因上游区域次之,基因下游区域最少。而在9份野生高粱品种的Tl/a』基因组

6、序列中,我们共发现了106个单核苷酸多态位点(SNP),有近一半的SNP存在于内含子区域,基因上、下游区域次之,外显子最少(附表6)。Childs等(1997)的研究结果表明,Mzj基因的第三个外显子上的一个腺噪呤的缺失突变会引起转录移码,导致转录提前终止,不能合成具有正常生物活性的光敏色素B,因此含有基因的植株表现为对光周期不敏感而开花提早。在本研究使用的全部材料中,只发现了6份(gee,g58m,g44in,g38m,gcpandgsl86)含有inoetal.,1997;Kongetal.,2000;Bhattramakkietal.,2000;Schlossetal.

7、,2002;Srinivasetal.,2008;Srinivasetal.,2009)、sam系列(Lietal.,2009)和SB系列(Yonemaruetal.,2009).其中Fs系列中共含有均勾覆盖高粱10条染色体的286对标记,因此我们先使用这286对标记进行初步引物蹄选,然后根据染色体上多态性标记空缺的位置,补充蹄选相应的sam系列和SB系列标记(朱梦娇,2014)。最终尽量保证每条染色体上有10对左右的引物均匆分布,每两对引物的物理距离在7000kb左右。结论本研究以Hiro-lxEar

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